许耘川
- 作品数:8 被引量:18H指数:2
- 供职机构:上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金上海市基础研究重大(重点)项目更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较
- 许耘川袁向亮沈立松
- HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较
- 目的建立测定血清中甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)浓度的高效液相色谱(HPLC)方法,并与荧光偏振法(FPIA)作比较,评价其临床实用性。方法血清样品经20%高氯酸沉淀蛋白质,吸取上清液进行HPLC分析。以M...
- 许耘川袁向亮沈立松
- 文献传递
- 焦磷酸测序法检测结直肠癌患者K-ras基因突变
- 目的 K-ras基因突变已成为EGFR抑制剂(如西妥昔单抗和帕尼单抗)能否用于结直肠癌分子靶向治疗的用药评判标准,K-ras基因突变型患者不能从抗细胞表皮生长因子受体治疗中获益,反而徒增不良反应危险和治疗费用。焦磷酸测序...
- 谢国化许耘川荣婷婷沈立松
- HPLC法测定血清甲氨蝶呤浓度的方法建立及其与荧光偏振法的比较被引量:14
- 2010年
- 目的建立测定血清甲氨蝶呤(MTX)浓度的高效液相色谱(HPLC)法,并与荧光偏振法(FPIA)作比较,评价其临床实用性。方法血清样本经20%高氯酸沉淀蛋白质,吸取上清液进行HPLC分析。以MTX标准品外标法建立标准曲线,检测62例用药后患者血清MTX浓度,同时以FPIA测定。结果 HPLC法在0.049~25 ng/L内线性关系良好,日内及日间相对标准偏差(RSD)均〈6%,最低检测浓度为0.025 ng/L。HPLC法和FPIA具有良好的相关性(r=0.973,P〈0.01),2种方法测定值的差异无统计学意义(P=0.705)。结论 HPLC法具有便捷、准确、成本低等特点,与FPIA相关性良好,适用于临床MTX的血药浓度监测。
- 许耘川袁向亮沈立松
- 关键词:甲氨蝶呤高效液相色谱法治疗药物浓度监测
- 手足口病患者咽拭子中EV71的分离与鉴定
- Objective:探讨手足口病病原体EV71的分离与鉴定方法.Methods:采集患儿的咽拭子标本接种于人横纹肌肉瘤细胞(RD细胞),通过病毒致细胞病变效应(CPE)分析EV71的分离效果,分别利用荧光定量聚合酶链反应...
- 许耘川朱勇喆王娟娟
- 关键词:手足口病肠道病毒71型病毒分离基因型
- 1株肠道病毒71型毒株的分离与鉴定被引量:2
- 2018年
- 目的探讨手足口病病原体肠道病毒71型(EV71)的分离与鉴定方法。方法采集手足口病疑似病例的咽拭子标本1份接种于人横纹肌肉瘤细胞(rhabdomyosarcoma cell,RD细胞),通过观察病毒的细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE)来分析EV71的分离效果。分别利用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹分析(Western Blotting)方法来鉴定EV71病毒特异性核酸和蛋白。扩增EV71VP1区全长基因,对其序列进行同源性比较及遗传进化分析。结果手足口病疑似病例咽拭子标本接种RD细胞传代至第2代后出现CPE。RT-PCR和Western Blotting检测结果均显示,感染组RD细胞中有EV71病毒特异性条带,暂命名为EV71分离株2016SHYP001。序列分析结果显示,2016SHYP001株病毒的VP1区核苷酸与C型代表株的同源性较高,为93.1%~98.3%;其中与C4a亚型代表株的同源性最高,为98.3%。进化树分析发现本地流行株与深圳地区流行株的亲缘较近。结论成功分离出一株新的EV71病毒株2016SHYP001,其株型为C4a亚型。
- 许耘川朱勇喆王娟娟
- 关键词:手足口病肠道病毒71型病毒分离基因型
- 结直肠癌组织高表达IL-35对Th1和Th17可塑性的作用
- 2024年
- 目的 探讨结直肠癌组织中高表达的抑制性细胞因子白细胞介素(IL)-35对辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞17(Th17)可塑性的作用。方法 选取2019年3月—2020年2月上海交通大学医学院附属新华医院结直肠癌患者90例(结直肠癌组)和健康体检者28名(正常对照组)。采用流式细胞术检测结直肠癌组和正常对照组外周血Th1百分比(Th1%)和Th17百分比(Th17%)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析γ-干扰素(IFN-γ)和IL-17A高表达对结直肠癌患者总生存期和预后不良的影响。采用免疫组化法检测结直肠癌患者癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘≥2 cm)中IL-35的表达。采用酶联免疫吸附试验检测结直肠癌患者和正常对照者血清IL-35水平。采用体外诱导Th1分化实验观察IL-35对Th1分泌IL-17A和IFN-γ的影响。结果与正常对照组比较,结直肠癌组Th1%显著降低(P=0.019),Th17%显著升高(P<0.001)。结直肠癌组Th1%与Th17%的r2值(0.393 4)与正常对照组(0.041 0)比较差异有统计学意义(P=0.007)。基于KaplanMeierPlotter数据库的分析结果显示,IFN-γmRNA低表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素[风险比(HR)=0.74,95%可信区间(CI)为0.58~0.94,P=0.013],IL-17A mRNA高表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素(HR=1.26,95%CI为1.02~1.59,P=0.020)。结直肠癌患者癌组织IL-35表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。Ⅰ~Ⅱ期(早期)和Ⅲ~Ⅳ期(晚期)结直肠癌患者血清IL-35水平均显著高于正常对照者(P<0.05)。体外诱导Th1分化实验结果显示,IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。结论 结直肠癌患者外周血Th1和Th17呈异常变化,且IL-35表达增加。高表达的IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。
- 许耘川皇甫昱婵马妍慧
- 关键词:结直肠癌辅助性T细胞17
- LC-MS/MS 法定量检测肌酐校正后尿肌氨酸的方法建立及评估被引量:2
- 2015年
- 目的:建立液相色谱串联质谱( LC-MS/MS)方法测定肌酐校正后尿肌氨酸的含量,用于前列腺癌的诊断和治疗。方法方法学建立及评价。2014年5月至10月上海交通大学医学院附属新华医院采集36例前列腺癌患者、15例良性前列腺增生患者和76例健康体检者的随机尿各5 ml,以[2 H3]-肌氨酸作为同位素内标,使用丹磺酰氯对肌氨酸进行柱前衍生,应用LC-MS/MS技术同时测定肌氨酸和肌酐含量。评价该方法的线性、最低检出限、精密度和回收率,并与酶法比较一致性。结果使用LC-MS/MS法检测尿肌氨酸特异性高,与同分异构体完全分离亦未见明显干扰因素。肌氨酸线性方程为Y=2.0456X+0.0689,R2=0.994;检测限(LOD)为8 ng/ml,定量限(LOQ)为25 ng/ml;批内和批间变异系数( CV)<6%;回收率范围96.8%~105.1%;LC-MS/MS法与酶法结果具有相关性,R2=0.815,P<0.01,平均偏差为-37.1%。结论成功建立LC-MS/MS测定尿液肌氨酸方法,该方法具有良好的特异性、灵敏度和可重复性,有望在前列腺癌的早期诊断研究中提供可靠的技术平台。(中华检验医学杂志,2015,38:321-324)
- 许耘川马妍慧张良沈立松
- 关键词:串联质谱法前列腺肿瘤