骆莹
- 作品数:46 被引量:73H指数:5
- 供职机构:天津市第三中心医院更多>>
- 发文基金:天津市卫生局科技基金天津市应用基础与前沿技术研究计划天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学文化科学更多>>
- 三种肝细胞株迁移及侵袭能力的比较
- 刘辉朱争艳王鹏骆莹石文霞焦晓磊
- 大鼠CBRH-7919肝癌细胞诱导大鼠骨髓间充质干细胞向血管内皮细胞分化的初步研究被引量:1
- 2012年
- 目的体外观察大鼠CBRH-7919肝癌细胞诱导大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)向血管内皮细胞分化及其机制。方法分离Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,鉴定后构建BMSC与肝癌细胞的共培养模型,分3组:共培养组、单独BMSC组及含有抗VEGF抗体的共培养组,48 h和72 h后,免疫荧光法检测VEGFR2和CD31的表达,半固体培养基检测毛细血管样结构的形成。结果 BMSC表型鉴定为CD29+/CD44+/CD45-/CD34-,48 h后,共培养组BMSC少量表达CD31和VEGFR2,阳性率分别为(11.50±1.87)%和(12.33±1.37)%,且出现毛细血管样结构(8.00±0.05),72 h后,共培养组CD31和VEGFR2表达明显增多,阳性率分别为(24.43±2.23)%和(24.86±0.69)%,毛细血管样结构也明显增加(22.00±0.02),而单独BMSC组和含有抗VEGF抗体的共培养组均阴性。结论血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠CBRH-7919肝癌细胞诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化成血管内皮细胞过程中起了关键作用。
- 周佳美向慧玲朱争艳吕洪敏骆莹王鹏李雅玥尹春阳
- 关键词:骨髓间充质干细胞分化血管内皮细胞
- 肝细胞癌中CD90抗原的表达及与上皮间质转化的关系被引量:1
- 2015年
- 目的探讨肝细胞癌中干细胞相关蛋白CD90的表达和临床病理学特征的关系,分析CD90蛋白和上皮间质转化相关蛋白上皮钙黏素(E—cad)、神经钙黏素(N—cad)表达的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测53份原发性肝细胞癌组织中CD90、E—cad、N—cad的表达,并以10份肝良性病变周围肝组织作对照。应用流式细胞技术检测MHCC97-L和HCCLM一3两个肝癌细胞系CDg0阳性细胞中E—cad、N—cad蛋白的表达情况。计数资料采用卡方检验,Spearman等级相关分析比较。计量资料采用独立样本t检验进行比较。结果对照肝组织中无CD90表达,肝细胞癌组织中CD90蛋白阳性率为34%(18/53),两组差异有统计学意义(X2=4.755,P〈0.05)。肝细胞癌组织中CD90蛋白表达和门静脉癌栓呈正相关(r=0.378,P〈0.05),与组织分化和包膜浸润呈负相关(r=-0.398、-0.519,P均〈0.05)。肝细胞癌组织中CD90蛋白表达与E—cad表达呈负相关(r=-0.341,P〈0.05),与Ncad表达呈正相关(r=0.441,P〈0.05)。HCCLM-3细胞系中CD90阳性细胞的E-cad蛋白表达低于MHCC97-L细胞系[(2.56±0.29)%和(4.31±0.18)%,t=8.757,P〈0.051,而N—cad蛋白表达高于MHCC97-L细胞系[(8.10±1.45)%和(5.51±0.44)%,t=-9.667,P〈0.051。结论肝细胞癌干细胞相关蛋白CD90的表达与肿瘤发生上皮间质转化存在相关性,两者相互作用促进肿瘤侵袭转移,可能是肝细胞癌治疗的一个新靶点。
- 刘冰冰张传山马喆张勤刘贵秋骆莹朱争艳
- 关键词:肝肿瘤干细胞CD90上皮间质转化
- 重度抑郁症诊断用标志物
- 本发明公开了重度抑郁症诊断用标志物,所述标志物为MRPS18C和ZER1。本发明首次公开了MRPS18C和ZER1在重度抑郁症患者中呈现高表达,通过检测MRPS18C和ZER1的表达水平可以实现重度抑郁症的诊断。
- 李成龙李南南朱争艳吴迎梅王志爽景丽刘彤王鹏骆莹石文霞
- 文献传递
- 人肝切除术后血清对hiPS细胞向肝细胞样细胞诱导分化的影响
- <正>目的探讨肝切除术后血清对hiPS细胞向肝细胞诱导分化过程中的作用,为进一步优化hiPS细胞向肝细胞诱导方案提供实验基础。方法hiPS细胞向肝细胞诱导采用阶段诱导法,不同阶段在基础培养液中添加血清及不同的细胞因子以达...
- 邢谦哲骆莹高英堂王毅军朱争艳王鹏杜智
- 文献传递
- CIK细胞对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用研究
- <正>目的探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对肝癌细胞株HepG2的杀伤作用,分析其抑瘤作用的最佳效靶比及最佳治疗时间。方法采集肝胆病院40例肝细胞肝癌(HCC)患者静脉外周血,加入淋巴细胞分离液(Ficoll),采用...
- 刘辉朱争艳王鹏骆莹李成龙张海鹏杜智
- 文献传递
- 大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基对大鼠肝癌细胞系CBRH-7919增殖能力的影响被引量:9
- 2011年
- 目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞条件培养基对大鼠CBRH-7919肝癌细胞增殖能力的影响。方法:分离Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,鉴定后进行体外培养,制备骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSC-CM),MTT比色法检测BMSC-CM对7919肝癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测BMSC-CM对7919肝癌细胞周期的影响,ELISA检测BMSC-CM对7919肝癌细胞分泌AFP的影响。结果:MTT比色法结果显示:25%、50%、75%及100%BMSC-CM组的吸光度值(A值)分别为:0.395±0.050、0.459±0.079、0.501±0.084及0.566±0.099,各组均高于0 BMSC-CM组(0.277±0.064()P均<0.05),并且随着浓度的增加,A值逐渐升高,呈浓度依赖性。流式细胞仪结果显示:25%、50%、75%及100%BMSC-CM组的细胞增殖指数均高于0 BMSC-CM组,P均<0.05,差异有统计学意义,并且随着浓度的升高,细胞增殖指数逐渐增加。ELISA结果显示:25%、50%、75%及100%BMSC-CM组的AFP值分别为:12.562±0.071、14.660±0.106、16.397±0.058及23.196±0.137,均高于0 BMSC-CM组(3.143±0.033()P均<0.05),并且随着浓度的增加,AFP值逐渐升高。结论:大鼠骨髓间充质干细胞的条件培养基可以促进大鼠肝癌细胞系CBRH-7919肝癌细胞的增殖。
- 周佳美向慧玲朱争艳吕洪敏骆莹王鹏李雅玥尹春阳
- 关键词:骨髓间充质干细胞条件培养基增殖
- EphA2在不同肝癌细胞系中过表达及其与乙肝病毒感染相关被引量:4
- 2013年
- 目的观察EphA2在不同肝癌细胞系中的表达及与乙肝病毒(HBV)感染的相关性。方法体外培养正常人肝细胞系HL7702及HepG2和HepG2.2.15两种肝癌细胞系,用免疫化学染色及蛋白免疫印迹法,检测EphA2蛋白的表达,用流式细胞术检测细胞的增殖指数与凋亡率,分析EphA2表达与肝细胞凋亡、增殖的关系。通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测肝癌细胞中HBV DNA的水平,分析EphA2表达与HBV感染的相关性。结果与正常肝细胞比较,两种肝癌细胞中EphA2蛋白表达均明显增强(P<0.05),且HepG2.2.15细胞中EphA2的表达水平显著高于HepG2细胞中EphA2的表达水平(P<0.01);与正常肝细胞比较,两种肝癌细胞的增殖指数升高、细胞凋亡率降低(P<0.01),且肝细胞的增殖、凋亡与EphA2表达具有明显相关性(P<0.01)。HepG2.2.15细胞中HBV DNA水平显著高于HepG2细胞中HBV DNA水平,且HBV DNA水平与EphA2表达呈显著正相关(r=0.878,P<0.05)。结论EphA2在肝癌细胞中过表达,可促进肝细胞的恶性生长,抑制肝细胞的凋亡,且EphA2过表达与HBV感染密切相关。
- 王鹏朱争艳李成龙骆莹张海鹏刘辉
- 关键词:肝癌EPHA2细胞增殖乙型肝炎病毒
- 乙肝病毒S基因Pre-S区突变的人肝癌细胞HepG2稳定株构建及其生物学行为变化被引量:4
- 2019年
- 目的构建稳定过表达乙肝病毒(HBV) S基因Pre-S区突变(Pre-S1缺失突变、Pre-S2缺失突变)的HepG2细胞株,并观察该突变对HepG2细胞生物学行为的影响。方法以NCBI中HBV JX661479. 1的Pre-S/S片段序列信息为模板,设计并确定Pre-S1突变、Pre-S2突变的核苷酸序列,采用全基因合成法获得目的片段并定向导入带有FLAG标签的p LVX慢病毒质粒载体(p Lenti-CMV-3FLAG-PGK-Puro),PCR、双酶切、Sanger测序技术检测重组质粒中目的片段的准确性。将HepG2细胞随机分为5组,空白对照组不处理,p LVX-vector组、野生型组、Pre-S1突变组、Pre-S2突变组分别感染p LVX-vector、p LVX-Pre-S/S、p LVX-Pre-S1 mut/S、p LVX-Pre-S2 mut/S慢病毒液;利用嘌呤霉素筛选HepG2稳定株,采用Western blotting法鉴定目的蛋白,分别采用克隆形成、细胞划痕试验观察HepG2细胞稳定株增殖、迁移能力。结果构建的p LVX-Pre-S/S、p LVX-Pre-S1 mut/S、p LVX-Pre-S2 mut/S重组表达质粒PCR电泳产物与理论值相符,经EcoRⅠ和Bam HⅠ双酶切后电泳产物与理论值相符; Sanger测序结果显示,p LVXPre-S1 mut/S、p LVX-Pre-S2 mut/S突变型除突变序列外,其他序列与HBV S基因野生型序列完全相同。空白对照组HepG2细胞全部死亡,其余组HepG2细胞部分存活。在野生型组、Pre-S1突变组、Pre-S2突变组43 k D分子量位置检测到目的条带表达,而p LVX-vector组无法检测到相应条带。与其他组比较,Pre-S2突变组HepG2的第14天克隆形成数增多、细胞相对迁移距离增大(P均<0. 05)。结论成功构建了HBV Pre-S/S基因野生型及Pre-S突变型的HepG2细胞稳定株,HBV的S基因Pre-S2缺失突变导致肝癌HepG2细胞增殖及迁移能力增强。
- 郑羽飘钱宝鑫覃琴骆莹朱争艳高英堂王凤梅
- 关键词:肝癌HEPG2细胞细胞迁移
- 肝脏来源的干细胞和皮肤成纤维细胞有限细胞系的建立及诱导分化研究
- 目的研究肝脏来源的干细胞和皮肤成纤维细胞有限细胞系的建立及诱导分化。方法从人胎肝中分离到贴壁生长的间充质干细胞样肝干细胞,细胞形态类似于成纤维细胞,同时取与肝干细胞同一个体的皮肤组织,分离培养成纤维细胞。此两种细胞均可在...
- 朱争艳骆莹黎娇王鹏杜智
- 文献传递