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丁铭佑
作品数:
1
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供职机构:
武汉大学人民医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
刘超红
中国科学院武汉病毒研究所
陈颖
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曹俊
武汉大学人民医院
孙铁汉
湖北省医学会
于红刚
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2006
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抑瘤细胞运动和侵袭的鼠FRNK重组腺病毒的构建
2006年
目的应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统构建小鼠FRNK基因重组腺病毒,并在293HEK细胞中扩增制备重组病毒。方法把小鼠FRNK基因克隆入腺病毒穿梭载体pad- Track-CMV中,构建腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-FRNK,经Pme I内切酶酶切成线性化后,采用电穿孔转化将其转化到含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的感受态大肠杆菌BJ5183中,通过卡那霉素筛选获得阳性腺病毒重组质粒。再将获得的腺病毒重组质粒转染到293HEK细胞进行包装,获得FRNK重组腺病毒pAdFRNK。荧光显微镜下观察绿荧光的表达。结果经酶切和绿荧光表达证明了小鼠FRNK基因的重组腺病毒载体pAdFRNK构建成功,并制备出高滴度的重组病毒。结论成功构建携带小鼠FRNK基因的重组腺病毒pAdFRNK,为研究FRNK的基因治疗奠定了基础。
曹俊
孙铁汉
丁铭佑
陈颖
刘超红
于皆平
于红刚
关键词:
腺病毒载体
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