吴丹莉
- 作品数：12 被引量：62H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒对犬心肌缺血的基因治疗被引量：6
- 2004年
- 为了进一步研究重组腺病毒Ad-HGF对心肌缺血的治疗效果及其安全性,在体外实验和大鼠实验的基础上制作了犬心肌缺血的模型,从3个方面评价Ad-HGF对心肌缺血的治疗效果.首先,通过冠状动脉造影观察侧支循环形成的情况,发现治疗组动物的侧支循环比对照组丰富;然后,对心脏切片进行TTC染色,并通过图像分析确定缺血区面积,结果显示治疗组动物的缺血区明显小于对照组;最后,从心肌中回收彩色微球计算局部心肌血流量,结果显示治疗组动物的局部心肌血流量基本恢复到了结扎前的水平.另外,在长期毒性研究中,用中和方法检测了腺病毒抗体产生的情况,发现腺病毒抗体在第4次注射后产生,达到高峰后缓慢下降,于停药12周后消失.总之,Ad-HGF对心肌缺血的治疗是有效的,同时也会诱导机体产生抗体中和体内的腺病毒,这可能是腺病毒载体的清除机制.
- 吴丹莉张友荣劳妙芬袁丽珍王澜哈小琴吴祖泽
- 关键词：肝细胞生长因子心肌缺血基因治疗重组腺病毒中和性抗体
- 电磁脉冲辐射对原癌基因c-fos调控区的影响
- 2004年
- 目的 通过研究电磁脉冲 (electromagneticpulse ,EMP)辐射对原癌基因c fos调控区域的影响 ,探讨其诱导细胞功能改变的机制。方法 构建c fos启动区氯霉素乙酰化转移酶 (chloramphenicolacetyl transferase,CAT) ,然后转染HeLa癌细胞株 ,高场强EMP模拟源 (有界波模拟源 )辐射细胞 ,EMP场强为6× 10 4V/m ,脉冲上升时间为 2 0ns ,脉宽为 3 0 μs ,频率为 2 .5个脉冲 /min ,辐射 2min ,处理后 2 0min时观察细胞中CAT的活性。结果 EMP辐射转染的细胞后 2 0min ,转染了P50 0 ( -711～ -2 2 3bp)和P2 50 ( -3 62～-10 0 )的Hela细胞其CAT活性明显高于对照水平的活性 (P <0 .0 1)。结论 EMP辐射可引起c fos基因调控区的 -3 62～ -2 2 5明显改变。
- 赵梅兰曹晓哲王德文刘杰哈小琴吴丹莉张燕
- 关键词：电磁脉冲原癌基因HELA细胞
- 肝细胞生长因子基因修饰骨髓间质干细胞在心肌缺血治疗中的应用
- 用携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒转染骨髓间质干细胞，获得高表达肝细胞生长因子的干细胞，局部注射治疗心肌缺血，既可以改善局部缺血症状、降低胶原沉积，又可以修复部分坏死的心肌细胞，具有明显的治疗效果。
- 段海峰王立生吴祖泽吴丹莉刘红军张群伟王华鲁茁壮贾向旭哈小琴
- 比格犬注射重组腺病毒Ad-HGF后血清中抗腺病毒抗体及中和抗体的检测
- 2007年
- 目的:观察Beagle犬重复给予Ad-HGF后血清中抗腺病毒抗体及抗肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)抗体的出现时间及消失规律.方法:将24只比格犬随机分为四组:正常对照组、手术对照组、Ad-HGF小剂量组(2.4×107pfu/kg)和Ad-HGF大剂量组(2.4×108pfu/kg).Ad-HGF各组犬给予不同剂量Ad-HGF共14次.在给药2次后分别利用病毒中和反应和ELISA方法检测血清中抗腺病毒抗体和抗HGF抗体.结果:手术组、正常对照组及实验组动物于给药前及给药3次时血清细胞均未出现明显中和反应.给药4次后各剂量组动物血清均对腺病毒有不同程度中和作用,至停药后12wk抗体水平很低或已不存在.各时间点血清样品中未检测到抗HGF抗体.结论:犬肌注Ad-HGF4次后动物血清中检测到了抗腺病毒抗体,停药4wk后抗体水平有不同程度下降,直至12wk后血清中腺病毒抗体基本消失.
- 哈小琴赵治华吕同德劳妙芬吴丹莉吴祖泽
- 关键词：AD-HGF中和抗体血清
- 重组腺病毒和质粒对心肌缺血治疗效果的比较被引量：5
- 2003年
- 目的 :研究不同载体对基因治疗效果的影响。方法 :采用本实验室建立的犬心肌缺血动物模型 ,通过冠状动脉造影和TTC染色两种方法比较了携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒Ad_HGF和质粒puDKH对心肌缺血的治疗效果 ;并且在体外采用绿色荧光蛋白报告基因测定了不同载体对原代心肌细胞的转染率。结果 :重组腺病毒Ad_HGF对心肌细胞的转染率和心肌缺血的治疗效果均好于重组质粒puDKH。结论
- 张友荣吴丹莉劳妙芬毕建进吴祖泽
- 关键词：腺病毒科重组质粒基因疗法
- 腺病毒载体介导肝细胞生长因子对心肌缺血的基因治疗
- 该课题主要包括三部分内容:第一部分心肌原代培养探讨了转染率和表达效率问题;第二部分大鼠心肌缺血模型研究了腺病毒载体的表达范围和表达持续时间及HGF促血管生成的作用;新西兰大白兔心肌缺血模型观察疗效及对缺血范围减小的作用;...
- 吴丹莉
- 关键词：心肌缺血模型药效学基因治疗
- 骨髓间充质干细胞携带人HGF基因治疗心肌缺血的实验研究
- 目的了解携带HGF基因的腺病毒载体转染MSCs的效率,以及转染HGF基因对MSCs增殖与分化的影响;评价高表达HGF的MSCs局部注射对心肌缺血的治疗作用,包括对局部血管新生、胶原沉积和心功能的改善作用。方法分离雌性大鼠...
- 段海峰吴祖泽吴丹莉陆颖刘红军哈小琴张群伟鲁茁壮王华贾向旭王立生
- 关键词：骨髓间充质干细胞胶原沉积心功能HGF心肌缺血基因治疗
- 碱性成纤维细胞因子在枯草芽孢杆菌BS224中的表达被引量：3
- 2002年
- 让一种有抗菌活性的非致病性枯草芽孢杆菌BS224表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),使其同时具有抗菌和促进伤口愈合的作用。用PCR方法克隆了一个α-淀粉酶高产株的α-淀粉酶基因的启动子和信号肽序列及3'端序列,合成了gnt(葡萄糖酸盐操纵元)终止子序列作为构建元件,和碱性成纤维细胞因子的cDNA序列一起插入质粒pHV32组建成整合型载体,该质粒来源于大肠杆菌质粒pBR322和枯草杆菌质粒pC194。然后通过原生质体转化法转化BS224,氯霉素抗性筛选得到转化体,用α-淀粉酶分析实验和Southern杂交证明其发生了同源重组,Western杂交证明碱性成纤维细胞因子有表达。
- 吴丹莉王艳飞谷庆阳吴祖泽
- 关键词：碱性成纤维细胞因子Α-淀粉酶基因创伤愈合
- 质粒治疗肢体动脉闭塞性疾病的安全性分析被引量：2
- 2002年
- 肢体动脉血管闭塞性病是一种严重危害人类健康的疾病,许多病人最终要截肢,基因治疗为这类患者带来了希望。利用肝细胞生长因子促进血管生成的作用,采用质粒作为载体对大鼠和犬的下肢动脉闭塞疾病模型进行治疗,效果良好。为探讨基因治疗的安全性问题,用绿色荧光蛋白报告基因研究质粒在体内的分布和表达,方法简便。通过制作冰冻切片观察绿色荧光蛋白在小鼠体内的表达情况,发现局部注射质粒不会造成全身性扩散,表明该方法安全。
- 毕建进吴丹莉张津辉靳继德王艳飞龚萍王小娜张庆林吴祖泽
- 关键词：质粒治疗肢体动脉闭塞性疾病基因治疗肝细胞生长因子
- 腺病毒介导的人HGF转染大鼠骨髓间充质干细胞及其作用研究被引量：22
- 2003年
- 目的 :评价携带HGF基因的腺病毒载体转染鼠骨髓间充质干细胞 (MSC)的效率 ,以及转染HGF基因对MSC增殖与分化的影响。方法 :采用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效果和转染率 ;采用ELISA方法检测转染后HGF的表达情况 ;细胞增殖分析采用MTT法 ;MSC向成骨细胞分化采用碱性磷酸酶染色法。结果 :转染效率与病毒滴度 (MOI)具有量效关系 ,随着MOI的增加 ,转染率明显增高 ,当MOI =4 0 0时 ,转染率可达 99.99%。转染HGF后 ,MSC表达HGF明显增高 ,4 8h可达 12 8ng ml,随后逐渐下降并维持 2周以上 ;转染HGF对MSC的增殖以及向成骨分化没有影响。结论 :MSC是一种理想的基因载体细胞 ,可用于HGF的基因治疗。
- 段海峰吴祖泽陆颖刘红军哈小琴吴丹莉王立生
- 关键词：基因转染间充质干细胞肝细胞生长因子腺病毒科急性心肌梗塞
