李经略 作品数:29 被引量:106 H指数:6 供职机构: 中山大学肿瘤防治中心 更多>> 发文基金: 广东省卫生厅资助课题 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
两种人化SCID小鼠的建立及其免疫应答性 1997年 将人外周血淋巴细胞(PBL)和腹腔淋巴结淋巴细胞(PLNL)移植入严重联合免疫缺陷疾病(SevereCombinedImmunodeficientDisease,SCID)小鼠腹腔,建立人化SCID小鼠(即SCID-hPBL,SCID-hPLNL)。两个月后,两种人化小鼠体内淋巴器官都可以检测到人T、B淋巴细胞分布;小鼠血清人源性IgG和抗EB病毒壳抗原IgG抗体水平(IgG/VCA)比较显示,用B958死细胞作为VCA来源所诱导的实验组10只小鼠,IgG/VCA阳性率为70%(7/10),对照组为17%(2/12)。14只SCID-hPLNL小鼠血清内人IgG/VCA的几何平均滴度(GMT)和血清IgG浓度在1∶108和96.2±56.4μg/L;在另8只SCID-hPBL中为1∶7.9和13.84±6.0μg/L。实验提示,SCID-hPLNL小鼠较SCID-hPBL小鼠更适合于人源性特异IgG的诱导。 肖锡宾 张昌卿 陈系古 陈系古 李经略 冯凯涛 黄冰 冯凯涛关键词:免疫缺陷 淋巴细胞 IGG EBV-EA IgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用 被引量:9 1999年 目的:探讨EB病毒早期抗原(EA)IgG抗体测定在鼻咽癌诊断和筛查中的应用。方法:对454例鼻咽癌和300例健康人的血清分别用免疫酶法测定抗EA抗原的IgA/EA抗体,用ELISA法测定IgG/EA抗体,以及用抗酶率法测定抗EBVDNA酶抗体。并用免疫酶法测定IgA/VCA和ELISA法测定IgG/EA的方法对鼻咽癌高发区人群的9536例血清进行鼻咽癌筛查。结果:3种方法中ELISA法检测IgG/EA诊断鼻咽癌的效率最高(925%)。以双项检测阳性(IgG/EAA值≥018和IgA/VCA滴度≥1∶80)为标准,鼻咽癌筛查的阳性预示值(鼻咽癌数/阳性血清数)为165%(13/79),高于单项阳性标准,P<005。结论:ELISA检测血清IgG/EA的方法适用于鼻咽癌的血清学诊断,与检测IgA/VCA的免疫酶法联合应用的双阳性标准适合于在鼻咽癌筛查中采用。为了提高筛查的敏感性,建议将双项阳性标准中的IgA/VCA滴度定为≥1∶5。IgA/VCA滴度从≥1∶8升高到≥1∶5。 肖锡宾 张昌卿 李经略 黄宝珍 冯凯涛 叶永照 孙韵 黄腾波关键词:鼻咽癌 IGG抗体 提高EB病毒血清学在诊断鼻咽癌中的效益 被引量:28 2002年 目的 探讨同时应用VCA IgA、EA IgA和EA IgG三项检测在血清学诊断鼻咽癌中的效益。方法 收集 2 6 6例未经治疗的鼻咽癌患者和 347例健康成人的血清。用免疫酶法检测VCA IgA ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)替代免疫酶法检测EA IgA和EA IgG抗体。应用新的统计学方法来评估这三项检测的不同优势比。结果 同时应用VCA IgA、EA IgG和EA IgA三项检测的灵敏度和特异度分别为 95 .11%和 97.4 1% ,高于这三项检测的单独应用 (VCA IgA为 90 .6 0 %和 94 .5 2 % ,EA IgG为93.98%和 93.6 6 ,EA IgA为 89.84 %和 88.18% )。再者 ,VCA IgA、EA IgG和EA IgA三项检测均呈阳性者的优势比 (1912 .5 )远远高于其中两项检测呈阳性者 (VCA IgA和EA IgG为 2 7.90 32 ;EA IgG和EA IgA为 11.16 90 ;VCA IgA和EA IgA为 8.0 32 8) ,而两项检测阳性的优势比又高于单个检测阳性者(VCA IgA为 0 .12 14 ;EA IgG为 0 .170 5 ;EA IgA为 0 .0 4 88)。结论 ELISA法较免疫酶法更能确切反映血清中EB病毒早期抗原的抗体水平。VCA IgA、EA IgG和EA IgA的联合应用能显著提高灵敏度和特异度 ,明显增高检测阳性的优势比 ,因此 ,能有效地提高EB病毒血清学在诊断鼻咽癌时的效益。 张昌卿 宗永生 黄宝珍 孙韵 叶永照 冯凯涛 李经略 张锋关键词:鼻咽肿瘤 EPSTEIN-BARR病毒 血清学 酶联免疫吸附测定 卵巢上皮性癌组织中WAF1基因的表达 被引量:4 2003年 【目的】探讨卵巢上皮性癌组织中WAF1表达情况及其与肿瘤临床病理参数的关系。【方法】用RT-PCR和免疫组化分别检测30例正常卵巢、32例良性卵巢上皮性肿瘤和55例卵巢上皮性癌组织中WAF1mRNA和WAF1蛋白表达情况,并结合临床病理进行探讨。【结果】正常卵巢、良性卵巢上皮性肿瘤、卵巢上皮性癌组织中WAF1mRNA阳性表达率分别为73%、56%、40%(P=0.012),WAF1蛋白阳性表达率分别为80%、56%、36%(P=0.001),卵巢上皮性癌WAF1mRNA及其蛋白表达均低于其它两组。卵巢上皮性癌中WAF1mRNA表达与其蛋白表达呈正相关。WAF1蛋白低表达与卵巢癌FIGO分期晚有关(P=0.032),与年龄、组织学类型、病理分级、残余肿瘤大小无关(P>0.05),而WAF1mRNA与上述各项临床病理参数均无关(P>0.05)。【结论】与正常卵巢和良性卵巢肿瘤相比较,卵巢上皮性癌存在WAF1基因转录抑制及蛋白表达低下,WAF1下调可能与上皮性卵巢癌发生有关;晚期卵巢上皮性癌较早期者WAF1蛋白表达低,提示WAF1蛋白低表达与卵巢上皮性癌的恶性生物学行为有关。 梁立治 颜笑健 熊樱 李经略 张昌卿 袁颂华关键词:卵巢上皮性癌 WAF1 基因 癌组织 鼻咽癌患者血清抗体相关抗原优势表位的筛选 被引量:6 2004年 背景与目的:EB病毒与鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)密切相关。可应用多种血清学方法检测鼻咽癌患者血清EBV抗体,本研究利用鼻咽癌患者血清中纯化的EB病毒相关多抗,从噬菌体展示的随机肽库中筛选相关的优势抗原表位,在表位水平为鼻咽癌患者血清抗体的检测寻找新的检测抗原。方法:以B95-8细胞EBV蛋白为抗原,从鼻咽癌患者血清中洗脱EB病毒相关多抗,对噬菌体展示的随机12肽库进行三轮生物淘洗。用夹心ELISA法和竞争抑制实验筛选阳性克隆,对这些阳性克隆进行测序,并将其展示的外源多肽与EB病毒蛋白的抗原性区域进行同源序列比对分析。结果:从第三轮的淘洗洗脱液中随机挑取64个噬菌体克隆,用夹心ELISA法筛选到25个阳性克隆,阳性率为39.06%,选取其中13个克隆进行竞争ELISA实验,有11个克隆出现抑制现象,抑制率在18.09%~65.94%之间。选取吸光度(A)值和抑制率均较高的5个克隆为阳性克隆,它们所展示的外源多肽序列分别为-A-T-S-H-L-H-V-R-L-P-W-T-(d15/d18)、-G-S-T-H-K-H-N-H-F-N-K-T-(d19)、-K-P-I-H-E-H-P-H-R-F-K-S-(e8)、-H-T-H-K-I-K-I-P-L-P-I-Q-(e23)。这些多肽序列分别与EB病毒膜蛋白(d15/d18)、EB病毒胸苷激酶(d19)、EB病毒主要壳蛋白(e8,e23)抗原区域的氨基酸存在序列相似性。 张颖 肖锡宾 张昌卿 李经略 孙韻 叶永照 冯凯涛关键词:鼻咽肿瘤 抗原表位 宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMV DNA的检测 被引量:5 2002年 目的:测定宫颈癌患者外周血中人乳头状瘤病毒(HPV)、单纯疱疹病毒(HSVⅡ)和人巨细胞病毒(HCMV)DNA,探讨其对HPV感染的高危妇女发生宫颈癌的追踪及监测作用。方法:采用HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ及HCMVPCR试剂盒,用PEGeneAmpPCRSystem2400扩增,测定104例宫颈癌患者外周血中的HPV6.11、HPV16.18和80例HSVⅡ及HCMV的DNA,并以32例子宫肌瘤患者为对照组。用χ2行差异性检测。结果:1)宫颈癌患者外周血中HPV6.11、HPV16.18、HSVⅡ和HCMV病毒DNA测定的阳性率分别为35.58%、20.19%、10.00%和3.75%。对照组分别为12.50%、9.37%、3.13%和0%。2)宫颈癌患者外周血中HPV6.11混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为2.04%和1.92%;HPV16.18混合HSVⅡ或混合HCMVDNA阳性率分别为5.36%和3.30%。对照组无1例出现病毒DNA的混合阳性。结论:1)宫颈癌患者外周血中HPV、HSVⅡ和HCMV等病毒DNA阳性率高于对照组。2)宫颈癌患者外周血中的病毒DNA阳性率以HPV为主(P<0.05)。3)宫颈癌患者外周血中各种病毒DNA混合阳性率较低,其协同的致癌作用有待进一步研究。4)在HPV感染的高危人群中定期进行宫颈涂片和检测外周血中HPVDNA,可起到对病情的追踪及监测作用。 彭小萍 李孟达 李俊东 李经略 叶永照 林妙卿关键词:人乳头状瘤病毒 人巨细胞病毒 外周血 HCMV DNA 鼻咽癌高癌家族的监控和筛查 被引量:9 2000年 目的:通过对高癌家族成员的有效监控,探索筛查无明显症状的早期鼻咽癌病人的方法,以提高鼻咽癌早期发现、早期诊断和早期治疗。方法:选择在两代人中有 3个以上鼻咽癌患者的“高癌家系”作为本组“监控家系”,对其有血缘关系的亲属( 1~ 3级亲属)共 121人作为本组的监控对象,对他们进行详细的鼻咽及头颈部临床检查、 EB病毒血清学抗体检测、血标本作基因定位检测。定期(约 6个月)进行追踪复查,对有可疑患癌者即作鼻咽光导纤维镜检查及鼻咽活检组织病理学检查。一旦确诊鼻咽癌,即安排治疗。结果:在接受监控的 15个家系的 121个家庭成员中,检测 EB病毒血清抗体 IgA/VCA(≥ 1∶ 10)阳性者 42人,酶联免疫吸附( ELISA法)检测 IgG/EA(≥ 0.18)者 31人 ,阳性率分别为 34.9%及 25.6%。经首次检查及以后的 6~ 19个月追踪观察中共发现新鼻咽癌 6例,癌检出率为 4.13%( 6/121)。 6例鼻咽癌中,Ⅰ期 5例、Ⅱ期 1例。结论:⑴鼻咽癌高癌家族成员 EB病毒相关抗体呈高阳性表达, EB病毒血清抗体检测是最佳的筛查手段;⑵鼻咽癌高癌家族人员是鼻咽癌发生的高危人群,对他们进行监控、定期追踪复查,可提高三早率,提高鼻咽癌治疗效果。 张锋 莫浩元 黄晓明 邓满泉 张爱兰 李经略 叶永熙 冯凯涛 孙韵 曾益新关键词:鼻咽肿瘤 高癌家族 EB病毒 Analysis of BAC_5 mcAb-Related Epitope Using Random Peptide library 2003年 Objective To identify epitope relating to BAC 5 mcAb, a kind of monoclonal antibody (mcAb) located on the surface of nasopharyngeal carcinoma (NPC) cells. Methods Using BAC 5 mcAb as a selected target, the 3 rounds of biopanning to a 12 mer random peptide library (RPL) presented by M13 phages were carried out. The positive M13 phage clones were chosen and confirmed with sandwich ELISA for antibody capture and competitive assay. The exogenous DNA fragments in the positive/negative M13 phages were sequenced to deduce and compare the order of the amino acids of exogenous peptides among the phage clones. Results 77% (35/45) of the phages eluted from the 3rd round of biopnning could be captured by BAC 5 mcAb. The 3 kinds of the peptides were displayed by M13 phages from the 8 positive clones identified with competitive assay. The same character of '-P-V-'structure existed near N-terminus of the 3 different peptides, i.e. -H-Q-S-H-Y-P-Y-P-V-V-S-L- (4/8) -Q-N-Q-A-W-F-S-Q-P-V-R-M- (3/8) and T-Q-A-Y-K-G-F-P-V-L-P-S- (1/8) in comparison with the peptide ' -N-H-Q-S-T-F-W-Q-K-W-T-A-' displayed by M13 phages from the negative clones (6/6). Conclusion BAC 5 mcAb can recognize the 3 kinds of the peptides with-P-V-structure near N-terminus. These peptides mimic the structure of the epitope on the surface of NPC cells recognized by BAC 5 mcAb. 肖锡宾 张昌卿 张颖 张如华 李经略 冯凯涛 孙韵 叶永照关键词:EPITOPE 抗EB病毒VCA—IgA抗体检测结果一致性检查 被引量:2 1991年 本文报告广东省五个鼻咽癌普查现场组,以各自检测抗EB病毒VCA—IgA抗体的试剂盒,应用免疫酶法,同时检测中山市普查的180份正常人血清,各现场组的检测结果和中山市提供的血清的滴度,通过一致率和Kappa值计算,一致率(P0)为66—86%,Kappa值(K)为0.28—0.48,U为3.14—6.28,P<0.01。结果表明所得的K值均能排除因机遇所致的可能,其一致性是有意义的,从而提示各现场检测的抗EB病毒VCA—IgA抗体的阳性率可提供现场间的比较。 本文还对检测结果和可能影响VCA—IgA抗体检测一致性的因素进行了讨论。 罗慧玲 简少文 梁锦胜 梁淑萍 李经略 黄培春 李锦沅 叶永照 汪慧民 胡孟璇关键词:EB病毒 VCA-IGA抗体 递呈BAE5单抗相关表位的M13噬菌体克隆系及其鉴定 2004年 [目的]获得可递呈BAE5单克隆抗体抗原表位的M13噬菌体克隆系。[方法]应用生物淘洗(Biopanning)方法, 从M13噬菌体随机12肽文库中筛选出能与BAE5单克隆抗体有阳性反应的噬菌体克隆系。通达ELISA竞争反应确定与 BAE5单抗结合率较高的克隆,鉴定这些阳性克隆与正常鼠血清,鼠抗M13血清和健康人IgG,IgA抗体的反应差异。[结果] 经过3轮淘洗,与BAE5单克隆抗体有阳性反应的克隆占83%(15/18)。其中竞争结合率>50%克隆有1、2、7、9、13、14号6 个克隆,它们与BAE5单抗的竞争结合率分别为56.3%、59.5%、58.0%、62.8%、56.4%、63.4%。其中只有1、9、14号克隆 的噬菌体与正常小鼠血清不显示交叉反应。[结论]来自1、9、14.号克隆的噬菌体递呈的抗原表位有别于其它克隆,适用于 BAE5单抗相关表位的研究。 肖锡宾 张颖 张昌卿 李经略 冯凯涛 孙韵 叶永照关键词:噬菌体 单抗 表位 阳性克隆 正常小鼠