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吕喆: 作品数：41 被引量：118H指数：7; 供职机构：首都医科大学基础医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市教育委员会科技发展计划面上项目更多>>; 相关领域：医药卫生电子电信生物学农业科学更多>>

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Th2型启动因子IL-25/IL-33在固有淋巴样2型细胞定向趋化中的作用研究: 李艳吕喆王晶晶池亚菲黄萍Chris J.Corrigan黄克武王炜孙英

小鼠Bpi条件基因打靶载体的构建和鉴定被引量：2: 2010年; 目的构建小鼠Bpi条件基因打靶载体,为建立Bpi条件基因打靶小鼠模型和深入研究Bpi基因功能奠定基础。方法采用Cre/LoxP系统,选择小鼠Bpi基因第2、3外显子作为条件性敲除的目的片段,并在其两侧插入LoxP位点;运用LA-PCR技术,以129品系小鼠ES细胞基因组DNA为模板分步扩增包括Bpi第2、3外显子(中间同源臂)和上游同源臂在内的3.1 kb基因片段以及下游同源臂4.9 kb基因片段;构建pBSKⅡ-5SLoxP和ploxPFRTNeo-3L重组质粒,将前者酶切产物(3.1 kb)与酶切后的ploxPFRTNeo-3L质粒相连获得Bpi条件基因打靶载体。结果经多个限制性内切酶酶切鉴定和测序证实,构建的pBSKⅡ-5SLoxP、ploxPFRTNeo-3L重组质粒和Bpi条件基因打靶载体结构正确,与设计相符。结论成功构建了小鼠Bpi条件基因打靶载体。; 康赟林福玉滕艳侯宁程萱吕喆孔庆利安云庆; 关键词：同源重组 CRE/LOXP系统

朱红膏对脂多糖刺激人单核细胞系THP-1细胞分泌细胞因子和黏附分子的影响被引量：9: 2013年; 目的探究朱红膏对脂多糖（ lipopolysaccharide, LPS）刺激的人单核细胞系（human acute monocytic leukemia cell line，THP-1）分泌人白细胞介素-1p（ interleukin-1 beta，IL-1β）、人可溶性细胞间黏附分子-1 （soluble intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1）、人白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）和人单核细胞趋化蛋白-1（ monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1 ）的影响，探讨其促进皮肤创伤愈合的机制。方法用细胞计数试剂盒（cellcountingkit-8，CCK-8）检测朱红膏对THP-1细胞活力的影响，用酶联免疫吸附法检测朱红膏对LPS刺激的THP-1表达IL-1β、sICAM-1、IL-8和MCP-1的影响。结果朱红膏和LPS共同作用THP-1细胞24h后，朱红膏在汞含量4．2-8．4mg／kg时可抑制THP-1细胞表达MCP-1（P〈0．01，P〈0．05）；在汞含量2．1mg／kg时可抑制THP-1细胞分泌IL-1β（P〈0．05）；在汞含量2．1-8．4mg／kg时可抑制IL-8的分泌（P〈0．01，P〈0．05），而对分泌sICAM-1的影响差异无统计学意义。结论朱红膏通过降低LPS诱导的THP-1表达IL-1β、IL-8和MCP-1，从而抑制过度的炎性反应来促进慢性创面愈合。; 何秀娟林燕吕喆安云庆丁跃中李萍; 关键词：朱红膏黏附分子炎性反应因子

兼职蛋白热休克蛋白70与α-烯醇酶的人B细胞表位肽预测及其瓜氨酸化的血清学检定: 2021年; 目的筛选与自身免疫病相关兼职蛋白的B细胞优势表位肽并进行血清学检定。方法利用DNAMAN软件分析不同物种热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)和α-烯醇酶氨基酸序列同源性,IEDB数据库和瓜氨酸化在线平台预测线性B细胞表位和瓜氨酸化修饰位点;间接ELISA检测抗HSP70和α-烯醇酶蛋白瓜氨酸化前后表位肽抗体。结果同源性分析和IEDB数据库预测得到兼职蛋白HSP70和α-烯醇酶各10个B细胞优势表位肽;瓜氨酸化位点预测显示,其分别有9个和4个位点可能会发生瓜氨酸化修饰,其中5个瓜氨酸化修饰位点与预测表位肽重合。与正常人相比,抗环瓜氨酸肽抗体阳性患者血清抗瓜氨酸化修饰表位肽的抗体滴度明显增高(P<0.05)。结论采用生物信息学分析和ELISA初步验证的方法有助于筛选自身抗原相关的B细胞优势表位肽。; 李虹颖张鑫王文静王文静夏思思吕喆吕喆陈彦孙英袁慧慧; 关键词：烯醇化酶瓜氨酸化优势表位

Toll样受体11～13在肥大细胞上的表达被引量：12: 2013年; 目的观察Toll样受体(Toll like receptors,TLRs)11～13在小鼠肥大细胞上的表达。方法用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、流式细胞术和免疫荧光染色方法,在mRNA和蛋白质水平检测TLR11～TLR13在小鼠骨髓来源的肥大细胞(bone marrow-derived mast cell,BMMC)和小鼠肥大细胞系MC/9的表达。结果 BMMC和MC/9细胞在mRNA和蛋白质水平均能表达TLR11～TLR13。结论发现肥大细胞表达TLR11～TLR13,为进一步研究其生物学功能提供实验依据。; 李艳李波姚秀娟吕喆安云庆王炜黄克武孙英; 关键词：肥大细胞

鉴别诊断临床急性肺炎病原体感染的血清标志物研究被引量：12: 2016年; 目的检测急性肺炎患者血清相关生物标志物含量,为建立一种快速鉴别诊断临床急性支原体肺炎、病毒性肺炎、细菌性肺炎的免疫胶体金检测法提供实验依据。方法以临床病原学诊断明确的急性支原体肺炎,病毒性肺炎,细菌性肺炎患者和正常人血清为检测样品,采用血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)/杀菌渗透增强蛋白(bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测试剂盒检测上述血清中相关生物标志物含量。结果 (1)正常人群血清78份,急性支原体肺炎患者血清46份,病毒性肺炎和细菌性肺炎患者血清42份,其中病毒感者患者血清35份,细菌感染患者血清7份;(2)正常人群血清PDGF最大值<6 000 pg/m L;血清BPI最大值<80 ng/m L;(3)以血清PDGF值6 000 pg/m L作为鉴别诊断急性支原体感染的基线值,支原体感染患者阳性检出率为93.47%(43/46);病毒和细菌感染患者出现支原体感染的假阳性率为7.14%(3/42);(4)以血清BPI值80 ng/m L作为鉴别诊断急性细菌感染的基线值,细菌感染患者阳性检出率为85.71%(6/7);病毒感染患者出现细菌感染的假阳性率为3.22%(1/31)。结论以血清PDGF6 000 pg/m L和BPI 80 ng/m L作为鉴别诊断不同病原体感染的基线值,对临床急性支原体肺炎、病毒性肺炎、细菌性肺炎鉴别诊断具有一定意义。; 刘萌窦云鹏谷丽吕喆王一民刘颖梅安云庆曹彬; 关键词：肺炎血小板衍生生长因子

AAV2-BF转染小鼠对MLD内毒素攻击的抵抗作用: 2006年; 目的:通过观测BPI700-Fcγ1700嵌和基因导入小鼠,对最小致死量(MLD)内毒素攻击的抵抗作用,探讨抗感染基因治疗在临床感染高危人群中应用的可能性。方法:采用Dotblot、Westernblot、免疫组化、改良ELISA方法和内毒素/细胞因子检测试剂盒,检测目的基因产物在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中的表达及血清中内毒素和促炎细胞因子含量变化。结果:(1)目的基因产物在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中成功表达,在AAV2-BF导入组小鼠血清中可检测到目的基因产物;(2)在最小致死量内毒素攻击后,AAV2-BF导入组小鼠血清中内毒素和促炎细胞因子含量显著低于对照组小鼠;其存活率(40%)明显高于对照组小鼠(2·5%)。结论:AAV2-BF导入组小鼠对MLD内毒素攻击具有抵抗作用,提示抗感染基因治疗对临床G-菌败血症及其引发的内毒素中毒性休克具有较好防治作用。; 关翔宇李晨李静吕喆彭智张国民李莉安云庆; 关键词：内毒素促炎细胞因子

空气颗粒物和香烟烟雾提取物对人气道上皮及巨噬细胞的影响: 2020年; 目的探讨空气颗粒物(PM)及香烟烟雾提取物(CSE)对人肺泡上皮细胞(A549细胞)和单核细胞(THP-1细胞)源性巨噬细胞功能的影响。方法采用不同浓度的PM与CSE单独或叠加体外刺激A549细胞和THP-1细胞,应用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验检测炎症因子表达,实时聚合酶链式反应检测巨噬细胞极化标志物,免疫蛋白质印迹法检测紧密连接蛋白ZO-1、occludin、claudin的表达。结果与空白对照组比较,0.5%CSE、50 mg/LPM单独刺激即可抑制A549细胞增殖;二者叠加刺激后,较CSE单独刺激组能够进一步抑制该细胞增殖活性,促进细胞凋亡;同时,在CSE存在时,PM可进一步促进A549细胞和THP-1细胞产生的炎症因子白细胞介素6及白细胞介素1β。PM单独或与CSE叠加均可降低A549细胞表达occludin。实时聚合酶链式反应结果显示,CSE与PM叠加进一步促进THP-1细胞表达CD80 mRNA。结论PM能够进一步加重CSE暴露所导致的气道上皮抑制增殖、促进凋亡、炎症及巨噬细胞向M1型极化。; 于涛崔晗崔烨刘杰吕喆孙英王炜杨汀; 关键词：空气颗粒物香烟烟雾提取物上皮细胞巨噬细胞

小鼠BPI N端功能片段(muBPI_(25)蛋白)体外杀菌和中和内毒素作用研究被引量：2: 2010年; 目的:建立胞内杀菌和体外中和内毒素实验模型,检测muBPI25目的蛋白对胞内寄生菌的抑杀作用和对内毒素的中和作用。方法:将pcDNA3.1(+)-muBPI36-259质粒导入RAW264.7细胞,用胞内寄生G+/G-菌感染上述细胞建立muBPI25目的蛋白胞内杀菌实验模型;将pSecTag2B-muBPI36-259与双荧光素酶报告基因质粒共转染RAW264.7细胞,建立体外检测muBPI25蛋白中和内毒素实验模型。结果:胞内杀菌实验模型证实muBPI25目的蛋白对G-伤寒杆菌具有抑杀作用;中和内毒素实验模型证实muBPI25目的蛋白对内毒素具有中和作用。结论:首次证实小鼠BPI N端功能片段,即muBPI25目的蛋白对G-菌具有抑杀作用,对其裂解产物内毒素具有中和作用。; 吕喆王炜范宜强刘振龙孔庆利温铭杰龙军李晨许晴安云庆; 关键词：RAW264.7细胞内毒素

从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白scFv: 2007年; 目的从大容量噬菌体抗体库中筛选人源性抗角蛋白单链抗体(scFv),测定其特异性结合活性并进行基因序列分析。方法以混合分子量人表皮角蛋白包被固相,对构建的大容量噬菌体抗体库进行筛选,经4轮“吸附洗脱扩增”后,挑取单克隆,用ELISA法测定特异性结合活性,并对阳性克隆抗体基因进行DNA指纹分析及序列同源性分析。结果经4轮筛选,获得9株可表达抗人角蛋白单链抗体的克隆,酶切鉴定正确后,经DNA指纹分析及序列同源性分析证明为不同的抗体基因。结论利用噬菌体抗体库技术获得了人源性抗角蛋白单链抗体,为临床应用研究提供了具有更广阔应用前景的人源小分子抗体。; 张国民乔媛媛陈宇萍吕喆安云庆; 关键词：噬菌体抗体库角蛋白单链抗体

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