彭炳银
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学更多>>
- 酿酒酵母高效表达木糖异构酶及高木糖醇转化的适配性分子机制研究
- Ethanol production from lignocelluloses is a promising alternative liquid biofuel for sustainable energy suppl...
- 沈煜侯进张兴晶葛瑞蕾彭炳银鲍晓明
- 不同启动子控制下木酮糖激酶的差异表达及其对酿酒酵母木糖代谢的影响被引量：9
- 2011年
- 【目的】以不同强度的启动子控制表达木酮糖激酶基因,并研究其引起的不同木酮糖激酶活性水平对木糖利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)代谢流向的影响。【方法】以酿酒酵母CEN.PK 113-5D为出发菌株,选择酿酒酵母内源启动子TEF1p,PGK1p和HXK2p,利用Cre-loxP无标记同源重组系统,置换染色体上木酮糖激酶基因XKS1的启动子(XKS1p)序列;并通过附加体质粒引入木糖代谢上游途径,构建不同水平表达木酮糖激酶的木糖利用工程菌株;从木酮糖激酶的转录水平、酶活水平、胞内的ATP浓度及木糖代谢等性状,对各菌株进行评价。【结果】转录及酶活测定结果显示,与天然状态相比,所选择的启动子对木酮糖激酶均表现出更强的启动效率。菌株体内表达木酮糖激酶活性水平由高至低的顺序为其基因XKS1在启动子PGK1p、TEF1p、HXK2p和XKS1p控制下。随着木酮糖激酶的活性的提高,胞内的ATP水平下降,而转化木糖生成乙醇的能力上升。最高乙醇产率为0.35 g/g消耗的总糖,此时副产物木糖醇产率最低,为0.18 g/g消耗的木糖。【结论】通过在染色体上置换启动子,提高了木酮糖激酶的表达水平。在一定范围内,木酮糖激酶的高活性有利于木糖向乙醇的转化。
- 彭炳银陈晓沈煜鲍晓明
- 关键词：酿酒酵母启动子木酮糖激酶木糖
- 黑曲霉葡萄糖氧化酶在毕赤酵母SMD1168中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:在毕赤酵母SMD1168中用3-磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子(glyceraldehyde-3-phosphate dehygrogenase gene promoter,pGAP)表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)。方法:将黑曲霉accc30161的GOD基因插入具有pGAP的pGAPZαA质粒中,构建黑曲霉GOD毕赤酵母表达载体,并用菌落PCR、重组质粒琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切分析及测序等方法对其进行验证。然后用重组质粒电转化毕赤酵母SMD1168,并用PCR扩增分析观察转化效果,用SDS-PAGE及酶活检测观察重组酵母黑曲霉GOD的表达和活性。结果:用黑曲霉accc30161的GOD基因成功构建了GOD表达载体pGAPZαA-GOD。转化后,pGAPZαA-GOD相关DNA片段已整合进重组毕赤酵母SMD1168-GOD基因组中。SMD1168-GOD可高表达具有活性的GOD,在30℃、pH 6的条件下,其培养液上清GOD酶活可达107.18 u/mL。结论:重组蛋白缺陷性毕赤酵母SMD1168-GOD可以利用pGAP高效表达黑曲霉GOD。
- 郭元芳孙高英郝建荣彭炳银毕文祥鲍晓明
- 关键词：葡萄糖氧化酶黑曲霉毕赤酵母基因表达启动子
- 来源于牛瘤胃宏基因组的木糖异构酶在酿酒酵母中高效表达特性及其强化木糖代谢能力的研究
- 侯进沈煜李晓伟张兴晶葛瑞蕾索凡彭炳银鲍晓明
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