刘岳龙
- 作品数：107 被引量：791H指数：17
- 供职机构：扬州大学兽医学院江苏省动物预防医学重点实验室更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金江苏省科委自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鹧鸪鸡伤寒沙门氏菌感染的诊断与防治被引量：6
- 2002年
- 某鹧鸪养殖场饲养 1 0 0 0 0只鹧鸪 ,2 40日龄发病 ,临床症状表现为病鹧鸪采食量突然下降 ,精神不振、羽毛蓬松杂乱、粪便呈稀白色 ,病程持续近一个月 ,死亡鹧鸪约 2 0 0只。共送检3 0只 ,剖检病理变化主要为肝肿大、质地极脆易破裂 ,其中 60 %肝呈土黄色 ,2 0 %血液稀薄 ,80 %盲肠内有硬泥块样物质 ,2 0 %眼周皮下水肿 ,3 0 %肾肿大、有出血 ,3 0 %泄殖腔有白色粪便。根据病史调查、症状观察、病理剖检、细菌分离以及染色镜检、生化试验、血清型鉴定一系列试验 ,诊断为由鸡伤寒沙门氏菌感染所引起的细菌性疾病。同时根据药敏试验结果对发病群进行治疗 ,使病情得到迅速控制 。
- 金文杰邵红霞王王月刘岳龙秦爱建
- 关键词：细菌分离血清型鹧鸪
- 抗A型禽流感病毒核蛋白特异性单克隆抗体的研制及其特性
- 利用禽流感H9亚型病毒(AIV-H9)作为免疫原,经腹腔免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,采用间接免疫荧光试验(IFA)方法检测阳性克隆,经有限稀释法亚克隆,建立杂交瘤细胞株。结果获得了5株特异性抗禽...
- 李娜秦爱建邵红霞金文杰刘岳龙
- 关键词：禽流感病毒核蛋白单克隆抗体间接免疫荧光
- 文献传递
- PCR和核酸探针技术诊断MD和RE的比较研究被引量：2
- 2003年
- 分别应用聚合酶链反应 (PCR)技术和核酸探针的点杂交技术 ,对临床鸡肿瘤 /可疑肿瘤病料分别进行马立克氏病 (MD)和禽网状内皮增生症 (RE)的检测。结果MD和RE的PCR检测阳性率分别为 81.9%和 5 3.3% ,探针点杂交检测的阳性率则分别为 77.1%和 2 7.1%。研究的结果表明 ,两种检测技术都有很高的特异性 ,相比而言PCR技术检测的敏感性更高 ,而且更快速、操作更简便、成本更低。
- 王桂军韦平李康然左天荣刘岳龙金文杰秦爱建
- 关键词：马立克氏病聚合酶链反应核酸探针
- 鸡传染性腔上囊病病毒VP2基因在昆虫细胞中的表达被引量：6
- 2005年
- 为了深入研究鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)VP2基因的结构和功能,利用Bac-to-Bac系统研制出含有VP2基因的重组杆状病毒rBac-VP2,将rBac-VP2感染Sf9细胞,并用抗IBDVVP2特异性单克隆抗体经间接免疫荧光试验检测,证实感染重组病毒Sf9细胞能高效表达IBDVVP2基因产物;Western-blotting分析结果表明,VP2基因表达产物的分子质量约为40 ku。
- 李迎晓秦爱建刘红梅邵红霞金文杰刘岳龙
- 关键词：传染性腔上囊病病毒VP2基因重组杆状病毒
- 鸡肿瘤病快速鉴别诊断技术的建立被引量：42
- 2002年
- 根据病毒基因组特征,以聚合酶链反应(PCR)为基础,建立一种能快速鉴别马立克氏病(MD)、禽白血病(AL)和网状内皮增生症(RE)3种常见鸡肿瘤病的诊断技术。研究确定以MDV的132 bpr及ALV和REV的LTRs作为PCR扩增的特异性基因片段,改进样品DNA的提取程序,优化PCR及三重PCR的反应条件及参数,并对该诊断技术的特异性、敏感性进行研究。结果表明:建立的诊断技术具有特异、敏感、快速、经济的优点,为开发鸡肿瘤病快速鉴别诊断试剂盒奠定了基础。
- 韦平何秀苗王桂军李康然刘岳龙蒋玲艳磨美兰陶锦华
- 关键词：肿瘤病聚合酶链反应
- 表达马立克氏病病毒gI基因重组鸡痘病毒的免疫原性被引量：8
- 2002年
- 以鸡痘病毒为载体,构建含马立克氏病病毒(MDV)gI基因的重组鸡痘病毒(rFPV),并在鸡胚成纤维细胞(CEF)中表达gI基因,用重组FPV(命名为rFPV MDV648gI)感染CEF,结果显示:rFPV MDV648gI能在CEF中稳定复制。进一步用rFPV MDV648gI接种无特定病原(SPF)鸡皮下组织,结果表明:鸡对rFPV MDV648gI具有抗体反应性。
- 陈志琳崔治中秦爱建张志吉荣刘岳龙金文杰
- 关键词：马立克氏病病毒重组鸡痘病毒免疫原性
- 鸡γ-干扰素基因的克隆及其在原核和真核系统中的表达被引量：25
- 2003年
- 应用一步法逆转录—聚合酶链式反应 (RT_PCR)技术对罗曼蛋鸡γ_干扰素基因 (CHIFN_γ)进行了扩增。试验结果表明 ,在植物血凝素 (PHA) 5 0 0 μg/mL、细胞浓度 2 .5× 1 0 6/mL、诱导 1 0h,能从外周血淋巴细胞和脾淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段。将RT_PCR产物克隆到PGEM_Teasy载体 ,经过限制性酶切分析、测序证实克隆到的CHIFN_γ基因正确 ,命名为PGEM_CHIFN_γ。序列分析表明 ,CHIFN_γ基因与已发表的鸡IFN_γ基因的同源性为 95 .6%～ 1 0 0 % ,氨基酸水平同源性为 92 .8%～ 1 0 0 % ,与鸭IFN_γ核苷酸同源性为 67.5 %。将CHIFN_γ基因克隆到原核表达载体pGEX_6P_1的GST基因的下游 ,经IPTG诱导后表达出了 43kD的融合蛋白 ,超声波裂解后发现融合蛋白主要以包涵体的形式存在 ,裂解上清无抑制病毒活性 ;然而将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3 .1中 ,通过脂质体转染COS_1细胞 ,用鼠抗CHIFN_γ高免血清进行间接免疫荧光试验 (IFA) ,结果表明在COS_1细胞的细胞膜和胞浆内均有CHIFN_γ表达 ,且细胞病变抑制试验证实 ,转染后细胞培养上清有干扰素活性 ,在鸡胚成纤维细胞 (CEF)上抑制VSV病毒的效价可达到 1 0 2 4U/ml。这些结果表明真核表达系统对CHIFN_γ基因表达产物的活性有重要影响。
- 戴建华秦爱建许金俊刘岳龙金文杰
- 关键词：Γ-干扰素淋巴细胞克隆
- 抗禽流感病毒H9亚型血凝素特异性单克隆抗体的研制被引量：14
- 2003年
- 以H9亚型禽流感病毒免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用血凝抑制试验检测细胞培养上清,结果获得3株阳性细胞株,分别命名为6E6、6B6、5B4。经2次亚克隆后,所有杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感H9亚型特异抗体的能力。特异性试验证明,3株单克隆抗体仅与试验的H9病毒株反应,与H5亚型禽流感病毒、鸡新城疫病毒和鹅源腺病毒等不反应。间接免疫荧光试验(IFA)结果表明,3株单克隆细胞的上清均能与感染H9亚型病毒的鸡成纤维细胞呈持异性绿色荧光反应。实验性病毒检测结果表明,IFA方法检测H9禽流感比鸡胚接种分离病毒的效果好、灵敏度高,是一种经济实用的方法。获得的单克隆抗体可在禽流感流行病学的监测及预警预报中发挥重要作用。
- 钱琨秦爱建邵红霞刘岳龙金文杰
- 关键词：禽流感单克隆抗体血凝抑制试验间接免疫荧光试验
- 鹅源腺病毒基因组DNA物理图谱的构建被引量：7
- 2000年
- 将鹅源腺病毒Y81G4 株全基因组DNA的HindⅢ酶切片段分别插入质粒 pUC18,成功构建了全基因组DNA文库。在此基础上 ,将重组质粒携带的插入片段切出、回收并分别用地高辛标记后作为探针 ,与经限制酶BamHI、EcoRI、PstI、EcoRV消化的病毒基因组DNA进行SouthernBlotting ,杂交结果经比较综合后获得了该病毒基因组DNA的HindⅢ、BamHI、EcoRI、PstI、EcoRV限制性内切酶的物理图谱。利用已发表的含有鸡EDS76病毒AA 2株基因组DNA右末端的重组质粒pBE4 2作为探针 ,与本病毒两末端重组质粒进行SouthernBlotting ,根据同源性杂交结果确定了本病毒基因组DNA物理图谱与EDSVAA 2株相应的方向。本病毒基础因组DNA物理图谱的精确构建 ,为进行基因组结构分析 ,筛选复制非必需区 。
- 徐福洲崔治中刘岳龙段玉友孙怀昌
- 关键词：基因组DNA物理图谱
- J亚群禽自血病病毒超感染抗性鸡胚成纤维细胞系建立
- 将J亚群禽白血病病毒囊膜基因(ALV-J env)插入pcDNA3.1真核表达载体构建成转移载体pcDNA-env,并转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,通过Zeocin药物筛选获得转染阳性细胞。细胞经传30代后,冻存。13个...
- 叶建强秦爱建邵红霞刘红梅金文杰刘岳龙
- 关键词：J亚群禽白血病病毒ENV基因细胞系抗病毒感染
