李运峰
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 含正确木聚糖酶基因转化子的活性筛选被引量：1
- 2010年
- 为有效地筛选到带有正确基因的转化子,探讨了活性筛选方法。将木聚糖酶基因与pET20b重组,转化BL21(DE3)大肠杆菌,选取转化子,放入0.5mLLB培养基过夜培养,补加9.5mL培养基2.5h后诱导,收集并冻融裂解细胞,检测酶活性。通过对10个转化子的筛选,其中7个转化子酶活性接近或高于阳性对照菌落,认定为阳性转化子,经DNA测序证明基因序列正确。这个过程只要2～3天,具有快速简便特点。与以往筛选方法中针对转化子中的基因不同,作者直接检测转化子酶活性,筛掉不能表达活性酶的突变基因;其次,用冻融裂解细胞方法简化裂解过程,便于自动化高通量操作;最后,通过比较初筛酶活性,可以筛选高酶活转化子。
- 刘亮伟李运峰郭晓丹
- 关键词：转化子活性检测木聚糖酶
- 末端氨基酸残基的去除对黑曲霉木聚糖酶XynⅢ热稳定性的影响
- 微生物木聚糖酶广泛应用于纸浆生物漂白、饲料添加剂、面团改良、及功能性低聚木糖制造等。本实验室筛选的黑曲霉A-25是一株木聚糖酶高产菌株,由它分泌的β-1,4-内切木聚糖酶的最适温度为48℃、最适pH为3.8,不利于在高温...
- 李运峰
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶热稳定性
- 文献传递
- 末端氨基酸残基去除对黑曲霉木聚糖酶XynⅢ热稳定性影响
- 微生物木聚糖酶广泛应用于纸浆生物漂白、饲料添加剂、面团改良、及功能性低聚木糖制造等。本实验室筛选的黑曲霉A-25是一株木聚糖酶高产菌株,由它分泌的β-1,4-内切木聚糖酶的最适温度为48℃、最适pH为3.8,不利于在高温...
- 李运峰
- 关键词：木聚糖酶突变酶热稳定性
- 文献传递
