文浩
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 供职机构：北京中医药大学中药学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学冶金工程更多>>
- 甘草过表达3个功能基因再生植株的诱导
- 目的：诱导过表达3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)、鲨烯合成酶1 (squalene synthetase 1,SQS1)和...
- 高雅文浩王礼强刘春生刘颖
- 关键词：甘草HMGR过表达转基因植株
- 甘草鲨烯合酶1基因多态性及其与β-香树脂醇合成酶共表达对β-香树脂醇积累的影响研究(英文)被引量：7
- 2014年
- 甘草是我国最常用的大宗药材之一。甘草中最主要的活性成分为甘草酸,其生物合成途径受到很多酶的调节。鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)及β-香树脂醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)是其中的两种关键酶。为了揭示鲨烯合酶基因多态性及其与β-香树脂醇合成酶共表达对MVA代谢途径的影响,本文构建了7种载体,分别含有3种不同的SQS1基因和β-AS基因,将其在酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中表达,通过TLC及GC-MS检测代谢产物β-香树脂醇的含量。结果显示SQS1基因与β-AS基因共表达有助于代谢产物β-香树脂醇的积累,在3种不同的SQS1基因中,以SQS12为最好。本文为进一步研究功能基因对甘草酸代谢途径的影响以及提高甘草酸的含量奠定了理论基础。
- 刘颖陈宏昊文浩高雅王礼强刘春生
- 关键词：甘草鲨烯合酶共表达基因多态性甘草酸
- 甘草鲨烯合酶基因多态性对其编码酶催化效率影响的研究被引量：7
- 2012年
- 目的:分析甘草鲨烯合酶(squalene synthase,SQS)基因多态性及其对编码酶催化效率的影响,为揭示优质甘草形成的分子机制奠定基础。方法:提取甘草总RNA;PCR扩增其SQS基因编码序列;测序后分析SQS序列的多态性;将具有明显差异的4个甘草SQS序列(SQS1C,SQS1F,SQS2A,SQS2B)连入表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21;IPTG诱导蛋白表达,纯化后用于体外酶促反应;GC-MS鉴定产物并比较相对含量。结果:甘草SQS1基因存在单核苷酸多态性(single nuclearpolymorphisms,SNPs)、插入与缺失多态性(InDel)、选择性剪接(AS)多态性;SQS2基因只存在SNPs。氨基酸序列分析显示,SQS1非保守替换占53.94%,结构域中有2个位点突变;SQS2非保守替换占60%,结构域中有1个位点突变。在4种编码酶的体外酶促反应中,利用GC-MS均能检测到产物生成;SQS1F编码酶积累鲨烯的能力高于其他序列。结论:甘草SQS基因具有丰富的多态性,其编码酶催化效率差异显著,这可能是优质甘草形成的分子基础。
- 刘颖张宁王学勇刘春生陈宏昊文浩
- 关键词：甘草基因多态性选择性剪接鲨烯
- 欧李种子质量检验规程及分级标准研究被引量：7
- 2014年
- 欧李作为郁李仁的重要基原之一,到目前为止,其种子质量检验规程和分级标准仍未建立。该研究通过对欧李种子进行扦样、净度、千粒重、含水量、生活力和发芽率等指标测定条件的研究,建立了适合欧李种子自身特点的检验规程。用建立的检验规程对50份取自不同欧李主产区的欧李种子进行检验,通过聚类分析制定了欧李种子的质量分级标准。最终将欧李种子分成3个等级:1级种子的发芽率≥68%,千粒重≥383 g,净度≥94%,含水量≤5%;2级种子发芽率≥26%,千粒重≥266 g,净度≥73%,含水量≤9%;3级种子发芽率≥10%,千粒重≥208 g,净度≥50%,含水量≤13%。
- 文浩任广喜高雅罗隽刘春生李卫东
- 关键词：欧李种子检验规程
- 欧李扦插苗质量分级标准研究
- 2016年
- 目的:制定欧李扦插苗质量分级标准,为郁李仁(欧李)药材规范化生产奠定基础。方法:采集河南省洛阳市新安县一年生欧李扦插苗30份,每份15株,总共450株,测定株高、地径、分枝数、主根长、主根直径、侧根数,利用Excel 2010和SPSS 19.0软件进行统计、分析,确定分级的主要指标,并制定扦插苗分级标准。结果:株高、地径和分枝数是欧李扦插苗质量分级的主要指标。结论:制定欧李扦插苗的3个等级,一级苗:株高≥52 cm,地径≥5.0 mm,分枝数≥2.9;二级苗:52 cm>株高≥15 cm,5.0 mm>地径≥3.3 mm,2.9>分枝数≥1.5;三级苗:株高<15 cm,地径<3.3 mm,分枝数<1.5。
- 陈铭阳耿路罗隽文浩刘春生李卫东刘颖高雅
- 关键词：欧李扦插苗
- 甘草过表达HMGR、SQS1、β-AS基因再生植株的诱导被引量：1
- 2015年
- 目的:诱导过表达3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(HMGR)、鲨烯合成酶1(SQS1)和β-香树脂醇合成酶(β-AS)基因的甘草再生植株。方法:以植物双元表达载体pCAMBIA1305.1为载体骨架,HMGR、SQS1、β-AS基因为目的基因,利用基因重组试剂盒eFusion CloningKit分别构建含有3个外源基因的重组载体,并将其转入根癌农杆菌EHA105,采用根癌农杆菌介导法将目的基因转入甘草外植体。结果与结论:获得了过表达HMGR、SQS1和β-AS基因的甘草愈伤组织及试管苗,为进一步研究这3个功能基因过表达对甘草酸合成的影响奠定了基础。
- 高雅刘颖文浩王礼强袁伯川刘春生
- 关键词：甘草过表达转基因植株
