善亚君 作品数:30 被引量:122 H指数:7 供职机构: 军事医学科学院放射与辐射医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 “重大新药创制”科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 环境科学与工程 更多>>
Mpl相互作用蛋白RACK1的筛选与鉴定 被引量:4 2005年 目的:筛选新的血小板生成素(TPO)受体胞内区相互作用蛋白并确定相互作用。方法:以TPO受体胞内区为诱饵蛋白,进行酵母双杂交文库的筛选,RT-PCR扩增筛选到的基因并克隆到相应载体上,Western印迹方法检测其在不同组织与细胞内的表达;进行哺乳动物细胞内双杂交、免疫共沉淀、激光共聚焦实验确证相互作用。结果:从酵母双杂交文库筛选到RACK1基因,检测到其在不同组织与细胞内表达都很丰富,哺乳动物细胞内双杂交、免疫共沉淀证明RACK1同TPO受体Mpl的胞内区存在相互作用,而细胞内共定位实验证明两者在哺乳动物细胞内存在共定位现象,即两蛋白的相互作用可能具有生理意义。结论:筛选到的RACK1蛋白同TPO受体Mpl的胞内区存在相互作用。 刘红岩 从玉文 陈波 善亚君 杨振 赵振虎 毛秉智关键词:MPL RACK1 双杂交系统技术 相互作用 血小板生成素 rhG-CSF大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血功能重建的影响 被引量:1 2015年 目的 观察重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)大剂量单次给药对非清髓骨髓移植小鼠造血恢复的影响,为rhG-CSF的临床应用提供新的实验依据.方法 雄性C57BL/6J小鼠,经60Co γ射线6 Gy全身照射.于受照后0.5h给予rhG-CSF处理,通过检测接受不同骨髓移植时间(未移植组和照后0.5、6、24和48 h移植组)和rhG-CSF不同给药剂量(0、0.25、0.5和l mg/kg组)照射小鼠外周血象变化,摸索最佳接受骨髓移植时间和rhG-CSF最佳给药剂量.建立绿色荧光蛋白(GFP)小鼠非清髓骨髓移植小鼠模型,通过流式细胞仪检测受体小鼠外周血中GFP+白细胞占有核细胞总数的百分数,探究rhG-CSF大剂量单次给药对外源性干祖细胞植入的影响.结果 rhG-CSF大剂量单次给药对照后0.5~48 h内接受非清髓骨髓移植小鼠的造血恢复均有不同程度的促进作用,其中对照后24 h移植组小鼠的白细胞、红细胞和血小板的恢复最佳(F=17.76、14.75、8.66,P <0.05);0.25~1.0 mg/kg rhG-CSF单次给药可不同程度地促进非清髓骨髓移植小鼠的多系造血恢复,尤以大剂量rhG-CSF(1.0 mg/kg)给药时效果更为显著(F=5.34、8.92、16.54,P<0.05);此外,照射小鼠接受GFP小鼠骨髓细胞移植后,在照后9~21 d,rhG-CSF组小鼠外周血白细胞数均明显高于移植对照组(F =35.61,P<0.05),但GFP+细胞比例在给药组与移植对照组之间差异无统计学意义.结论 rhG-CSF大剂量单次给药可显著促进非清髓骨髓移植小鼠多系造血功能恢复,但对输入的外源造血干细胞植入率没有明显影响. 王俊可 韩阿如娜 王丽梅 余祖胤 徐铁柱 杨超 善亚君 崔宇 柳晓兰 从玉文关键词:非清髓 骨髓移植 重组人粒细胞集落刺激因子 α-生育酚琥珀酸酯对急性放射病小鼠早期造血损伤的防护作用观察 被引量:3 2014年 目的探讨α-生育酚琥珀酸酯(α-TOS)对急性放射病小鼠早期造血损伤的防护作用。方法选取6~8周龄C57BL/6j雄性小鼠,随机分为正常对照组、照射对照组和α-TOS组(n=10)。α-TOS组照射前24h皮下注射400mg/kgα-TOS,照射对照组给予等量辅剂。观察9.0Gy全身照射小鼠的30d存活率及死亡动物平均生存时间。定期检N6.5Gy全身照射小鼠外周血象。计数6.5Gy照射后2、24h骨髓细胞集落和干/祖细胞数。将6.5Gy外射小鼠骨髓细胞与EGFP转基因小鼠骨髓细胞按10:1比例混合后移植入致死剂量照射小鼠体内,检测移植后35d受体小鼠外周血中EGFP阳性细胞比例。结果d-TOS可明显提高9.0Gy照射小鼠的30d存活率,延长死亡动物平均生存时间,促进6.5Gy照射小鼠外周血象的恢复,提高照射后24h/b鼠骨髓细胞集落生成能力和干/祖细胞数目。竞争移植实验中,仅.TOS可明显降低致死剂量照射小鼠移植后3sd外周血中EGFP阳性细胞比例。结论d.TOS可有效保护γ射线照射小鼠照后早期的造血干/祖细胞,促进外周血象恢复,增加存活率。 贾超 张刘珍 邢爽 柳晓兰 善亚君 丛悦 崔宇 王丽梅 从玉文关键词:造血干细胞 7-乙酰基-鲁山冬凌草甲素诱导HL-60细胞周期阻滞及其机制研究 被引量:1 2010年 目的研究7-乙酰基-鲁山冬凌草甲素(7-acetyl-lushanrubescensin A,ARA)对人急性髓系白血病细胞株HL-60的细胞增殖和细胞周期的影响,并对其作用机制进行探讨。方法MTT法检测ARA对HL-60细胞增殖的影响;在ARA作用HL-60细胞不同时间后,流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测周期相关蛋白Rb、p(phospho)-Rb(ser795)、p-Rb(ser807/811),细胞周期蛋白(cyclin)D1、cyclin D3、cyclin E2、CDK4及CDK6的蛋白表达;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果ARA剂量依赖性地抑制HL-60细胞增殖,48h的IC50为(1.96±0.08)μmol/L。ARA诱导HL-60细胞发生明显的细胞周期G0/G1阻滞,具有时间和浓度依赖性。机制研究显示ARA引起Rb总蛋白出现移行条带,并抑制p-Rb(ser795)位点磷酸化,显著抑制CDK4的蛋白表达,并部分降低cyclin D3和cyclin E2的表达水平,但对cyclin D1和CDK6的作用则不明显。此外,ARA显著增加HL-60细胞内ROS水平,而抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)能够阻断ARA诱导的ROS升高及细胞周期阻滞。结论ARA能够明显抑制白血病细胞增殖,诱导细胞周期阻滞,其机制可能与抑制Rb活化和降低cyclin D3、cyclin E2和CDK4的表达水平相关,并且ROS在ARA介导的生物学效应中可能有重要作用。 刘高媛 余祖胤 善亚君 柳晓兰 赵振虎 赵勤实 陈丁丁 从玉文关键词:HL-60细胞 细胞周期阻滞 活性氧 白血病 PLA2/AA信号途径与重楼皂苷诱导大鼠子宫平滑肌收缩活动的关系研究 被引量:10 2008年 目的:探讨宫血宁活性成分——重楼总皂苷(TSSP)诱导大鼠离体子宫肌条收缩的机制,考察PLA2/AA信号途径与TSSP引起的大鼠离体子宫收缩的关系。方法:应用离体子宫张力测定法,观察不同PLA2/AA信号途径抑制剂对TSSP引起的大鼠离体子宫收缩作用的影响。结果:非特异性前列腺素合成酶抑制剂可明显抑制TSSP和米索前列醇引起的子宫收缩,提示二者可能存在相似机制。环氧酶1(COX-1)抑制剂SC560,环氧酶2(COX-2)抑制剂NS-398,EP受体抑制剂AH6809和脂氧酶(5-LO)抑制剂REV5901均可对TSSP缩宫作用产生明显抑制;磷脂酶A2(PLA2)抑制剂AACOCF3也可明显抑制TSSP的缩宫作用,提示PLA2/AA信号途径与TSSP的缩宫作用密切相关。结论:TSSP对大鼠子宫平滑肌收缩活动的调节与PLA2/AA信号途径的激活有关。 苏佳 刘泽源 赵振虎 善亚君 马百平 从玉文关键词:重楼总皂苷 子宫收缩 信号传导 造血细胞辐射后对造血因子的增殖反应性变化的研究 在造血因子治疗应用中,造血细胞受照后对造血因子增殖刺激反应性(以下简称增殖反应性)降低.我们考虑当照射剂量还没有达到细胞致死剂量时,有一部分细胞既没有出现坏死,也没有走向凋亡,但它们对造血因子的刺激反应可能已有降低,而照... 从玉文 陈家佩 苑晓玲 赵振虎 善亚君 董波 杨龙 罗庆良 毛秉智关键词:造血细胞 造血因子 文献传递 SARS-CoV S蛋白基因的克隆及其与VSV-G融合表达载体的构建 2004年 为了解重症急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)表面S蛋白的受体结合功能域及其在宿主细胞上的作用受体,应用PCR技术从SARS-CoVcDNA中克隆到S蛋白的全长基因,并构建了S蛋白与疱疹性口腔炎病毒胞膜蛋白(VSV-G)融合表达载体pVSV-G'-SG,进而为制备含有SARS-CoVS蛋白膜外区的逆转录病毒假毒粒奠定了实验基础。 冯彦斌 善亚君 苑晓玲 杨振 赵振虎 王升启 刘晓辉 从玉文关键词:SARS rhKGF、CBLB502和WR2721对放射性口腔黏膜炎的防治效果观察 被引量:3 2015年 目的比较r h KG F、CB L B 5 0 2、W R 2 7 2 1对放射性口腔黏膜炎(R O M)的防治作用。方法健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、照射对照组、rh KGF组、CBLB502组及WR2721组。其中24只小鼠观察17Gy头颈部照射小鼠的30d存活率及体重变化,另外20只小鼠利用1%甲苯胺蓝染色法观察照射小鼠舌组织溃疡情况,HE染色观察舌组织病理学改变,Ki-67免疫组化检测黏膜角化上皮细胞增殖情况。结果与照射对照组相比,rh KGF和WR2721给药组小鼠30d存活率显著提高,体重恢复较快,角化上皮细胞增殖显著,未发生明显的口腔黏膜炎;CBLB502组小鼠的存活率、体重变化及组织病理学指标与照射对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rh KGF和WR2721对放射性口腔黏膜炎有较好的防治作用,而CBLB502并不能减轻放射性口腔黏膜炎的发生。 杨超 王丽梅 崔宇 徐铁柱 赵致维 李中堂 王俊可 善亚君 柳晓兰 唐红卫 从玉文关键词:辐射防护剂 鞭毛蛋白 氨磷汀 氨磷汀对急性放射病小鼠早期骨髓造血功能的防护作用 被引量:8 2014年 本研究旨在探究氨磷汀(WR2721,Amifostine)对60Coγ射线6.5 Gy单次全身照射(TBI)所致急性放射病小鼠早期骨髓造血的防护作用。60只C57/BL6J小鼠随机分成正常对照(normal)、照射对照(IR)和WR2721预防给药(WR2721)3组。观察WR-2721照射前30 min给药对6.5 Gy60Coγ射线照射小鼠照射后60 d内小鼠外周血白细胞(WBC)、中性粒细胞(Neut)、血小板(Plt)和红细胞(RBC)数的影响;照射后2 h和24 h计数骨髓有核细胞数(BMNC)、流式细胞术分析造血干/祖细胞(LSK/LK)数量和观察多系骨髓细胞集落形成能力。结果显示,WR2721组的WBC和Neut在照射后4-18 d、Plt数7-18 d、RBC数10-30 d均明显高于IR组(P<0.05);照射后24 h BMNC、LSK和LK数均明显增加(P<0.05);2 h和24 h髓系祖细胞集落形成单位(CFU-GEMM)、粒系-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)、巨核系集落形成单位(CFU-MK)、红系暴式集落形成单位(BFU-E)和红系集落形成单位(CFU-E)集落数均明显增加(P<0.01)。结论:WR2721能有效减轻急性放射病小鼠造血系统早期损伤,促进外周血细胞更早更快恢复。 邓子亮 张刘珍 丛悦 柳晓兰 余祖胤 善亚君 崔宇 王丽梅 邢爽 从玉文 罗庆良关键词:急性放射病 人体肝癌细胞急性低氧及低氧习服差异表达基因分析 被引量:12 2003年 本文分析了人体肝癌细胞 (HepG2 )急性低氧处理以及低氧习服处理后基因表达谱的改变。急性低氧处理为细胞在 1%氧气中培养 48h ,低氧习服处理为细胞在 1%氧气中培养 2 4h ,常氧培养 2 4h ,以此作为一个周期 ,重复 6个周期。联合应用抑制消减杂交技术和cDNA芯片技术 ,筛选HepG2细胞经急性低氧处理与正常培养细胞相比差异表达的基因 ,以及经低氧习服处理细胞与正常培养细胞相比差异表达的基因。结果显示 ,HepG2细胞经急性低氧处理与在常氧条件下培养相比 ,差异表达的基因有 3 7个 ,表达水平全部表现为下调 ,其中包括参与细胞周期、细胞应激、细胞信号转导、细胞骨架形成、转录相关蛋白及细胞代谢相关蛋白的基因 ,1个未知基因序列、4个EST序列、5个线粒体蛋白基因 ,另外有功能不明的蛋白质基因 12个。低氧习服处理的细胞与常氧条件下培养的细胞相比 ,差异表达的基因有 6个 ,其中包括两个线粒体蛋白基因、金属蛋白酶 1基因、转铁蛋白基因、Thymosin .beta 4和TPT1基因。其中线粒体蛋白ND4、转铁蛋白、Thymosin .beta 4和TPT1基因的表达呈上调 ,线粒体ND1及金属蛋白酶1基因的表达水平呈下调。经低氧习服处理后 ,细胞低氧耐受力提高 。 王金惠 善亚君 从玉文 吴岚军 苑晓玲 赵振虎 王升启 陈家佩关键词:细胞低氧 抑制消减杂交 CDNA微阵列