刘建文
- 作品数：4 被引量：30H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪瘟DNA疫苗在猪体及环境的生物安全性研究被引量：7
- 2005年
- DNA疫苗生物安全性是其走向临床所须解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗为研究对象 ,探讨了其两个方面的生物安全性问题。一方面 ,将两种不同的猪瘟DNA疫苗质粒免疫猪后 ,利用PCR技术分析了其与猪细胞基因组整合的可能性 ,结果在灵敏度为 30拷贝的检测条件下 ,未发现猪瘟DNA疫苗整合到细胞基因组 ;另一方面 ,以PCR技术检测了免疫现场环境样品 ,以分析猪瘟DNA疫苗上的E2基因、CMV启动子基因和抗性基因是否在环境细菌中发生转移和扩散。结果未发现DNA疫苗转化环境细菌的直接证据。因此认为DNA疫苗对猪体和环境是安全的。
- 程从升王文成李素扈荣良涂长春刘建文江禹徐兴然
- 关键词：DNA疫苗生物安全性
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立
- 用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗分别免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-...
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立被引量：23
- 2006年
- 分别用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-blotting试验结果表明,5株单抗均与CSFV E2蛋白和全病毒抗原反应。将筛选的CSFV特异性单抗1E2、3B7和4B6纯化后等量混合后包被酶标板(捕捉抗体),与兔抗CSFV IgG(检测抗体)联合应用,建立起CSFV抗原捕捉ELISA(AC-ELISA)方法。随后采用方阵滴定法确定了单抗与多抗的最适工作浓度及判定检测结果的OD450临界值。最后以建立的AC-ELISA检测CSFV细胞培养物、CSFV攻毒死亡猪的病料和临床猪瘟组织样品,结果表明,该方法敏感、特异、重复性好,与病毒分离和RT-PCR方法符合率分别为86.2%和90.3%。
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立
- 用原核表达的猪瘟病毒(CSFV)主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗分别免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6。间接免疫荧光和Western-...
- 刘建文余兴龙张丽颖涂长春
- 关键词：猪瘟病毒单克隆抗体
- 文献传递
