刘艳
- 作品数:17 被引量:15H指数:3
- 供职机构:上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金:上海市自然科学基金国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程理学更多>>
- 密码子优化小鼠socs-1基因及其在大肠杆菌中的表达
- 2008年
- 根据已报道的小鼠socs-1基因序列,依据大肠杆菌密码子偏爱性,设计并采用重叠PCR法合成了全长693bp的socs-1基因,将其克隆到表达载体pET-22b中构建表达载体pET-SOCS1。经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示此密码子优化后的基因可在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。
- 龚桂花刘艳胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词:SOCS-1密码子优化重叠PCR
- 头孢菌素C酰基转移酶在顶头孢霉中的表达被引量:3
- 2009年
- 以假单胞菌的头孢菌素C(CPC)酰基转移酶为基础,根据顶头孢霉密码子偏爱性及RNΑ二级结构预测分析,设计并合成了全长2349bp的CPC酰基转移酶基因ecs,并将其在大肠杆菌中表达。结果证明,表达蛋白能将CPC转化为7-ΑCΑ。将ecs表达质粒转化CPC产生菌顶头孢霉,通过PCR、Southern blotting以及Western blotting等方法验证,表明ecs基因已成功整合到顶头孢霉染色体上并得到表达,重组菌的发酵也显示部分CPC直接转化成了7-ΑCΑ。
- 刘艳龚桂花胡又佳朱春宝朱宝泉
- 关键词:顶头孢霉头孢菌素C7-氨基头孢烷酸
- 一种编码CPC酰基转移酶的核苷酸序列及生产7-ACA的方法
- 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列:a)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列;b)与序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序...
- 胡又佳刘艳龚桂花赵文杰朱春宝
- 文献传递
- 利用基因组改组技术改良7-ACA产生菌被引量:1
- 2013年
- 将含假单胞菌(Pseudomonas)头孢菌素C(CPC)酰基转移酶基因ecs的pYG233质粒转入CPC产生菌顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)中,构建可发酵7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的基因工程菌(该菌株含有腐草霉素抗性标记phleo),为第一亲本。同时,构建含有潮霉素抗性标记(hgh)和ecs基因的重组质粒pYG236转化顶头孢霉菌株,以顶头孢霉(含有pYG236)作为第二亲本与第一亲本进行基因组改组,利用双重抗性标记作为融合子筛选条件,筛出一株7-ACA产量提高6.5倍的融合子工程菌。
- 刘春磊刘艳谢丽萍胡又佳
- 关键词:顶头孢霉7-氨基头孢烷酸头孢菌素C基因组改组
- 顶头孢霉的比较蛋白质组学研究
- 头孢菌素C(CPC)是工业上生产头孢类抗生素的重要原料,鉴于其巨大的经济及应用价值,对其产生菌顶头孢霉的研究一直备受重视。在传统育种的基础上,CPC工业发酵单位最高可达4万,但这仍然远低于青霉素工业发酵水平,因此地顶头孢...
- 刘艳刘红胡又佳朱宝泉
- 关键词:顶头孢霉比较蛋白质组学差异蛋白
- 一种用于生产7-氨基头孢烷酸的发酵培养基及其发酵方法
- 本发明提供一种用于生产如式I所示的7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的发酵培养基,以所述发酵培养基的总体积计,它含有:4.2-18%(g/100mL)碳源;10-12%(g/100mL)氮源;和微量元素溶液;以所述微量元素溶...
- 胡又佳刘艳龚桂花朱宝泉刘红
- 文献传递
- 比较蛋白质组学与疾病研究及药物开发被引量:2
- 2011年
- 比较蛋白质组学用于分析不同条件下蛋白质组的变化和差异,发现和鉴定不同生理状态下蛋白质组的差异,可在蛋白质水平提供关于疾病发生和细胞代谢等过程的整体而全面的认识。本文介绍比较蛋白质组学的发展概况及核心技术,着重综述近几年比较蛋白质组学在疾病研究与药物开发方面的进展。
- 刘红刘艳胡又佳
- 关键词:蛋白质组学比较蛋白质组学疾病
- 顶头孢霉蛋白质组的制备被引量:4
- 2011年
- 分别采用液氮研磨-裂解酶破壁和尿素-硫脲结合三氯乙酸(TCA)-丙酮提取法,提取丝状真菌顶头孢霉Acremonium chrysogenum 84-3-87总蛋白,以SDS-PAGE和双向电泳检测比较两法的蛋白提取效果。结果显示,后法所获蛋白浓度高、条带多,双向电泳图像清晰,横条纹较少,拖带现象轻,可作为后续比较蛋白质组学研究的蛋白样本制备方法。
- 刘红刘艳谢丽萍朱宝泉胡又佳
- 关键词:顶头孢霉丝状真菌双向电泳
- 头孢菌素C乙酰化酶在顶头孢霉中的表达
- 7-ACA(7-氨基头孢烷酸)是β-内酰胺类抗生素合成的主要前体,工业上主要以化学裂解法由CPC(头孢菌素C)进行生产,由于化学裂解法环境污染大,原料成本高,现在已有部分厂家采用生物酶催化法进行7-ACA生产。现有生物酶...
- 刘艳龚桂花朱春宝朱宝泉胡又佳
- 文献传递
- 顶头孢霉CPC高低产菌株差异蛋白对CPC合成的影响
- 本研究首先进行了顶头孢霉的比较蛋白质组学的研究。并针对鉴定成功的15个蛋白进一步寻找与CPC合成代谢相关的蛋白,选定了丙酮酸氧化酶、谷胱甘肽转移酶、硫酰转移酶、甘油激酶以及噻唑生物合成酶。随后对上述各酶设计了不同引物,进...
- 王颖秋刘艳谢丽萍胡又佳
- 关键词:头孢菌素合成工艺蛋白质组学
- 文献传递