徐丽香
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- 细菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的功能性展示
- 细胞表面展示技术已广泛应用于突变文库的高通量筛选,有力地促进了蛋白质工程的发展。枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)脂肪酶A (LipA)具有独特的结构特点和催化活性,作为一种重要的工业生物催化剂,已广泛应...
- 徐丽香
- 关键词：细胞表面展示枯草芽胞杆菌铜绿假单胞杆菌
- 文献传递
- 细菌脂肪酶在大肠杆菌细胞表面的功能性展示被引量：1
- 2014年
- 细胞表面展示技术已广泛应用于突变文库的高通量筛选,有力地促进了蛋白质工程的发展。以来自于铜绿假单胞菌的自转运蛋白Est A的羧基端结构域作为锚定区,构建脂肪酶LipA与EstA羧基端结构域的融合基因,并将融合基因插入到改造后的pACYC-Duet表达载体中,获得表面展示载体pBCCB-X1。将载体pBCCB-X1分别导入到大肠杆菌JK321和大肠杆菌UT5600菌株中,以IPTG诱导融合基因的表达。分别用三丁酸甘油酯定性检测和pNPO定量检测诱导表达后的全细胞脂肪酶的水解活性。试验结果表明,脂肪酶LipA在大肠杆菌JK321和大肠杆菌UT5600细胞表面均得到功能性展示,水解活性分别为(2.8±0.1)U/OD和(2.6±0.06)U/OD。脂肪酶LipA在大肠杆菌细胞表面的功能性展示,为后续高通量筛选LipA突变基因文库,奠定了坚实的基础。
- 徐丽香王作镇舒正玉武海龙刘艳如李欣黄建忠
- 关键词：大肠杆菌细胞表面展示枯草芽胞杆菌
