蒲若蕾 作品数:20 被引量:65 H指数:5 供职机构: 第四军医大学西京医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 陕西省自然科学基金 陕西省卫生厅科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
人胎盘脱氢表雄酮的免疫组织化学研究 被引量:1 2000年 目的 观察脱氢表雄酮 (DHEA)在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。 方法 用免疫组织化学及定量方法。 结果 人胎盘两层滋养层细胞和基质细胞均呈 DHEA免疫反应性 ,反应物质分布于胞质 ,胞核无免疫反应。在人胎盘绒毛的不同发育阶段中 ,DHEA的相对含量随周龄的增加而增加。 结论 DHEA对胚胎及胎盘的发育可能具有重要的调节功能。 蒲若蕾 孙岚 黄威权 吕葆真关键词:脱氢表雄酮 免疫组织化学 胎盘 大鼠胃壁细胞GnRH受体的定位及GnRH类似物对壁细胞内钙的影响 被引量:6 2003年 目的 观察促性腺激素释放激素 (gonadotropin releasinghormone,GnRH)受体在培养的大鼠胃粘膜壁细胞中的定位 ,并探讨GnRH类似物阿拉瑞林 (alarelin)对壁细胞内游离钙动员的机制。 方法 采用免疫组织化学和原位杂交技术 ;应用Ca2 + 指示剂Fluo 3 AM作为细胞内钙离子的荧光探针 ,对负载培养的胃壁细胞 ,应用激光共聚焦显微镜技术检测单个细胞内钙荧光强度的变化。 结果 大鼠胃壁细胞呈GnRH受体免疫反应阳性 ,阳性物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;同样壁细胞内可检测到GnRH受体mRNA杂交信号 ,阳性物质位于细胞质 ,细胞核为阴性 ;胞内Ca2 + 浓度变化为 :1 在Hank液中 ,GnRH类似物浓度为 10 - 8、10 - 7、10 - 6 mol L时 ,胃壁细胞内Ca2 + 浓度逐渐升高 ,其峰高 (峰值减去静息值 )分别为 7 1± 1 4、12 1± 1 7、16 8± 2 2。其达峰时间也逐渐增快 ,分别为 34 2± 6 4s、18 9± 1 2s、10 4± 2 3s。相邻两组间其峰高及达峰时间均存在显著性差异 (P <0 0 5 ) ,且呈明显剂量依赖性。 2 在D Hank液 (去除外钙 )中 ,阿拉瑞林可轻度短暂升高胞内Ca2 + ;用内罗啶孵育后再加入阿拉瑞林也可轻度短暂升高胞内Ca2 + ,二者无显著性差异。 3 当用拉西地平孵育后再加入阿拉瑞林 ,可明显抑制胞内Ca2 + 的增加? 陈蕾 黄威权 孙绪德 吕宝真 蒲若蕾关键词:GNRH类似物 GNRH受体 胃壁细胞 原位杂交 激光共聚焦显微镜 人胎盘蜕膜细胞5-羟色胺及其受体的免疫组织化学及原位杂交研究 被引量:2 2000年 目的 观察 5 -羟色胺 (5 - HT)及其受体在人胎盘的定位及其含量的周龄变化。 方法 采用免疫组织化学、原位杂交及图像分析技术。 结果 人胎盘蜕膜细胞呈 5 - HT及其受体免疫反应性 ,两种阳性反应物质均分布于胞质 ,胞核为阴性。蜕膜细胞同样含有 5 - HT1 A受体 m RNA杂交信号。蜕膜细胞 5 - HT及其受体免疫反应产物的相对含量随妊娠周龄的增加而增加。 结论 人胎盘蜕膜细胞既能产生 5 - HT,又能表达 5 - HT受体。说明 5 -HT对蜕膜细胞可能具有自调节作用。 蒲若蕾 黄威权 姚兵 孙岚关键词:5-HT 5-HT受体 蜕膜细胞 原位杂交 胎盘 游离脂肪酸诱导的胰岛βTC3细胞缺陷与线粒体功能改变的相关性研究 2007年 目的通过研究游离脂肪酸(FFA)慢性作用对胰岛细胞解偶联蛋白2(UCP2)mRNA和蛋白表达以及线粒体膜电位的影响,探讨FFA损害胰岛功能的机制。方法将不同浓度油酸作用于胰岛βTC3细胞72h,分别分析基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量(GSIS),线粒体膜电位,ATP敏感钾电流(IKATP)、UCP2mRNA和蛋白表达;再用油酸和PPARγ配体罗格列酮共同作用,观察UCP2mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,油酸明显增加2·8mmol/L葡萄糖时的基础胰岛素分泌量,减少16·7mmol/L葡萄糖时的GSIS(P均<0·01),并且呈剂量依赖性。油酸可明显降低线粒体膜电位平均荧光强度(MIF)值,使IKATP外流增加,增加UCP2mRNA和蛋白表达(P均<0·01),呈剂量依赖性;与油酸组相比,油酸+罗格列酮组增加了UCP2mRNA和蛋白表达(P<0·01)。结论在胰岛βTC3细胞中,FFA对胰岛功能的损害与线粒体功能改变有关。FFA可能通过上调PPARγ增加UCP2表达,UCP2的表达与作用增加可导致线粒体膜电位降低,使线粒体功能下降,引起胰岛素分泌减少,产生对胰岛功能的损害作用。 宋白利 姬秋和 孙珲 蒲若蕾 张荣庆 刘新平 药立波关键词:膜电位 解偶联蛋白2 胰岛素分泌细胞 培养的大鼠胃平滑肌细胞GnRH受体的免疫组织化学及原位杂交研究 被引量:5 2002年 目的 观察培养的大鼠胃平滑肌细胞中是否能表达GnRH受体 ,为进一步研究GnRH对胃平滑肌细胞的功能提供形态学依据。 方法 采用免疫组织化学SABC和原位杂交方法。 结果 培养的大鼠胃平滑肌细胞呈GnRH受体免疫反应阳性 ,阳性物质分布于细胞浆和细胞膜上 ,细胞核呈阴性反应。培养的胃平滑肌细胞同样含有GnRH受体mRNA杂交信号 ,信号物质亦分布于细胞浆内 ,细胞核呈阴性反应。 结论 胃平滑肌细胞能自身表达GnRH受体 。 陈蕾 黄威权 刘丽宏 吕宝真 蒲若蕾关键词:GNRH受体 免疫细胞化学 原位杂交 胃平滑肌细胞 动物实验 对罗格列酮联合胰岛素治疗2型糖尿病的评价 被引量:1 2005年 目的:观察罗格列酮对2型糖尿病(type 2diabetesmellitus ,T2DM)患者胰岛素治疗时的胰岛素用量,及其对血清尿酸水平、白细胞计数的影响。方法:磺脲类药物继发失效的T2DM患者80例,分为罗格列酮联合胰岛素治疗组(A组)和单纯胰岛素治疗组(B组)。观察两组治疗前后空腹血糖、餐后2h血糖、血尿酸水平、白细胞计数,及治疗12周后全天胰岛素用量。结果:A组和B组能同样有效地降低血糖,但A组胰岛素用量低于B组(2 2 .9±5 .3)U比(2 6 .4±6 .8)U ,P <0 .0 5 ,治疗后A组尿酸水平显著下降,由治疗前的(2 71.4±10 7.2 ) μmol/L降为(2 2 3.1±78.5 ) μmol/L ,P <0 .0 5 ,同时其白细胞计数的对数值亦显著降低(9.6 3±0 .0 9)比(9.72±0 .13) ,P <0 .0 1。结论:罗格列酮能减少T2DM患者胰岛素治疗时胰岛素用量,同时降低其血清尿酸水平和白细胞计数;提示罗格列酮在减少T2DM患者胰岛素使用量的同时,对体内炎性反应有一定的改善作用。 王莉 张南雁 孙会会 蒲若蕾 赵魁彦 陈非 胡绍文 姬秋和关键词:2型糖尿病 罗格列酮 尿酸 5-HT受体亚型在大鼠颌下腺的免疫组织化学定位及5-HT的功能研究 被引量:6 2002年 目的 研究探讨了大鼠颌下腺中 5 羟色胺受体亚型的分布以及 5 HT功能。方法 免疫组织化学法和免疫酶联检测法。结果 大鼠颌下腺的浆液性腺泡上皮细胞、闰管、颗粒曲管、纹状管和排泄管的管壁上皮细胞均呈 5 HT1AR和 5 HT3 R免疫反应阳性 ,阳性物质位于胞质中 ,胞核为阴性。ELISA结果显示 ,在一定浓度范围内 ,外源 5 HT能刺激离体培养的颌下腺分泌神经生长因子 (NGF) ,但是 ,当外源 5 HT浓度大于 10 7时却抑制NGF的分泌。结论 提示 5 HT对颌下腺NGF的分泌可能起双向调节的作用。 吕葆真 黄威权 蒲若蕾关键词:颌下腺 免疫组织化学定位 促性腺激素释放激素对大鼠胰腺细胞内cAMP含量的影响 2008年 目的:通过观察GnRH类似物(GnRHR激动剂和拮抗剂)对大鼠胰腺细胞内cAMP含量的影响,了解cAMP在GnRHR介导的信号转导通路中的作用.方法:以不同浓度GnRH类似物对原代培养的大鼠胰腺细胞进行刺激,借助放免法测定观察在体外条件下GnRH类似物对大鼠胰腺细胞内cAMP含量的影响.结果:在量效实验中,各浓度GnRHR激动剂均能使细胞内cAMP含量增加,其中10^-8~10^-5mol/L中4个浓度组最为明显,与对照组相比有非常显著差异(P〈0.01).应用GnRHR拮抗剂(10^-6mol/L)后明显抑制了激动剂组增高cAMP含量的作用,其cAMP水平与对照组比较没有显著差异(P〉0.05).在时效实验中,应用10^-7mol/LGn-RHR激动剂刺激细胞,从10min起细胞内cAMP含量即开始增多,到1h达到峰值,以后逐渐下降,8h后恢复到原水平.结论:由以上结果推测cAMP可能是GnRHR介导的信号转导通路中的信号分子之一. 曹宏伟 蒲若蕾 黄威权 姚兵 陈蕾 张荣庆 姬秋和关键词:胰腺 促性腺激素释放激素受体 环磷酸腺苷 油酸对βTC3细胞PTEN mRNA表达的影响 被引量:5 2007年 研究油酸慢性作用对βTC3细胞PTEN(phosphotase and tensin homology deleted on chromosme ten)mRNA表达的影响,结果显示油酸增加PTEN的表达,使ATP敏感性K^+通道开放,这可能是高脂损害胰岛功能的机制之一。 宋白利 蒲若蕾 孙珲 张荣庆 刘新平 药立波 赖敬波 姬秋和关键词:油酸 PTEN ΒTC3细胞 胰岛素分泌 钾通道 大鼠消化道促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交研究 被引量:13 2000年 目的 探讨大鼠消化道是否存在 Gn RH受体 m RNA及其定位。 方法 用原位杂交组织化学法。 结果 胃底腺壁细胞、胃小凹上皮细胞可检测到较强的 Gn RH受体 m RNA杂交信号。3段小肠绒毛上皮细胞、小肠腺细胞可检测到较强的 Gn RH受体 m RNA杂交信号。盲肠、结肠和直肠的粘膜上皮细胞、肠腺上皮细胞也能检测到 Gn RH受体 m RNA杂交信号。信号物质均分布在胞质内 ,胞核呈阴性。 结论 大鼠消化道能合成 Gn RH受体。Gn RH也是一种胃肠激素 ,它由消化系统自身合成 。 姚兵 黄威权 蒲若蕾 孙岚 张荣庆 王雷关键词:GNRH受体 MRNA 原位杂交 消化道