李宏伟
- 作品数：76 被引量：204H指数：8
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院微循环研究所更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠脊髓微血管内皮细胞的分离培养与鉴定被引量：3
- 2013年
- 脊髓微血管内皮细胞（spinalcord microvascular endothelialcells，SCMECs）参与构成血脊髓屏障，其功能变化与多种脊髓相关疾病相关。目前分离SCMECs的文献很少。本研究拟基于分离多种原代内皮细胞的经验，建立分离纯化SCMECs的方法。
- 苑晓晨李炳蔚秦伟伟武清斌荆瀛黎李宏伟刘淑英修瑞娟
- 关键词：微血管内皮细胞血脊髓屏障相关疾病分离纯化
- 人体内皮细胞对胆固醇的代谢作用被引量：2
- 1997年
- 研究人体内皮细胞对胆固醇的代谢作用。方法以体外培养的胎儿脐静脉内皮细胞为实验对象，应用免疫印迹技术、同位素标记技术和气相色谱－质谱分析技术，联合测定胆固醇代谢产物２７－羟基胆固醇和３β－羟基－５－胆甾烯酸含量。结果在内皮细胞培养液中，２７－羟基胆固醇和３β－羟基－５－胆甾烯酸含量随培养时间延长而增多；在培养液中加入１００μｇ外源性胆固醇再培养，上述两种产物含量明显增加；应用氘标记胆固醇证明，大部分产物是由细胞摄取的外源性胆固醇在固醇２７－羟化酶的作用下形成的，并且证明体外培养的内皮细胞内含有固醇２７－羟化酶。结论体外培养的人体脐静脉内皮细胞对外源性胆固醇有代谢作用，其路径可能是内皮细胞摄取胆固醇，在固醇２７－羟化酶的作用下，生成容易从细胞内转运出来的２７－羟基胆固醇和３β－羟基－５－胆甾烯酸。
- 修瑞娟段重高李宏伟IngemarBjorkhem
- 关键词：内皮细胞胆固醇代谢动脉粥样硬化
- 人转化生长因子-β2启动子区低氧反应元件突变体报告基因的构建
- 2008年
- 目的:构建人转化生长因子-β2(Transforming growth factor-β2,TGF-β2)启动子区低氧反应元件(hypoxia responsive element,HRE)突变体报告基因。方法:利用重叠延伸PCR技术,以人TGF-β2启动子区报告基因(TGF-β2-pGL3-Basic)为模板,对TGF-β2启动子区(-270bp～+280bp)-114bp、-73bp、-49bp、-4bp和-73/-49 bp位点的低氧反应核心序列5′-RCGTG-3′分别进行定点突变,然后将此突变片段插入荧光素酶报告载体pGL3-Basic进行基因测序。结果:各突变载体的测序结果与预期完全一致。结论:人TGF-β2启动子区HRE突变体报告基因构建成功,为今后进一步研究TGF-β2的低氧调控奠定了基础。
- 苏燕李宏伟张静王春玲修瑞娟
- 关键词：TGF-Β2低氧
- 大鼠胰岛周细胞的分离培养与鉴定
- 2014年
- 胰岛周细胞分布于胰岛毛细血管和微血管管壁,是胰岛微循环的重要组成细胞之一,具有维持胰岛β细胞正常生理功能的作用.胰岛周细胞数量及功能异常可能是糖尿病及其并发症的病理生理基础.周细胞具有组织来源特异性,应用胰岛周细胞研究其在糖尿病发病机制中的作用更为合理.本研究旨在建立大鼠原代胰岛周细胞的分离培养及鉴定方法,为研究周细胞及胰岛微循环在糖尿病发病机制中的作用提供细胞学基础.
- 刘明明李炳蔚王冰孟凡星赵永刚盛有明李宏伟修瑞娟
- 关键词：胰岛微循环周细胞病理生理基础正常生理功能发病机制
- 光学蛋白质芯片检测乳腺癌组织中胸苷磷酸化酶的临床初探
- 2004年
- 目的应用我国自行研制的光学蛋白质芯片检测乳腺癌组织中的胸苷磷酸化酶 (Thymidinephosphorylase,TP) ,为建立一种快速、简便的临床检测方法进行初步探索。方法应用TP的多克隆抗体制备光学蛋白质芯片 ,通过椭偏光学显微成像技术检测20例经病理证实的乳腺浸润性导管癌组织标本和正常组织标本中的TP水平 ,以灰度值表示组织中TP浓度高低。同时应用ELISA方法测定 ,并比较两种方法检测结果的一致性。结果20例癌组织的灰度值35.40±11.55,20例正常组织的灰度值为26.80±8.78,两组间差异具显著性意义 (P<0.05)。以44.36(正常组织平均值 +2倍标准差 )为阈值 ,乳腺癌检测的灵敏度为20.00 %,特异度为100.00 %。同ELISA检测结果相比 ,在20例乳腺癌组织标本检测中 ,两种方法的一致性具极显著意义(P<0.01)。结论我国首创的椭偏光学显微成像技术简单、直观 。
- 李爱玲李宏伟张静王战会孙强靳刚修瑞娟
- 关键词：胸苷磷酸化酶
- 小鼠脊髓微血管周细胞的体外培养及鉴定被引量：2
- 2015年
- 目的应用周细胞培养基（PCM）分离筛选小鼠脊髓微血管周细胞（SCMP）,对其生物学功能进行评价。方法10只3周龄C57小鼠,无菌条件下取脊髓去除软脊膜,剪碎成大约1 mm×1 mm×1 mm。两次酶消化后用含20%牛血清白蛋白的DMEM离心获得微血管。用内皮细胞培养基（ECM）培养,传代2次后改用PCM培养。倒置显微镜观察细胞增殖状况。免疫细胞化学法检测血小板源性生长因子受体β（PDGFRβ）、神经元-胶质抗原2（NG2）、von Willebrand因子（v WF）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。流式检测CD140b、CD31、CD11b和GFAP的表达。将PCM换为10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基,检测细胞α-SMA表达的变化。通过周细胞-内皮细胞共培养成管实验检测细胞成管能力。结果接种48 h细胞爬出,7~9 d汇合,周细胞和内皮细胞伴随状增殖。改用PCM培养后内皮细胞减少,周细胞呈优势生长。免疫细胞化学表明PDGFRβ和NG2阳性,v WF和GFAP阴性;流式结果表明细胞PDGFRβ的阳性率为95.52%±2.55%,GFAP为0.63%±0.26%,CD31为0.80%±0.26%,CD11b为1.02%±0.35%。10%胎牛血清的DMEM促进细胞分化,α-SMA表达升高。成管实验周细胞与内皮细胞共同形成管腔样结构。结论通过PCM筛选法能够成功获得纯度较高的SCMP,所获得的细胞具备明显的周细胞的形态和功能特征。
- 苑晓晨武清斌李宏伟荆瀛黎李炳蔚刘淑英修瑞娟
- 关键词：周细胞脊髓微血管细胞分离
- CPEB4蛋白及其编码基因在制备肿瘤治疗药物中的应用、及肿瘤治疗药物
- 本发明涉及CPEB4蛋白以及CPEB4基因在肿瘤治疗中的一种新用途。具体地，本发明涉及CPEB4蛋白以及CPEB4基因在制备肿瘤治疗药物中的新作用。本发明对于肿瘤细胞增殖、肿瘤细胞周期进展、肿瘤生长和转移的机制研究具有重...
- 鹿文葆韩建群李宏伟李爱玲
- 应用缩时录像和图像处理技术研究内皮细胞有丝分裂特征
- 2000年
- 研究人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和大鼠脑微血管内皮细胞(RCEC)的有丝分裂过程及其运动特征。方法用TimeLapseRecorder8050缩时录像机将人脐静脉内皮细胞及大鼠脑微血管内皮细胞活动的状态进行昼夜36h连续记录 ,然后以正常速度回放磁带 ,经MCIP图像处理系统进行图像分析 ,使细胞的有丝分裂过程在加速24倍的短时间内得到更加清晰的动态再现。结果在细胞分裂间期 ,HUVEC处于动态变化过程中 ,细胞膜以“波浪式”不停地运动 ,并不断地向四周伸出扇形伪足。而RCEC则是显现“阿米巴”样的运动并以泡状伪足向四周不断延伸。HUVEC整个有丝分裂过程所需时间为(31.5±4.4)min(n=15),而RCEC有丝分裂全过程则需(29.7±3.0)min(n=12)。结论HUVEC和RCEC有丝分裂过程所需时间没有明显区别 ,但两种细胞的运动特征却不相同 。
- 李宏伟迟喧修瑞娟
- 关键词：有丝分裂数字图像处理
- 循环内皮细胞的分离和检测
- 目的:在生理及病理条件下从外周血中获取的内皮细胞称为循环内皮细胞(Circulating
- 李宏伟王春玲修瑞娟
- 关键词：循环内皮细胞
- 药物对大鼠急性心肌梗死RAS的影响
- 2003年
- 目的：观察氯沙坦、培多普利对大鼠急性心肌梗死(AMI)后循环和组织RAS的影响。方法：结扎左冠状动脉法制作大鼠AMI模型，随机分为对照组(C)；氯沙坦组(L)；培多普利组(P)；两药合用组(LP)；假手术组(S)。术后3天、1和6周观察循环PRA、AngⅠ、AngⅡ、ACE、ALD和心肌组织AngⅡ、ACE的变化。结果：AMI后3天和1周，C组血浆AngⅡ和ALD水平显著增高，而6周时恢复到与S组没有显著差异。L组血浆AngⅡ水平在三个时间点都显著增高：P和LP组血浆PRA活性在3天时显著增高，血浆ACE、AngⅡ和ALD水平则显著降低；在1周和6周，血浆PRA和AngⅠ显著升高，血浆ACE、AngⅡ和ALD水平则显著降低。C和L组非梗死区心肌组织AngⅡ含量在三个时间点均显著增高；P和LP组心肌组织AngⅡ和ACE水平均显著降低。结论：RAS参与了心肌梗死的病理生理过程，且氯沙坦、培多普利能有效阻断AngⅡ所诱导的负面作用，最终改善心功能。
- 刘佳梅沈潞华杨新春李宏伟谢苗荣
- 关键词：药物急性心肌梗死RAS
