林梦洁
- 作品数:6 被引量:49H指数:4
- 供职机构:南京医科大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省科技计划项目江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 长链非编码RNA HOTAIR对非小细胞肺癌迁移和侵袭能力的影响被引量:12
- 2014年
- 目的探讨长链非编码RNA HOTAIR在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及4株细胞系(A549、SPC-A1、SK-MES-1和16HBE)中的表达,并分析其对细胞侵袭和迁移能力的影响。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)检测HOTAIR在38例NSCLC组织及4株细胞系中的表达水平,并进一步利用过表达和RNA干扰技术探讨HOTAIR的生物学功能。通过分别转染pcDNA-HOTAIR或si-HOTAIR来上调或下调HOTAIR的表达,以空载体(pcDNA3.1-NC)和阴性对照(si-NC)作为对照组,用qRT-PCR检测转染效率。用MTT法和Transwell法评估异常表达的HOTAIR对NSCLC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 38例NSCLC组织中HOTAIR相对表达水平为24.48±59.55。与正常支气管上皮细胞系16HBE相比,HOTAIR在SPCA1和SK-MES-1细胞中相对高表达,而在A549细胞中相对低表达。转染HOTAIR siRNA 48h后,A549和SPC-A1细胞中HOTAIR表达下调;转染pcDNA3.1-HOTAIR 48h后,A549细胞中HOTAIR表达上调。MTT实验显示,通过RNAi技术来抑制HOTAIR的表达,对NSCLC细胞的增殖能力无明显影响。Transwell实验显示,通过转染si-HOTAIR来下调HOTAIR表达可抑制癌细胞的迁移和侵袭(P<0.05);相反,过表达HOTAIR可以显著促进癌细胞的迁移和侵袭(P<0.05)。结论 HOTAIR在NSCLC中异常高表达,能显著增强NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,提示可能与不良预后相关。
- 林梦洁陈志强尹凌帝孙倩刘博巽孙明德伟刘志军
- 关键词:非小细胞肺癌长链非编码RNA迁移
- miR-196a调控HOXA5对人胃癌细胞MGC-803侵袭转移的影响及机制研究被引量:10
- 2014年
- 目的检测miR-196a在人胃癌组织及细胞系中的表达,探讨抑制或过表达miR-196a对胃癌细胞侵袭转移能力的影响,以及其可能作用的靶基因。方法通过实时定量PCR技术检测胃癌组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors或mimics抑制或上调其表达,并通过定量PCR检测转染效率。利用划痕迁移实验、Transwell侵袭实验和MTT实验检测上调或下调miR-196a水平对MGC-803细胞的迁移、侵袭和增殖能力的影响。采用生物信息学及Western blotting方法验证miR-196a对靶基因HOXA5的调控机制。结果相对于正常胃黏膜组织及细胞,胃癌组织和细胞系中miR-196a的表达水平显著上调(上调约28倍,P<0.01),MGC-803细胞中转染miR-196a inhibitors或mimics能显著抑制(下降了53%,P<0.01)或上调(上调约8倍,P<0.01)miR-196a表达水平。抑制miR-196a表达能降低MGC-803细胞的迁移、侵袭和增殖能力,而上调其表达则相反。miR-196a能够负性调控HOXA5的表达。结论胃癌组织及细胞系中miR-196a的表达上调可能通过抑制HOXA5的表达显著提高胃癌细胞的侵袭转移能力,促进胃癌的发生、发展。
- 尹凌帝孙倩林梦洁孙明德伟刘志军
- 关键词:胃癌迁移
- SLC26A4基因编码区功能特征及分子进化分析
- 2013年
- 目的:探讨溶质转运家族26,成员4(SLC26A4)基因编码区的功能特征及其突变与遗传性非综合征型耳聋(NSHL)发生的关联性。方法:应用生物信息学方法对37个物种的SLC26A4基因编码蛋白(Pendrin)的序列进行系统发育分析,并用滑窗法进一步预测保守区,同时利用在线软件对其编码产物进行结构预测和同源建模。结果:SLC26A4基因在哺乳动物中尤其是灵长目动物中高度保守,通过滑窗法预测得到了12个保守区。二维结构预测提示Pendrin的N末端和C末端可能存在卷曲螺旋结构,同源建模预测显示STAS结构域中的插入序列(IVS)存在物种间差异性。结论:SLC26A4基因突变在NSHL发生中发挥重要作用,发生在保守区的错义突变将导致蛋白结构和功能的改变,从而产生相应的表型。C末端的STAS结构域内的插入序列可能在人类中有独特的作用。
- 林梦洁范燚郁芸韩新焕
- 关键词:SLC26A4基因分子进化
- 长链非编码RNAMEG3对胃癌细胞增殖的影响被引量:6
- 2014年
- 目的:探讨长链非编码RNA MEG3在胃癌组织及细胞系中的表达水平,以及过表达MEG3对胃癌细胞增殖能力的影响,并探索其可能的作用机制。方法:用定量反转录PCR(qRT-PCR)技术检测胃癌组织及细胞系中MEG3的表达水平;通过转染pcDNA-MEG3上调MEG3的表达水平,并通过qRT-PCR检测转染效率。用MTT和克隆形成试验检测上调MEG3的水平对BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力的影响,Western blot检测这两种细胞中上调MEG3的水平对p53蛋白的表达水平的影响。结果:相比正常胃组织及细胞,在胃癌组织和细胞中MEG3的表达出现显著下调,SGC7901、MGC-803和BGC-823细胞中MEG3的表达水平分别是正常胃上皮细胞GES-1中的73.6%、42.0%和27.1%(P<0.05)。BGC-823细胞和MGC-803细胞中转染pcDNA-MEG3能显著上调MEG3的表达,MEG3的表达水平分别为对照组的252倍和311倍(P<0.05);MTT和克隆形成试验显示,上调MEG3的表达能降低BGC-823细胞和MGC-803细胞的增殖能力。Western blot实验显示,转染了pcDNA-MEG3的MGC-803和BGC-823细胞中p53的表达相较对照组中显著增加。结论:胃癌组织及细胞中MEG3的表达下调,且这可能通过抑制p53蛋白的激活从而促进胃癌细胞增殖,影响胃癌的发生和发展。
- 孙倩刘博巽林梦洁尹凌帝陈志强孙明德伟刘志军
- 关键词:胃癌长链非编码RNA细胞增殖P53
- 医生职业形象与医患关系认知现状调查与分析被引量:19
- 2013年
- 医生位于医疗活动的第一线,直接与患者接触,其职业形象代表了广大医务工作者在公众心目中的印象。调查和访谈的结果显示,当前医患之间出现信任危机,医生的职业形象也在无形中影响着医患关系。医患纠纷发生时,除传统解决医疗纠纷的方式外,"医调委"的第三方介入调解模式也取得一定成效。缓和医患关系,营造和谐的医疗环境,并不只是医方的责任,需要国家、医院和医生、患者三方共同努力,而加强医学生人文教育也是不容忽视的一个方面。
- 朱迪迪林梦洁连欢陈伟黄健成刘高双卢建华
- 关键词:医患关系医学人文教育
- miR-196a调控p27^kip1促进非小细胞肺癌细胞增殖的机制研究被引量:2
- 2013年
- 目的探讨miR-196a在非小细胞肺癌(NSCLC)组织及细胞系中的表达,以及抑制或过表达miR-196a对NSCLC细胞增殖能力的影响及其作用的靶基因。方法实时定量PCR(QPCR)技术检测NSCLC组织及细胞系中miR-196a的表达水平,通过转染miR-196a inhibitors及miR-196a mimics抑制或上调miR-196a的表达水平,并通过QPCR检测转染效率。用MTT和克隆形成实验检测上调或下调miR-196a对SPC-A1或A549细胞增殖能力的影响;生物信息学及Western blotting方法分析验证miR-196a对靶基因p27kip1的调控作用。结果与正常肺组织及细胞相比,在NSCLC组织和细胞中miR-196a的表达出现显著上调,SPC-A1细胞和A549细胞中转染miR-196a inhibitors或miR-196a mimics能显著抑制或上调miR-196a的表达;抑制miR-196a的表达能降低SPC-A1细胞增殖能力,而上调miR-196a的表达则能促进A549细胞增殖。miR-196a能够负性调控p27kip1的表达。结论 NSCLC组织及细胞中miR-196a的表达上调能够抑制p27kip1的表达,并显著促进NSCLC细胞增殖,影响NSCLC的发生与发展。
- 刘向华林梦洁尹凌帝孙倩孙明德伟刘志军
- 关键词:MIRNA细胞增殖P27KIP1