陈海洋
- 作品数：3 被引量：0H指数：0
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HL-60细胞诱导分化过程中STIM1 siRNA干扰的电转染研究
- 2011年
- 目的:以感受器相互作用分子(STIM1)为报告基因优化悬浮培养的二甲基亚砜(DMSO)诱导分化的HL-60细胞的电穿孔转染条件。方法:通过控制电压、电容、电阻、细胞状态等转染条件,采用不同条件组合后用电穿孔法将靶向STIM1的siRNA转入悬浮培养的dHL-60细胞,用荧光显微镜观察转染率,蛋白免疫印记方法检测干扰效率。结果:适当提高电压能提高悬浮培养的dHL-60细胞的转染效率,细胞状态不同干扰效率有所差异,DMSO诱导4 d的dHL-60细胞在电压295V、电容1 180μF、电阻500Ω的条件下转入STIM1 siRNA系列并得到最大干扰效率(约60%)。结论:针对dHL-60细胞这种比较特殊的细胞系来说,电穿孔转染法是一种较好的基因转染方法,通过优化其转染条件,可以提高其对dHL-60细胞的SiRNA干扰效率。
- 陈海洋邹文英谢翠华孟晓静蔡春青
- 关键词：SIRNA干扰
- TRPM7分子在MDA-MB-435s乳腺癌细胞迁移和侵袭中的作用机制探讨
- 研究背景乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,其发病对生活质量造成严重影响。在全球范围内,乳腺癌占了女性侵袭性肿瘤的22.9%和全部肿瘤的16%。乳腺癌在发达国家中的发病率比发展中国家的发病率要高,这与发达国家的饮食等生活习惯...
- 陈海洋
- 关键词：乳腺癌迁移SRCMAPK
- 文献传递
- 中性粒细胞极性化过程中定向和侧足形成的方法学模式
- 2011年
- 背景:中性粒细胞极性是其趋化和产生防御功能的基础,而极性化过程中定向能力和侧足形成是重要的环节,目前相关研究的报道还很少。目的:观察均匀浓度、陡峭浓度梯度、平缓浓度梯度3种实验模式下细胞极性过程中片足的方向和侧足的形成情况,试图找出研究中性粒细胞极性的方法学模式。方法:①采用密度梯度离心法,成功急性分离人中性粒细胞。②均匀浓度、陡峭浓度梯度和平缓浓度梯度甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸对细胞进行趋化刺激。③倒置显微镜下观察细胞极性变化情况,判断细胞移动方向。④对细胞进行荧光双标,激光共聚焦显微镜下观察F-actin聚合情况。结果与结论:①均匀浓度下,中性粒细胞极性化方向和移动轨迹随机分布。②陡峭梯度浓度下,41%的细胞呈现电极向心性分布。③平缓梯度下,68%的细胞表现为沿着甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸浓度的分布,χ2检验提示平缓浓度梯度实验模式存在较好的定向性。④三者均有明显的侧足形成,以均匀浓度为高,这与定向性呈现为相反的结果。结果显示平缓浓度梯度实验模式在研究细胞定向机制方面相对较好,另一方面对细胞定向的干扰可能来源于细胞侧足的形成。
- 陈海洋蔡春青谢翠华罗琼孟晓静
- 关键词：嗜中性粒细胞F-ACTIN
