公共文化服务平台

共 1 条记录，以下是 1-1

全选清除导出

排序方式：

hTfR报告基因慢病毒载体构建及其在神经干细胞的表达研究被引量：2: 2013年; 目的探讨人转铁蛋白受体（hTfR）基因慢病毒载体构建方法及其在神经干细胞（NSCs）中的表达情况,为NSCs的MR分子成像提供实验基础。方法利用聚合酶链反应技术伊CRl扩增hTfR基因，并克隆到pLenti6.3载体，构建出慢病毒表达载体pLentil6．3-hTfR-IRES-EGFP。利用Lipofectin2000试剂将PLP1、PLP2、PLP-VSVG和pLenti6．3-hTfR-IRES-EGFP共转染293T细胞进行慢病毒包装，48h后收集病毒上清，体外感染NSCs。细胞流式筛选稳定表达hTfR的细胞，通过实时定量PCR和Westernboltting检测hTfR的表达，细胞免疫荧光技术对过表达的hTfR进行亚细胞的定位。结果成功构建危珊基因慢病毒表达载体，包装的慢病毒颗粒成功感染NSCs。实时定量PCR和Westernboltting鉴定出hT瓜在NSCs中过表达，hTfR基因表达相对值为2．275±0．281。细胞免疫荧光检测到过表达的hTfR主要在细胞膜上表达。NSCs分化后，hTfR在胶质细胞和神经元中稳定表达。结论本研究所用方法能成功构建hTfR慢病毒表达载体并筛选出稳定表达hTfR的NSCs系,为下一步活体内移植NSCs行MR分子成像实验研究奠定了基础。; 郭永坤张业森刘春颖戴宜武黄瑾姚慧吴炳山姚学勤杨志军徐如祥; 关键词：转铁蛋白受体慢病毒载体神经干细胞增强型绿色荧光蛋白

全选清除导出

共1页<1>

吴炳山