周密
- 作品数:4 被引量:8H指数:2
- 供职机构:复旦大学脑科学研究院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 着床丝氨酸蛋白酶-2(ISP2)蛋白在小鼠卵子和早胚组织中的表达及其定位被引量:1
- 2008年
- 目的:了解ISP2蛋白在小鼠卵细胞和早胚组织中的表达情况。方法:收集小鼠未成熟卵、成熟卵、受精卵和着床前胚泡,利用特异性抗ISP2抗体,采用免疫荧光和激光共聚焦显微镜技术对ISP2在卵细胞和早期胚胎组织中的表达模式以及亚细胞定位进行检测分析。结果:在小鼠未受精卵、受精卵和着床前胚泡中均能检测到特异的ISP2蛋白信号;通过激光共聚焦显微镜观察到ISP2在细胞膜上的信号强于其在细胞质。结论:ISP2蛋白在小鼠卵子和早胚组织中均有表达,并主要分布在细胞膜上。
- 周密贾晓峰王健施惠娟
- 关键词:卵细胞胚泡细胞膜
- 生殖细胞特异表达蛋白SP3111在受精及早期胚胎发育中的作用被引量:1
- 2010年
- 目的:采用抗SP3111抗体Ab2438封闭后的体外受精试验,研究SP3111蛋白在受精及早期胚胎发育过程中的作用。方法:首先在体外受精前,将精子分为3组:实验组、空白对照组、阴性对照组。实验组精子与Ab2438共同孵育1h后进行体外受精,观察2、4、6、8、22h的受精率及碎裂胚胎的发生率。接着将Ab2438作用于受精后的卵母细胞,观察作用22h后的受精率及碎裂胚胎的发生率。结果:抗体Ab2438作用小鼠精子后,碎裂胚胎发生率在加入精子后2、4、6、8、22h分别为5.26%、8.77%、23.25%、43.42%、59.21%,与各对照组碎裂胚胎形成率均有显著性差异(P<0.01)。Ab2438作用于受精后的卵母细胞,22h后实验组的正常胚胎及碎裂胚胎的形成率分别为23.64%和63.64%,与各对照组相比差异有显著性(P<0.01)。结论:抗SP3111抗体对小鼠受精及早期胚胎发育有明显的影响,因此SP3111蛋白可能是一个信号分子,与其他蛋白一起在受精和早期胚胎发育中发挥作用,对SP3111蛋白生殖功能的进一步研究将为不育的分子机制的研究提供新的思路。
- 贾晓峰周密林菊芳时伟丽张晓东施惠娟
- 关键词:精子抗体体外受精早期胚胎发育
- 精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠的可行性研究被引量:2
- 2008年
- 目的构建目的基因rsp3111与荧光蛋白融合表达的质粒,并且实现目的基因在体外受精胚胎及在体附睾成熟精子中表达。为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定基础。方法将rsp3111基因以XholI和BamHI酶切后插入经同样酶切处理的真核细胞表达质粒pDsRed-Monomer-N1中,重组质粒为pDsRed-Monomer-N1-rSP3111。采用共培养和脂质体介导方法将ICR小鼠精子与pDsRed-Monomer-N1-rSP3111质粒共孵育,再与成熟的卵母细胞体外受精;或用脂质体介导睾丸直接注射法,将pDsRed-Monomer-N1-rSP3111导入小鼠睾丸中,通过PCR及荧光显微镜观察体外受精后的受精卵及体内睾丸转染rsp3111基因后附睾精子中是否有外源rsp3111基因的表达。结果PCR结果表明,rsp3111基因成功地转入了附睾精子及受精卵中。荧光检测结果表明,目的基因rsp3111在体外受精胚胎及睾丸的曲细精管中均有表达。结论通过雄性生殖细胞载体法实现了大鼠配子特异性蛋白rSP3111在小鼠受精卵及睾丸、附睾精子中的表达;为进一步通过精原干细胞体内转染途径建立rsp3111转基因小鼠奠定了基础。
- 周密贾晓峰史庭燕王健袁瑶施惠娟
- 关键词:体外受精
- 精卵结合分子机制的研究进展被引量:4
- 2007年
- 受精是有性生殖的关键环节,而精卵结合则是哺乳动物受精过程的启始步骤。哺乳动物的精子在睾丸中生成,在附睾中成熟。在成熟过程中,精子经过一系列形态结构和生理功能的变化,从而具备了与卵子特异结合的潜能。精子进入雌性生殖道后,其细胞膜的流动性和穿透性会发生很大变化,最终获得与卵子结合及穿透卵子的能力,
- 周密王健施惠娟
- 关键词:受精