项瑜
- 作品数：7 被引量：55H指数：5
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 改造的马铃薯Y病毒复制酶基因介导高度抗病性被引量：27
- 1996年
- 提取马铃薯Y病毒中国分离株(PVY-C)的mRNA作为模板,随机六聚脱氧核苷酸和寡聚dT为引物合成了单链cDNA。通过聚合酶链式反应(PCR)获得了PVY-C的核内含体b(NIb)全长cDNA克隆。在对其进行全序列分析的基础上,构建了PVY-C NIb基因全长,5＇端缺失381个碱基和NIb反义RNA三种不同形式高等植物表达载体。在土壤农杆菌LBA4404的介导下,转化烟草生产品种NC89,获得了所有三种表达载体的转基因植株。通过分子生物学检测和抗性分析发现不同形式的NIb基因序列的转基因植株对马铃薯Y病毒表现不同程度的抗性。其中,以5＇端缺失的NIb的基因转化植株表现最好,从总共20个这类转化株系中筛选到4个株系至少在100μg/ml PVY-C接种浓度下,表现完全的抗病效果。从总共39个全长NIb基因转化株系中,仅有一个株系,在100μg/ml PVY-C的攻毒接种下具有完全的抗病性。所有33个NIb基因反义RNA的转化植株中,无一株系表现完全的抗病效果,但是有部分株系能不同程度地延缓或减轻发病程度,并有部分植株在发病后50d左右有恢复健康的趋势。虽然能够在上述3种形式的NIb基因序列的转基因植物中检测到相应的RNA的转录产物,但是均未能检测到其相应的蛋白表达产物。
- 项瑜杨兰英彭学贤莽克强
- 关键词：马铃薯Y病毒复制酶基因转基因植物
- 表达马铃薯Y病毒外壳蛋白的转基因烟草的抗病性研究被引量：20
- 1995年
- 将马铃薯Ｙ病毒中国分离物（ＰＶＹ－Ｃ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因，在土壤农杆菌ＬＢＡ４４０４的介导下，转化烟草生产品种ＮＣ８９，获得了６个转基因烟单株系。通过抗性分析发现，６个株系中有一个株系在２００μｇ／ｍｌＰＶＹ－Ｃ的攻毒下，仍未发病。分子检测发现，转基因植物中抗性产生的程度并不是同ＰＶＹ－Ｃ外壳蛋白的表达水平成正相关。
- 项瑜杨兰英周雪荣崔晓江彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒外壳蛋白转基因植物转基因烟草
- 马铃薯Y病毒6kD和NIa基因的克隆与序列分析及其植物表达载体的构建被引量：8
- 1995年
- 马铃薯Ｙ病毒６ｋＤ和ＮＩａ基因的克隆与序列分析及其植物表达载体的构建项瑜，杨兰英，彭学贤，魏宁生关键词马铃薯Ｙ病毒，６ｋＤ基因，ＮＩａ基因，序列分析，植物表达载体马铃薯Ｙ病毒（ＰｏｔａｔｏｖｉｒｕｓＹ，ＰＶＹ）是马铃薯Ｙ病毒组（Ｐｏｔｙｖｉｒｕｓｇｒ...
- 项瑜杨兰英彭学贤魏宁生
- 关键词：马铃薯Y病毒
- 马铃薯Y病毒复制酶基因的转基因烟草对PVY的抗性被引量：7
- 1996年
- 将农杆菌ＬＢＡ４４０４／ｐＡＬ４４０４、ｐＢｉｎ４３８双元载体上的ＮＩｂ基因正义序列、反义序列、５′－缺失序列及新霉素磷酸转移酶基因（ＮＰＴⅡ）转入烟草品种ＮＣ８９的染色体，获得抗卡那霉素的转化再生烟草植株。经抗性筛选、ＰＣＲ检测、无性扩繁和大量重复抗病鉴定，结果表明，转化烟草植株ＤＮＡ中整合了外源目的基因；ＮＩｂ基因正义序列、５′－缺失序列转化再生植株中，均出现抗１０μｇ／ｍｌＰＶＹ侵染的植株；ＮＩｂ基因反义序列转化再生植株仅部分抗５μｇ／ｍｌＰＶＹ侵染。ＥＬＩＳＡ分析认为抗性植株无病毒累积。
- 孙启达张友谊赵文明项瑜彭学贤
- 关键词：马铃薯Y病毒转基因烟草抗病性基因工程
- 马铃薯Y病毒6kD和NIa基因转化的烟草介导抗病性被引量：1
- 1996年
- 将马铃薯Ｙ病毒中国分离株（ＰＶＹ－Ｃ）的６ｋＤ和ＮＩａ基因拼接和改造，分别构建了其正向表述和反向转录的植物表达载体。借助土壤农杆菌ＬＢＡ４４０４将在此双元载体上的６ｋＤ和ＮＩａ基因及新霉素磷酸转移酶基因（ＮＰＴⅡ）转入到烟草品种ＮＣ８９的染色体上，从而获得了抗卡那霉素的转化再生烟草植株。用ＰＶＹ－Ｃ对这些转化烟草进行抗性接种试验，结果表明部分转基因植株能够抵制ＰＶＹ－Ｃ的侵染，对抗病植株的子一代（Ｒ１）进行进一步的抗性分析发现，其Ｒ１代通过遗传也获得了这种抗病性。
- 杨兰英项瑜魏宁生彭学贤
- 关键词：马铃薯基因转基因烟草
- 马铃薯Y病毒复制酶基因的克隆和序列分析被引量：11
- 1994年
- 马铃薯Ｙ病毒复制酶基因的克隆和序列分析彭学贤，项瑜，刘俊君，莽克强（中国科学院微生物研究所，北京１００００８０）ＭｏｌｅｃｕｌａｒｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆＰＶＹＮＩｂｇｅｎｅ￥ＰｅｎＸｕｅｘｉａｎ；ＸｉａｎｇＹｕ；Ｌｉ...
- 彭学贤项瑜刘俊君莽克强
- 关键词：马铃薯Y病毒复制酶基因基因序列
- 一种基于过敏性反应机制的抗植物病毒侵染策略被引量：3
- 1996年
- 基于植物的过敏性反应机制,构建了PVY NIb基因和来自于细菌Bacillus amy-loliquefaciens的一类RNase基因-Barnase基因的融合基因的植物表达载体。在此表达载体内两基因的拼接处,保留了原来PVY蛋白酶识别PVY NIb和CP蛋白剪切位点的七肽保守序列。通过农杆菌介导获得此融合基因的转基因烟草植株。病毒侵染试验表明,转基因植物在病毒侵染后,发病症状被改变。少部分转融合基因的植株对病毒侵染表现局部抗性。
- 项瑜刘俊君杨兰英彭学贤莽克强
- 关键词：植物抗病育种过敏性反应植物病毒转基因植物
