方梅霞
- 作品数：42 被引量：135H指数：8
- 供职机构：暨南大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- GHRL基因5'侧翼区多态性对鸡生长和屠体性状的影响被引量：4
- 2011年
- 【目的】分析GHRL基因5′侧翼区变异与鸡生长和屠体性状的相关性。【方法】以杏花鸡×隐性白洛克鸡F2代资源群体和2个随机群体为材料,利用PCR产物直接测序方法鉴别GHRL基因5′侧翼区包括A-2220C位点在内的6个SNPs在群体中的多态性,构建单倍型,分析各SNP基因型和单倍型与鸡生长、屠体性状,以及与腺胃GHRL基因mRNA表达量和血浆GHRL活性蛋白含量的相关性,对鸡GHRL基因5′侧翼区的A-2220C位点进行凝胶阻滞电泳,以探讨该区段对基因转录的作用。【结果】标记-性状关联分析表明A-2220C仅与初生重显著相关(P<0.05),AA基因型个体初生重大于CC和AC基因型个体,差异显著(P<0.05);C-2399Del与56日龄体重、0—4周日增重、胸肌重、翅重显著相关(P<0.05),C Del基因型杂合子优势明显,与其它基因型差异显著(P<0.05)。构建单倍型分析表明单倍型分别与42日龄体重、70日龄体重、0—4周日增重、4—8周日增重、屠体重、半净膛重、全净膛重和胸肉重显著相关(P<0.05);与初生重、21日体重、28日体重、35日体重、49日龄体重、56日龄体重、宰前活重等极显著相关(P<0.01),单倍型组合H3H4(CCAAAC\CCAACDel)是各个显著相关性状中均值最高的优势单倍型组合。EMSA电泳发现含A等位基因的DNA片段能与转录因子特异的结合,初步证实本试验扩增片段对基因的转录存在一定作用。【结论】GHRL基因与鸡生长和屠体性状存在显著相关性。
- 方梅霞徐海平谢亮梁伟涛赖泽颖张德祥聂庆华张细权
- 关键词：GHRELIN基因生长性状屠体性状
- 高血压病血瘀证相关miRNA的筛选被引量：20
- 2015年
- 目的:筛选与高血压病血瘀证相关微小RNA(microRNA,miRNA),从基因组学探索高血压病血瘀证的发病机制。方法:运用高血压病气虚血瘀证、气滞血瘀证、寒凝血瘀证、热结血瘀证、非血瘀证患者和健康人的血清干预人脐静脉血管内皮细胞CRL-1730,建立高血压病血瘀证血管内皮细胞损伤模型;提取各组总RNA,采用Solexa高通量测序法和数字基因表达谱测序原理对各组样本进行测序分析,筛选各组间的差异表达miRNA和mRNA,使用靶基因miRWalk预测软件对2者进行相关性的整合,筛选与血瘀证相关miRNA,qRT-PCR定量分析验证miRNA的表达。结果:整合气虚血瘀组与非血瘀组、气滞血瘀组与非血瘀组、寒凝血瘀组与非血瘀组、热结血瘀组与非血瘀组相关数据后,在高表达的基因群中发现SAT1-Hsa-miR-199a-5p和ATF4-Hsa-miR-1283;qRT-PCR定量检测Hsa-miR-199a-5p和Hsa-miR-1283在高血压病血瘀证组和非血瘀证组中的上调与下调趋势与基因测序结果一致。结论:Hsa-miR-199a-5p和Hsa-miR-1283可能是高血压病血瘀证形成的特异性相关miRNA。
- 何铃方梅霞陈利国袁静周建华徐婧
- 关键词：高血压病血瘀证微小RNA
- 一种便携式甲醛蒸消装置
- 一种便携式甲醛蒸消装置，解决了现有的甲醛消毒装置，操作不方便，在甲醛加热的过程中对操作人员有一定伤害，且无独立通风系统的洁净区，原位消毒困难的问题，其包括送风口、送风管、蒸消袋、排风管、甲醛净化器、甲醛检测探头、甲醛检测...
- 牛海涛和君张建平邢会杰宋琳亮方梅霞赵月齐春丽
- 文献传递
- 家鸡Leptin成熟肽cDNA的克隆、重组蛋白表达及纯化被引量：8
- 2004年
- 从 18周龄鸡卵巢组织中抽提总 RNA,使用六聚体随机引物反转录后 ,用鸡 L eptin(瘦素 )特异性引物扩增出鸡L eptin编码区第 5 2～ 4 6 0 bp的长度为 4 0 9bp的 c DNA片段。根据鸡 L eptin的 3′端第 4 6 0～ 4 92 bp序列设计了 3条部分相互重叠并且顺序串联延伸的下游反义引物 ,并在最后 1条引物 3′端连接上 Eco R 切点 ;在以上用于反转录扩增的 5′端引物的 5′端连接一 Bam H 切点。用该 5′端引物分别与 3个 3′端引物配对 ,利用反转录扩增出的 4 0 9bp的L eptin c DNA片段作为第 1模板进行扩增 ,扩增产物再作为模板与下一引物对再次扩增。经 3次扩增得到编码鸡 L ep-tin成熟肽的全长 4 5 1bp的 c DNA序列。将该 4 5 1bp的 L eptin c DNA序列经 Bam H 和 Eco R 双酶切后 ,克隆入表达质粒 p RSET A的 Bam H 和 Eco R 两酶切位点之间 ,构建成表达质粒 p L ep- SCAU。转化有重组表达质粒 p L ep-SCAU的大肠杆菌 BL 2 1(DE3)在 L B培养基中培养后 ,经 IPTG诱导表达出相对分子质量为 2 0 10 0的鸡 L eptin融合蛋白和少量 4 0 2 0 0的 L eptin融合蛋白。L eptin融合蛋白的表达在 IPTG浓度为 0 .0 5 mmol/ L 时达到最高 ,占总菌体蛋白的 32 .6 %。用 Ni- NTA凝胶从 7L 发酵培养菌裂解液中纯化出 180 m
- 施振旦邵西兵方梅霞于迎春刘颖陈楠
- 关键词：CDNA克隆重组蛋白纯化瘦素
- 鸡Ghrelin基因C2100T位点与生长和脂肪性状的相关性被引量：13
- 2007年
- 选取鸡Ghrelin基因C2100T多态位点,利用PCR-RFLP结合测序技术,对全同胞资源家系470只F2代家鸡进行基因型检测及标记-性状关联分析,并利用已有的mRNA测定数据分析该多态位点与Ghrelin基因mRNA表达量的关系。结果:(1)经PCR-RFLP检测出3种基因型,测序结果证实C2100T是形成酶切多态性的原因;(2)QTDT检验显示,C2100T与鸡1、6、9周龄体重和皮下脂肪厚度显著相关(P<0.05),并且不同基因型个体性状平均值大小关系为CC﹥CT﹥TT;C2100T与其他生长性状和脂肪性状均没有显著相关性;(3)不同基因型个体腺胃中的Ghrelin基因mRNA表达量差异不显著,但含C等位基因个体的mRNA表达量相对T等位基因高。试验结果表明,鸡Ghrelin基因C2100T多态性与鸡的部分生长和脂肪性状存在显著相关性,且C等位基因有利于鸡的体重增长和皮下脂肪沉积。
- 何丹林方梅霞聂庆华彭君瑜邓玉珍张细权
- 关键词：GHRELIN基因
- 猪繁殖候选基因ERK2的克隆、表达及基因多态分析被引量：2
- 2011年
- 【目的】ERK2基因在细胞增殖和分化调控以及启动卵巢排卵的分子信号等过程中发挥重要作用,是影响猪繁殖性状的重要候选基因。本试验对猪ERK2基因序列、基因结构、基因多态性及其表达规律进行初步研究。【方法】以大白猪为材料,采用RT-PCR方法克隆了猪ERK2基因,Real-Time PCR测定该基因在猪各组织器官中的分布,并对该基因的结构和多态性进行分析。【结果】从猪卵巢组织中克隆获得ERK2基因部分cDNA序列,长1 888 bp,包括一个1 080 bp的开放阅读框,编码359个氨基酸与预测的猪ERK2基因、已报道的人和小鼠等的ERK2基因高度相似;猪ERK2基因在各组织中表达广泛,其中脾脏是表达量最高的组织,在脂肪组织、前后腿肌中基本不表达;猪ERK2基因定位于14号染色体,全长在22 kb以上,包含9个外显子和8个内含子;对第2—9外显子及内含子外显子交界处的内含子序列进行序列突变检测,共检测到11个SNPs和1个插入缺失突变,但绝大部分的变异都是在内含子区域,仅有1个SNP发生于3′UTR区域。【结论】猪ERK2基因cDNA为1 888 bp,编码359个氨基酸残基;在猪各组织中广泛分布,以脾脏的表达量最高;该基因由9个外显子和8个内含子组成,基因保守性较高,共检测到11个SNP和1个插入缺失突变均不在编码区中。
- 方梅霞张伟胡永胜欧阳宏佳贾新正聂庆华张细权
- 关键词：CDNA克隆SNP
- DRD2基因14个多态位点与鸡产蛋性状的相关性被引量：9
- 2010年
- 本研究旨在分析DRD2基因与鸡产蛋性状的相关性,寻找可作为鸡产蛋性状的重要标记。在该基因上选取了14个多态位点,采用PCR-RFLP及PCR测序等方法在宁都三黄鸡母系644个个体中进行了鸡产蛋性状的关联分析。结果表明:位于该基因5′调控区的4个突变位点G-38560C、T-38326G、T-32751C和A-16105G与鸡的开产日龄显著或极显著(P<0.05或P<0.01)相关,位点A-16105G还与300日龄总产蛋数显著相关(P<0.05);由G-38560C、G-38544A、I-38463D与T-38326G这4个位点组成的单倍型块与开产日龄呈极显著相关(P=0.006 5<0.01)。研究结果提示:G-38560C、T-38326G、T-32751C和A-16105G这4个突变位点以及由G-38560C、G-38544A、I-38463D与T-38326G组成的单倍型块可作为产蛋性状标记辅助选择的有效分子标记。
- 徐海平周敏方梅霞曾华聂庆华张德祥张细权
- 关键词：多态位点单倍型产蛋性状
- 四个鸡品种GHSR基因遗传多样性分析
- 采用PCR-RFLP方法,对杏花鸡、泰和丝羽乌骨鸡、隐性白洛克鸡和红色原鸡GHSR基因的5个位点的遗传多样性进行研究。结果表明,5个位点的基因频率在这4个群体中分布差异很大,各位点群体杂合度在0和0.505 4之间波动。...
- 方梅霞聂庆华何丹琳刘满清张细权
- 关键词：单倍型分析
- 文献传递
- 利用RNA-Seq在HPA轴上筛查与犬应激相关的基因和miRNA
- 慢性应激可导致一系列的适应不良，其中下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴是调节应激的重要通路轴。本研究的目的在于探索HPA轴调控应激的遗传机制。实验对比格犬(良好的应激耐受性)和土狗(较差的应激耐受性)的垂体及肾上腺皮质，应激处理...
- 罗威方梅霞
- 关键词：慢性应激HPA轴RNA-SEQMIRNA
- 五种常用的实验兔椎间盘退变模型评价
- 2012年
- 椎间盘退行性变疾病是一类具有高发病率及高致残率的疾病,是临床上引起腰背痛致使工作能力丧失的最主要病因。建立经济、可靠、重复性好的椎间盘退变动物模型,是实验研究椎间盘退变病理生理学变化的首要前提。因此,综合分析和评价近年来常用的实验兔椎间盘退变模型构建方法,对制备椎间盘退行性变模型在实践上具有参考意义。
- 邢会杰傅江南宋琳亮方梅霞
- 关键词：实验兔椎间盘退变动物模型
