从石油污染土壤筛选出一株高效石油降解菌JC-106,经细菌形态学、生理生化及16S r DNA序列分析鉴定为赤红球菌(Rhodococcus rubber).在温度15~40℃、初始p H 6~8、盐度0~4%条件下培养生长良好.该菌能利用十二烷、二十四烷、正辛烷、邻苯二酚、蒽、萘为唯一碳源生长.在较低温度下能有效降解原油,在15和35℃培养15 d对原油降解率分别为41.61%和58.18%,GC-MS分析发现原油组分中正构烷烃(C14~C44)降解率达到96.13%.在含1000 mg·L^(-1)原油的人工废水中加入2%(V/V)赤红球菌JC-106菌悬液,采用SBR间歇式活性污泥法处理含油废水,15 d后出水COD、NH_4+-N、TP平均去除率分别为96.49%、96.88%、99.15%,原油去除率为92.43%,对照组原油去除率仅为53.80%.JC-106在含油废水中稳定生长,数量维持在4.8×1010~1.0×1011cfu·mL^(-1)左右.
从石油污染土壤分离到30株石油降解菌,经复筛得到一株适应能力强、对石油降解效率高的优势菌株JC3-1。该菌株在温度为20～40℃、p H 5～9、盐度（Na Cl）为0～3%（W/V）条件下生长良好。在以4 g/L原油为惟一碳源的培养基中生长15 d后对原油的降解率达42.15%。通过形态学观察、生理生化实验及16S r DNA序列分析,初步鉴定属于嗜油不动杆菌（Acinetobacter oleivorans）。菌株在以正戊烷、正己烷、十六烷、十八烷、苯、甲苯、二甲苯、邻苯二酚、萘、芘为惟一碳源培养基中都能很好生长。用特异性PCR检测发现,JC3-1具有酰基辅酶A脱氢酶、苹果酸合成酶、异柠檬酸裂合酶、Ton B-依赖性铁载体受体、铁载体受体蛋白、多功能脂肪酸氧化酶复合体α亚单位等代谢功能基因,及烷烃单加氧酶、芳烃双加氧酶、联苯双加氧酶、邻苯二酚双加氧酶、萘双加氧酶、甲苯双加氧酶等降解功能基因。
为丰富石油降解微生物菌种库,筛选更加高效、适应性更强的降解菌株,从西部荒漠地区石油污染土壤中分离石油降解菌,经细菌形态学、生理生化及16S r DNA序列分析进行鉴定,采用紫外分光光度法和气相色谱质谱联用(GC-MS)研究菌株生长及降解特性,利用PCR检测石油烃代谢相关基因.结果显示,分离的3株石油降解菌株KB1、2182和JC3-47在含油培养基中培养3 d后,石油降解率分别为41.02%、32.26%和55.90%,3株菌均属于红球菌属(Rhodococcus spp.),其中KB1与红平红球菌(Rhodococcus erythropolis)、2182与马红球菌(Rhodococcus equi)、JC3-47与庆笙红球菌(Rhodococcus qingshengii)的16S r DNA序列相似性分别均为100%,初步确定3株菌属于红平红球菌、马红球菌和庆笙红球菌.在温度10-50℃,p H 3-9,盐度为0-5.0%条件下菌株能很好生长,KB1和2182的最适生长温度为35℃,JC3-47最适温度为30℃,KB1和2182还可在p H 2和9.0%盐度的极端条件下生长.菌株能以十二烷、十八烷、苯、甲苯、二甲苯和萘为唯一碳源生长,其中KB1和J C3-47还能在含芘的培养基生长.GC-MS分析发现3株菌对中链及长链烷烃都具有较强降解能力,能产生表面活性剂,对十六烷具有一定粘附能力.利用特异性PCR扩增,在3株菌中均检测到烷烃单加氧酶基因、芳香烃双加氧酶基因和邻苯二酚双加氧酶基因,在KB1和2182中还检测出联苯双加氧酶基因.本研究表明,3株红球菌具有较强石油降解能力,适应性强,可用于高盐、低温等极端环境石油污染土壤的生物修复.
