蔡彦宁 作品数:93 被引量:132 H指数:6 供职机构: 首都医科大学宣武医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 北京市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
时钟基因在胚胎干细胞分化为神经元过程中的表达特征 被引量:2 2007年 目的检测小鼠胚胎干细胞(ES)体外向神经元诱导分化过程中,7种重要时钟基因的表达情况。方法小鼠胚胎十细胞(ES),经过5个阶段诱导分化为神经元。各阶段细胞的总 RNA反转录为 cDNA,利用7种时钟基因的特异引物进行 PCR 反应,以明确其随分化表达的情况。结果各个时钟基因无非特异扩增,BMAL1、CLOCK、CRY1和 CRY2、PER1、PER3基因在各个分化阶段中都表达,而 PER2基因只在终末阶段被检测到。结论时钟基因的转录在 ES 细胞向神经元分化的过程中并不一致,提示在成体动物存在的时钟基因环路,在 ES 细胞向神经元分化过程中还没有建立。PER2 仅在分化终末期——大量停止分裂的神经元和胶质细胞出现的时期才转录,提示其可能在细胞增殖过程中发挥某种作用。 谢淑 蔡彦宁 关云谦 武文琪 徐艳玲 张愚 陈彪关键词:胚胎干细胞 细胞分化 神经元 节律基因 衰老小鼠不同组织八种时钟基因启动子甲基化修饰的特异性改变 目的 动物几乎所有组织都存在生物钟.随着动物的衰老,其生物钟往往也发生着改变,它对衰老及与衰老相关的病理过程的影响也越来越引起研究者的重视.时钟基因DNA 启动子甲基化是基因表达调控中常见而重要的机制,参与老化及相关疾病... 陆璐 林庆玲 孙芳玲 李雅莉 蔡彦宁 李林 张兰关键词:抗衰老药物 药理活性 时钟基因 院级临床信息和生物资源样本库的建设与管理 被引量:5 2015年 临床信息和生物资源样本库是临床研究和基础研究的宝贵资源,也是转化医学研究的基石。近年来,随着世界范围内转化医学热潮的兴起,包括临床信息和生物资源样本库在内的各类生物样本库的建设也越来越受到重视。笔者结合首都医科大学宣武医院建立临床信息和生物资源样本库过程中的经验和教训,总结样本库建设的重点、难点以及管理中的体会,希望对综合医院生物样本库建设者有所帮助。 杨静芳 梁阔 蔡彦宁关键词:生物样本库 帕金森病患者外周血白细胞中时钟基因Bmal1和Bma12的表达 研究帕金森病患者时钟基因的表达,探讨帕金森病的分子时钟机制。实验对象为17例帕金森病(PD)患者(9例男性,8例女性)和16例正常人对照(9例男性,7例女性),分别在21:00、00:00、06:00和09:00四个时间... 张燕莉 林庆玲 蔡彦宁 袁艳鹏 左晓虹 陈彪关键词:BMAL1 昼夜节律 白细胞 帕金森病 文献传递 小鼠α-synuclein基因内含子1甲基化定量检测方法的建立及不同脑区甲基化水平的比较研究 2014年 目的建立一种定量检测小鼠α-突触核蛋白基因(α-syn)内含子1甲基化水平的方法,分析不同脑区该区域甲基化水平的差异。方法使用MSPPrimer确定小鼠α-syn内含子1的CpG岛区域。使用PyroMark assay design 2.0针对该CpG岛设计焦磷酸扩增及测序引物。采用焦磷酸测序法分析成年小鼠海马、皮质、纹状体及中脑四个脑区该区域甲基化水平。结果小鼠α-syn内含子1存在CpG岛。成功优化定量该CpG岛甲基化水平的焦磷酸测序方法。焦磷酸测序表明各脑区该区域甲基化均低于2%。结论建立了定量检测小鼠α-syn基因内含子1CpG岛甲基化水平的方法。该CpG岛甲基化对于成年小鼠各脑区中α-syn的表达不起主要调控作用。 陆璐 张兰 王丹慧 蔡彦宁关键词:Α-突触核蛋白 焦磷酸测序 小鼠 人类外周血hPer1基因节律性表达的研究 被引量:1 2006年 目的生物节律广泛存在于人类生活和工作中,为研究正常人节律基因表达特点,定量检测正常年轻人外周血中节律基因Per1(humanPeriod1,hPer1)的表达。方法实验对象为7名大学生(H1-H7),年龄24 ̄30岁,男性3名,女性4名。其中H7于实验前1天晚上值夜班。分别在09:00,15:00,21:00,03:00,09:00点抽取肘静脉血6mL,抽提全血总RNA。应用竞争性RT-PCR方法定量检测实验对象外周血中每人每个时间点hPer1基因的表达。结果人类外周血中hPer1基因的表达有显著节律性。表达高峰在09:00而低峰在21:00,两者之间的差异达2.29±0.9倍(P<0.01),第2天09:00hPer1基因表达水平又回到最高峰。结论hPer1基因的表达在外周血中存在节律性。 刘姝 陈彪 蔡彦宁 温玫 左晓虹关键词:生物节律 人类外周血 节律性 基因表达水平 节律基因 C57小鼠肝、肾、脾、胸腺组织时钟基因的表达特点 被引量:6 2007年 目的探测不同脏器组织中时钟基因的表达水平及其波动性。方法用实时荧光定量PCR方法检测C57小鼠肝、肾、脾和胸腺中4种重要时钟基因mBMAL1、mPER1、mCRY1和mCRY2的表达。结果肝和肾中4种时钟基因的表达水平均有显著波动(P<0.01);而脾中仅mBMAL1、mPER1、mCRY1的节律性表达明显(P<0.01,P<0.001,P<0.05),并且波动振幅较为平和;胸腺中4种时钟基因的表达均不具备昼夜波动的特征,同时表达水平也与其他3种组织存在显著差异(P<0.01)。时钟基因所构成的环路在不同组织中也不尽相同,mPER1的负反馈效应在肝中较为主要,mCRY1和mCRY2的负反馈效应在肾和脾中较为主要。结论不同周围组织的分子时钟存在着显著的差异,其相关正负反馈元件和环路有待进一步研究阐明。 刘姝 蔡彦宁 谢淑 关云谦 陈彪关键词:昼夜节律 时钟基因 实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR微卫星分析技术检测少突胶质细胞肿瘤染色体1p/19q杂合性缺失 目的:研究少突胶质细胞肿瘤染色体1p/19q杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)情况。方法:采用实时荧光定量PCR微卫星分析技术(QuMA)对28例少突胶质细胞肿瘤进行染色体1p/19qLO... 张淑坤 卢德宏 朴月善 蔡彦宁 徐庆中关键词:少突胶质细胞肿瘤 文献传递 利用荧光定量聚合酶链反应检测小鼠纹状体中Per1基因的表达规律 被引量:3 2006年 目的建立定量检测Per1 mRNA表达水平的系统,并检测小鼠纹状体中该基因的表达规律。方法提取小鼠纹状体总RNA,用Per1基因特异性引物进行聚合酶链反应(PCR),以荧光染料SYBR green I法进行实时检测。结果确定了Per1基因荧光定量的扩增和检测参数。证明在此条件下无非特异扩增,并且扩增效率在90%以上。利用此检测体系发现小鼠纹状体内Per1基因的表达呈节律性波动。结论所建立的方法能够定量测定Per1 mRNA表达水平,具有灵敏度高,线性范围广的特点。纹状体中Per1基因表达的节律性波动提示黑质纹状体系统间的相互调节可能具有昼夜节律性差异。 蔡彦宁 左晓虹 刘姝 谢淑 温玫 陈彪关键词:PERL SYBR 纹状体 MPTP对C57小鼠纹状体DA释放节律的影响 被引量:1 2006年 目的观察MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)对C57BL/6J小鼠纹状体DA(多巴胺)、5-HT(5-羟色胺)等神经递质的释放节律性的影响。方法取120只SPF级C57BL/6 J小鼠,随机分为2组:MPTP组连续5 d腹腔注射MPTP-HCl 36mg/(kg.d),对照组注射生理盐水300μL。5 d后24 h内分6个时间点:ZT0、ZT4、ZT8、ZT12、ZT16、ZT20,取纹状体,用HPLC-ECD法检测各时间点2组纹状体中DA、5-HT的水平。结果MPTP组纹状体DA水平明显降低(P<0.05);对照组DA高峰出现在ZT0(即8:30 am),低谷在ZT16(即1:30 am),MPTP组DA的高峰和低谷出现的时相未发生改变。2组5-HT均无明显节律性释放。结论小鼠纹状体的DA水平呈节律性变化,5-HT无节律性变化,MPTP作用后对DA的节律性变化无影响。表明此模型纹状体DA的减少与DA释放节律性之间不存在必然联系。 左晓虹 陈彪 蔡彦宁 吴燕川 刘姝 谢淑 温玫关键词:MPTP 多巴胺 昼夜节律