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韦娜
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1
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供职机构:
军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室
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发文基金:
长江学者和创新团队发展计划
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
谭亚芳
军事医学科学院微生物流行病研究...
彭广能
四川农业大学动物医学院动物疫病...
张婷婷
四川农业大学动物医学院动物疫病...
韩伟
军事医学科学院微生物流行病研究...
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军事医学科学院微生物流行病研究...
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杨慧盈
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张婷婷
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2013
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鼠疫耶尔森菌Ⅲ型分泌系统相关基因的功能研究
2013年
目的研究鼠疫耶尔森菌pCD1质粒上编码的假定蛋白YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16与pCD1质粒编码的Ⅲ型分泌系统(T3SS)在功能上的相关性。方法采用λ-Red重组系统构建鼠疫耶尔森菌YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因的突变株,通过测定分别培养于26℃下有钙、37℃下无钙和有钙TMH培养基中的以上3种突变菌株及野生菌株的生长曲线,分析突变菌株的低钙响应情况;在26℃和37℃条件下分别培养鼠疫菌突变菌株,并提取总RNA,采用定量PCR分析3种基因的转录水平及其对温度的依赖性;用β-内酰胺酶报告分子的方法分析3种基因的突变对效应蛋白转运的影响。结果在26℃和37℃低钙培养条件下,突变菌株△YpCD1.08、AYpCD1.09、△YpCD1.16的生长曲线与野生型菌株一致,表明其低钙响应正常。YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因在37℃与26℃转录水平的比值分别为2.3±0.3、2.3±0.5、3.2±0.7,表明这3个基因在鼠疫菌中均有转录,且其转录水平受温度调控,与T3SS基因转录水平的温度依赖性一致。β-内酰胺酶报告分子实验结果表明,突变菌株△YpCD1.08在140min时477与520nm波长的发光强度的比值为2.5,而野生型菌株仅为1.8,表明△YpCD1.08菌株对YopE的转运能力要高于野生株,而其他两个突变株与野生株类似。结论YpCD1.08、YpCD1.09、YpCD1.16基因有可能是T3SS的新成员,假定蛋白YpCDI.08可能参与效应蛋白YopE的转运及其调控。
张婷婷
彭广能
杨慧盈
谭亚芳
崔明全
韦娜
韩伟
杜宗敏
关键词:
耶尔森菌
鼠疫
毒力
蛋白相互作用
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