关立照
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京大学药学院分子与细胞药理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学机械工程更多>>
- 全内反射双通道观察双标记荧光染色的非洲绿猴肾细胞
- 2010年
- 在像增强型电荷耦合器件(ICCD)荧光显微成像装置上用双通道成像方法观察了非洲绿猴肾细胞(COS-7)中由EGFP转染的肌球蛋白Myosin 15a,以及Rhodamine标记的细胞微丝。为观察微丝尖端的肌球蛋白Myosin 15a,采用了高灵敏、低损伤的全内反射激发荧光显微成像技术,并在双通道中选用合适滤光片组合消除两种荧光染料间的光谱串扰。实验观测到非洲绿猴肾细胞内过表达的肌球蛋白Myosin 15a和伸长的微丝的分布情况,尤其是清晰观察到Myosin 15a在微丝上的分布。为全内反射双通道荧光成像技术在生命科学中的应用展示了广阔的前景。
- 刘晓晨关立照马页云张宏权
- 关键词：双通道肌球蛋白微丝
- 沉默钙激活氯通道ANO1促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡
- 目的 探讨沉默钙激活氯通道(anoctamin1,ANO1)对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 采用siRNA沉默ANO1在PC-3细胞的表达；采用ELISA、流式细胞仪检测细胞凋亡；采用ApoONE ...
- 宋艳关立照王克威
- 关键词：钙激活氯通道前列腺癌肿瘤坏死因子TNF-Α
- 沉默钙激活氯通道ANO1促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡
- 2015年
- 目的探讨沉默钙激活氯通道（anoctamin1,ANO1）对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响及其分子机制.方法采用siRNA沉默ANO1在PC-3细胞的表达;采用ELISA、流式细胞仪检测细胞凋亡;采用Apo-ONEHomogeneous Caspase-3/7Assay检测Caspase活性;采用基因表达谱分析检测沉默ANO1表达后PC-3细胞内基因变化,以及Real-timePCR和Westernblot验证.将全长ANO1基因（来源于NCBI）与pIRES2-EGFP融合,构建ANO1-IRES2表达载体,获得稳定表达ANO1的RWPE-1细胞系.结果ANO1在人前列腺癌PC-3细胞中呈高表达,沉默ANO1可诱导PC-3细胞凋亡,并增加肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF-α）表达和Caspase-3/7活性.TNF-α抑制剂来那度胺（lenalidomide）20nmol·L^-1可逆转沉默ANO1诱导的细胞凋亡.同时,ANO1在人正常前列腺细胞RWPE-1中呈低表达,过表达ANO1可降低RWPE-1细胞凋亡,同时降低TNF-α表达和Caspase-3/7活性.总之,ANO1表达与TNF-α呈负相关.结论沉默ANO1表达可诱导PC-3细胞凋亡,其机制可能与激活TNF-α介导的信号转导通路相关.
- 宋艳关立照王克威
- 关键词：钙激活氯通道前列腺癌肿瘤坏死因子TNF-Α
- 人乙酰转移酶样蛋白的核仁定位及在肿瘤中的表达被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨端粒酶调节相关蛋白——人乙酰转移酶样蛋白(hALP)核仁定位的分子基础及相关功能。方法:利用免疫荧光及免疫电镜的方法检测hALP在HeLa及Saos2细胞中的分布情况,通过rDNA荧光原位杂交及免疫荧光观察hALP与rDNA定位关系,利用RNA干扰的方法进一步证明其核仁定位性,通过基因重组构建包含不同长度片段的hALP基因的真核表达质粒并转染细胞以探讨其核仁定位的分子基础,运用免疫组织化学的方法检测hALP在多种肿瘤组织中的表达情况。结果:hALP在HeLa及Saos2细胞分裂间期主要定位于核仁,并与rDNA有共定位。免疫电镜显示,hALP主要位于核仁的颗粒区;RNA干扰后hALP在核仁区的染色明显减弱;其核仁定位由hALP羧基端的功能域介导。hALP蛋白表达于多种人肿瘤细胞(如平滑肌肉瘤、原始神经外胚叶瘤、神经母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌及肾透明细胞癌)的核仁。结论:hALP蛋白具有明显的核仁定位性,并由其特异性的功能域介导,hALP可表达于多种肿瘤细胞的核仁,其意义值得进一步探讨。
- 关立照沈棋孙颖王教辰龚一蕾侯琳张波
- 关键词：肿瘤
- 端粒长度变化和相关调节因子表达与间叶肉瘤类型及分化的研究
- 研究背景及目的细胞端粒通过其 DNA 序列与相关蛋白 POT1、TRF1、2等结合形成染色体末端的保护性结构。端粒长度可因细胞分裂或失去相关结合蛋白而短缩,相反可在端粒酶的催化下保持其一定长度。目前肿瘤发生的研究认为：在...
- 张波沈棋王教辰迟应凯关立照候琳
- 文献传递
- 组蛋白乙酰化酶hALP在核仁区的定位及其在肿瘤细胞的表达研究
- 研究背景及目的核仁为核蛋白体合成、组装的场所,与细胞蛋白质合成密切相关。因此,核仁也是细胞功能活跃及增殖的形态标志之一。近来的研究表明核仁还参与细胞应激调节并与 p53、ARF 等抑癌基因、端粒酶 hTERT 活动相关,...
- 张波关立照凌云沈棋王教辰迟应凯侯琳
- 文献传递
