张中旺
- 作品数：88 被引量：81H指数：5
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种用于细胞培养的直头滴管
- 本实用新型公开了一种用于细胞培养的直头滴管，包括胶帽、管头、过滤介质和管体，所述管头位于所述管体顶部，所述胶帽套在所述管头外部，所述过滤介质安装在所述管头内，环绕所述管头中部设置有磨砂层。本实用新型一种用于细胞培养的直头...
- 张杰丁耀忠张永光常惠芸王永录潘丽邵军军张中旺刘新生
- 文献传递
- 一种圈舍病菌预防装置
- 本实用新型涉及养殖设备领域，具体为一种圈舍病菌预防装置；解决了现有圈舍内空气由于流动性差而导致病菌滋生的问题；包括：底座，底座上通过支座安装有换气设备，其特征在于：所述换气设备包括依次连接的吸风部、消毒部、隔离部、雾化部...
- 吕建亮潘丽张中旺刘新生周鹏马中元王永录张永光
- 文献传递
- 一种Asia1型口蹄疫病毒抗原及其制备和应用
- 本发明公开了一种核苷酸序列opti-LTB-Asia1/VP1以及含有该序列的重组载体pC1300/opti-LTB-Asia1/VP1；本发明还公开了一种利用重组载体pC1300/opti-LTB-Asia1/VP1制...
- 张永光潘丽王永录方玉珍吕建亮周鹏张中旺刘新生蒋守田
- 文献传递
- A型口蹄疫合成肽疫苗的免疫效力评价被引量：3
- 2013年
- 【目的】研制A型口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)新型合成肽疫苗,为畜牧业减少经济损失。【方法】应用两种含有口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)AF/72株VP1[131-159]、VP4[20-35]、3A[21-35]和3B[29-42]4个抗原表位的合成肽联合CpG寡聚脱氧核苷酸(5'-TCGCGAACGTTCGCCCGATCGTCGGTA-3')在豚鼠上进行了免疫效力评价。【结果】2.5μg/只的合成肽364能保护4/5的豚鼠免受FMDV AF/72株的攻击,灭活苗组获得完全保护,其他组的保护效力仅为3/5;保护效力最高的两组的外周血CD4+T淋巴细胞含量高达33.7%和36.6%,而其他组不超过27.7%,PBS组仅为18.1%。【结论】本研究筛选出一组免疫效力较好的口蹄疫A型合成肽疫苗,可以作为候选疫苗进行进一步评价。
- 唐华刘新生方玉珍蒋守田潘丽吕建亮张中旺周鹏张永光王永录
- 关键词：合成肽CPG寡聚脱氧核苷酸CD4+T淋巴细胞
- 一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL-6基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种共表达口蹄疫病毒VP1基因与免疫佐剂牛IL-6基因的重组乳酸杆菌及其制备方法和应用，属于生物技术领域。本发明对乳酸杆菌信号肽的结构进行改造，将改造的乳酸杆菌信号肽基因借一连接短肽GSGGSGG与口蹄疫病毒...
- 潘丽张永光张中旺吕建亮王永录方玉珍周鹏刘新生
- 文献传递
- 口蹄疫病毒株AF72 VP1的结构构建与B细胞表位预测被引量：5
- 2008年
- 以口蹄疫病毒株AF72 RNA为模板,反转录并扩增目的基因,PCR纯化产物与pGEM-T easy载体连接并转化JM109菌株,用凝胶电泳、PCR和EcoRⅠ酶切法鉴定为阳性的重组质粒进行测序。比对测序结果确定AF72 VP1的核苷酸序列,利用同源建模的方法建立AF72 VP1结构蛋白的3D结构,在此基础上,综合亲水性、可塑性、抗原指数以及表面可能性等参数预测AF72 VP1结构蛋白的B细胞抗原表位。结果显示,VP1结构蛋白呈现较规则的空间构象,其中5-11、24-30、43-47、82-87、132-147和196-203氨基酸区段是AF72 VP1结构蛋白可能的B细胞抗原表位区域,该结果将为进一步的FMDV多表位疫苗研究提供很有价值的参考信息。
- 张昱王永录张永光潘丽方玉珍刘力宽蒋守田吕建亮张中旺张淑刚李正丰杜进鑫
- 关键词：口蹄疫病毒B细胞表位
- 口蹄疫病毒抗原保护剂的研究被引量：5
- 2009年
- [目的]研究几种(海藻糖、蔗糖、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮、硫脲、明胶、L-精氨酸、抗坏血酸)保护剂,为口蹄疫抗原保护剂配方的形成提供参考。[方法]用三因素、三水平、双重复正交试验方法筛选出了对口蹄疫病毒(FMDV)抗原保护效果最好的I(4#)保护剂配方,以加保护剂A(已申请专利)的病毒为对照,比较其在不同条件下的TCID50和146s抗原的含量。[结果]通过方差分析4#保护剂保存病毒测得TCID50极显著的高于1、3、5、6、7、8号,显著高于2、9。将4#保护剂加入被保存的病毒抗原中,分别于4℃下保存90、120、150 d,其logTCID50分别为5.3、5.0和4.5,而加保护剂A(已申请专利)的对照病毒则为5.0、4.5和4.3;在37℃下保存40、50和60 h,其logT-CID50分别为4.5、2.5和1.0;而加保护剂A的对照病毒则为3.5、1.5和0.5,为了进一步验证保护剂对FMDV抗原的保护性能,进行了FMDV146s抗原含量的测定。分别于4℃下保存150 d,37℃下保存40 h,测得结果分别为0.796、0.462μg/ml,而加保护剂A的对照病毒则为0.602、0.307μg/ml。[结论]该复合配方保护剂I(4#)对FMDV有效抗原的保护作用优于保护剂A,尤其是病毒保护剂对提高FMDV的冷冻保存时间和耐热效能作用明显。
- 李正丰王永录贾宁张永光方玉珍蒋守田潘丽刘力宽吕建亮张淑刚杜进鑫张昱张中旺周鹏
- 关键词：口蹄疫病毒抗原保护剂
- 口蹄疫病毒多基因及猪α干扰素共表达载体的构建及其免疫豚鼠效果研究被引量：3
- 2017年
- 为探讨口蹄疫病毒多基因及猪α干扰素(IFN-α)基因共表达真核质粒进入临床试验的可行性,本试验用PCR方法扩增了口蹄疫病毒P12A3C及部分2B基因(P12X3C)和猪IFN-α基因,克隆到真核表达载体pBudCE4.1中,经双酶切鉴定后,将重组质粒pBudCE4.1-P12X3C-IFN-α转染BHK-21细胞中,观察目的基因的表达,并将重组质粒免疫豚鼠,检测豚鼠的血清抗体水平、中和抗体滴度及T淋巴细胞增殖情况。结果显示,经酶切鉴定及DNA序列分析成功构建了重组质粒pBudCE4.1-P12X3C-IFN-α,转染BHK-21细胞后,通过Western blotting、间接免疫荧光试验鉴定证实重组质粒能有效表达。ELISA结果显示,重组质粒pBudCE4.1-P12X3C-IFN-α比重组质粒pBudCE4.1-P12X3C能诱导机体产生更高水平的抗口蹄疫病毒的血清抗体,且中和抗体滴度也高于重组质粒pBudCE4.1-P12X3C组。MTT法检测结果表明,重组质粒pBudCE4.1-P12X3C-IFN-α组淋巴细胞增殖可达15%,而重组质粒pBudCE4.1-P12X3C组则为11%。攻毒后重组质粒pBudCE4.1-P12X3C-IFN-α组和灭活疫苗组保护率达100%,高于重组质粒pBudCE4.1-P12X3C组的80%。本试验成功构建了重组质粒pBudCE4.1-P12X3CIFN-α,猪IFN-α作为佐剂可有效辅助口蹄疫DNA疫苗提高动物体内的免疫反应。
- 郑华斌张中旺吕建亮潘丽张永光
- 关键词：口蹄疫病毒真核表达载体
- 牛食咽部上皮细胞及黏液采集探杯
- 本实用新型有关于一种牛食咽部上皮细胞及黏液采集探杯，其目的在于提供一种能够有效刺激咽喉部的组织，采集效率高，专用于采集活体查毒的牛食咽部上皮细胞及黏液采集探杯，所述采集探杯包括采集杯、拉杆和手柄，所述拉杆前端穿过所述采集...
- 林彤张永光常惠芸邵军军赵付荣王永录潘丽周鹏刘新生张杰丁耀忠陈豪泰方玉珍蒋守田吕建亮张中旺
- 文献传递
- HMCES蛋白促进猪流行性腹泻病毒在Vero细胞中的复制
- 2022年
- 【目的】鉴定能够调控猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)复制的关键宿主蛋白。【方法】利用LC-MS/MS技术结合串联质谱标签(tandem mass tag,TMT),分析PEDV感染Vero细胞36 h后和未感染组的蛋白组学差异。鉴定筛选了114个显著差异表达蛋白,其中宿主胚胎干细胞特异性5-羟甲基胞嘧啶结合蛋白(5-hydroxymethylcytosine binding,ES cell-specific protein,HMCES)显著上调。进一步构建HMCES真核表达质粒,通过蛋白免疫印迹和实时荧光定量PCR检测过表达HMCES对PEDV复制的影响;合成针对HMCES基因的特异性siRNA,利用Western blotting和RT-qPCR检测siRNA对HMCES表达的干扰效果及HMCES被干扰后对PEDV复制的影响。【结果】过表达HMCES能显著促进PEDV在Vero细胞中复制,并且复制水平随着HMCES的剂量递增呈现剂量依赖式增加;siRNA-341下调内源性HMCES表达进而抑制PEDV复制。【结论】HMCES促进PEDV复制,本研究为进一步探究HMCES在抗PEDV免疫应答中的作用及机制提供了参考依据。
- 温永强于瑞明张莉萍张中旺王永录潘丽刘霞刘新生
- 关键词：猪流行性腹泻病毒病毒复制VERO细胞
