李兆忠 作品数:10 被引量:45 H指数:3 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 中国国际公共关系协会项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
SYBR Green I实时荧光定量RT-PCR测定猴免疫缺陷病毒RNA拷贝数方法的建立 被引量:31 2006年 目的建立SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。方法巢式RT-PCR扩增SIV病毒RNAgag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEMT载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒。该质粒经限制性内切酶NotⅠ酶切后,进行体外转录,转录出的RNA产物(RS)纯化后10倍系列稀释,作出标准曲线,作为SIV病毒RNA荧光定量检测的外标准品。结果应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100 copies/μL。结论制备的RS外标准品纯度高,SYBR Green I荧光染料实时定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数。 丛喆 李兆忠 魏强 许琰 蒋虹 佟巍 卢圣栋 涂新明关键词:SIV 实时荧光定量RT-PCR SYBR 自然杀伤细胞和HIV感染及病毒逃逸 被引量:6 2004年 本文简要介绍了NK细胞表面的两种受体及其信号传导机制 ,论述了在HIV感染过程中病毒逃避NK细胞天然免疫监视作用的机制。 李兆忠 杨晶 卢圣栋关键词:NCR SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR法测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA拷贝数方法的建立 被引量:5 2006年 目的建立SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA。方法巢式RT-PCR扩增SIVmac251病毒RNA gag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEM T载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒。该质粒经大量扩增纯化后定量,10倍系列稀释后,做出标准曲线,作为SIV前病毒DNA荧光定量检测的外标准品。结果应用Roche公司FastStart DNA Master SYBR GreenⅠKit,该标准品可精确定量到10 copies/μL。结论制备的pGEM-SIVgag477质粒外标准品纯度高,SYBR GreenⅠ荧光染料实时定量PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)前病毒DNA载量。 丛喆 涂新明 李兆忠 许琰 蒋虹 佟巍 卢圣栋 魏强关键词:猴免疫缺陷病毒 SYBR 一个系列的非病毒载体及包含其的药物组合物 本发明涉及突变改型的编码绿脓杆菌毒素第III结构域的重组DNA、由所述重组DNA编码的蛋白质和以所述重组DNA作为功能基因而构建的表达型重组体,并涉及所述重组DNA、蛋白质、表达型重组体之一在制备用于靶向性艾滋病基因治疗... 卢圣栋 李兆忠 申景平 陈伟京 洪梅 杜延平 涂新明 魏强 秦川 蒋虹 丛喆 张兵林 杨奎 路金芝 丛维文献传递 艾滋病疫苗研究进展 被引量:2 2003年 侯佩强 艾宪淮 李兆忠关键词:艾滋病 疫苗 病原学 分子生物学 H型非病毒载体以及包含其的药物组合物 本发明涉及非病毒载体及编码其的融合基因,所述非病毒载体是包含受体多肽与富含阳性氨基酸的多肽的靶向性融合蛋白,其将能够在体内表达对细胞具有杀伤作用的蛋白质的表达型重组体靶向性地导入被HIV/SIV感染的CD4+细胞,以使该... 卢圣栋 申景平 洪梅 杜延平 张树民 原菊 蒋虹 丛喆 李兆忠 李静轩文献传递 HIV-1储存库:清除HIV的巨大障碍 被引量:1 2004年 杨晶 李兆忠 卢圣栋关键词:HAART HIV-1 艾滋病病毒1型 联合疗法 CD4^+T淋巴细胞 高效抗逆转录病毒 一个系列的非病毒载体及包含其的药物组合物 本发明涉及一系列非病毒载体及编码其的融合基因,所述非病毒载体是包含受体或辅助受体多肽与富含阳性氨基酸的多肽的融合靶向性蛋白,其将能够在体内表达对细胞具有杀伤作用的功能蛋白质的表达型重组体靶向性地导入被HIV/SIV感染的... 卢圣栋 李兆忠 申景平 陈伟京 洪梅 杜延平 涂新明 魏强 秦川 蒋虹 丛喆 张兵林 杨奎 路金芝 丛维文献传递 一个系列的非病毒载体及包含其的药物组合物 本发明涉及突变改型的编码绿脓杆菌毒素第III结构域的重组DNA、由所述重组DNA编码的蛋白质和以所述重组DNA作为功能基因而构建的表达型重组体,并涉及所述重组DNA、蛋白质、表达型重组体之一在制备用于靶向性艾滋病基因治疗... 卢圣栋 李兆忠 申景平 陈伟京 洪梅 杜延平 涂新明 魏强 秦川 蒋虹 丛喆 张兵林 杨奎 路金芝 丛维文献传递 一个系列的非病毒载体及包含其的药物组合物 本发明涉及一系列非病毒载体及编码其的融合基因,所述非病毒载体是包含受体或辅助受体多肽与富含阳性氨基酸的多肽的融合靶向性蛋白,其将能够在体内表达对细胞具有杀伤作用的功能蛋白质的表达型重组体靶向性地导入被HIV/SIV感染的... 卢圣栋 李兆忠 申景平 陈伟京 洪梅 杜延平 涂新明 魏强 秦川 蒋虹 丛喆 张兵林 杨奎 路金芝 丛维文献传递