董娟
- 作品数:35 被引量:87H指数:6
- 供职机构:中国科学院成都生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金四川省科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>
- 菜豆重金属响应基因PvSR2在烟草中的表达及镉抗性分析被引量:8
- 2003年
- 重金属特异诱导基因PvSR2(Phaseolus vulgaris stress-related)是从法国菜豆中克隆出来的,为了研究该蛋白能否提高植物的抗重金属能力,将PvSR2基因插入到植物转化中间载体pCAMBIA2301中CaMV 35S启动子的下游,用根癌农杆菌介导的叶盘法将其导入烟草中,在含有100mg/L Kan的MS培养基上筛选,获得了转基因植株。PCR和Southern杂交结果表明PvSR2已整合在烟草基因组中,GUS和Northern分析表明PvSR2在转基因烟草中获得表达。重金属抗性实验表明:与野生型烟草相比,PvSR2转基因烟草具有较高的抗重金属镉(Cd)的能力。组织Cd含量分析显示:在低浓度Cd(0.5~0.75mmol/L)处理时,Cd在PvSR2转基因烟草与野生型烟草根中的累积量没有明显的差别,而在高浓度Cd(0.1mmol/L)胁迫下,转基因烟草根中Cd的累积量低于野生型烟草,说明PvSR2的表达能够提高植物的抗重金属能力,同时表明PvSR2可能与重金属在植物中的运输和积累有一定关系。
- 柴团耀陈琼张玉秀董娟安成才
- 关键词:菜豆烟草基因表达重金属污染
- 氮磷胁迫下藻-菌群落的变化研究被引量:11
- 2012年
- 近年来,由于水体富营养化而导致的蓝藻水华在我国太湖与滇池等淡水湖泊频繁爆发,已成为严重的环境问题,而氮、磷则是引起水体富营养化的重要营养因子。文章通过藻细胞计数、细菌群落的DGGE监测,以及典型对应CCA分析,系统研究了不同的氮磷浓度、N/P比对藻-菌群落结构的影响及其相互关系。结果表明,氮磷浓度和N/P比均会影响藻类生长,其中,氮磷浓度较N/P比对藻类生物量的影响更大;N/P=12为藻类生长的最适条件,氮限制(N/P=3)和磷限制(N/P=48)均会抑制藻类生长;添加外源氮磷可促进细菌的生长,提高其多样性,但随着N/P比的提高,其种群多样性呈逐渐下降趋势;细菌群落主要由β-proteobacteria类细菌组成,其次是α-proteobacteria,然后是Bacteroidetes和γ-proteobacteria。与氮、磷营养盐相比,藻类群落对细菌群落的影响更大。
- 董娟李大平陶勇何晓红张雅舒
- 关键词:氮磷蓝藻绿藻细菌群落多样性
- 基于环介导等温扩增法可视化检测玉米转基因成分被引量:3
- 2019年
- 快速准确的转基因检测技术是严格监管转基因作物及其产品的重要支撑;不同转基因作物由于导入不同外源目的基因从而表现出不同性状,因此外源目的基因序列可作为基于核酸检测技术进行转基因筛选的标志物.基于环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,以中性红染料作为比色试剂,建立玉米内源基因和玉米转基因成分的基因特异性的可视化快速检测方法.针对玉米内源基因IVR基因,抗虫外源bar、pat基因,和Bt176中的抗除草剂外源cry1Ab基因分别设计了LAMP引物.结果表明,在Real-time LAMP体系下,能够实现对玉米内源IVR基因、转基因玉米品系Bt176中的bar基因和转基因玉米品系TC1507和59122中的pat基因的检测.对转基因玉米品系Bt176中的cry1Ab基因设计的引物能特异性扩增Bt176,而对Bt11和MON810两种转基因玉米品系无效.通过优化Tris-HCl和中性红浓度,在5 mmol/L Tris-HCl和100μmol/L中性红浓度条件下建立了可视化检测体系,反应1 h即可分别实现对玉米内源基因IVR基因,抗虫外源bar、pat基因,和抗除草剂外源cry1Ab基因的检测.中性红可视化检测结果与Real-time LAMP荧光扩增曲线结果一致,体现了该可视化检测方法具有较高的准确性.本研究建立了一种对玉米转基因相关成分的可视化检测体系,该方法既快速又简便且尤其适用于现场检测.(图6表1参17).
- 王嘉钰董娟唐卓
- 关键词:环介导等温扩增转基因基因特异性
- 一种体内筛选的剪切RNA的锤头状核酶
- 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及一种体内筛选核酶的新方法,以及通过该方法筛选得到的具有催化RNA剪切活性的核酶。该体内筛选方法以毒蛋白ibsC为报告基因,通过体内转录得到的核酶对ibsC对应的mRNA的剪切作用控制...
- 唐卓黄鑫董娟
- 文献传递
- 基于核酸适配体的蛋白靶向降解工具用于EGFR的降解
- 2024年
- 目前基于核酸的蛋白质水解-靶向嵌合体(PROTAC)为降解一些不可成药的靶标提供了强有力的工具.我们报告过基于核酸适配体的PROTAC作为一种拓宽靶标的降解工具,目标蛋白RNA适配体作为靶向降解弹头,异双功能分子Dth可以将E3泛素连接酶招募到基因编码的适体RNA支架上,促进靶蛋白的泛素化并将其降解.通过将膜蛋白表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的适配体在RNA支架上表达,小分子Dth适当浓度作用下,实现了对EGFR的选择性降解,将此工具的靶标扩展到膜蛋白.另外,通过在RNA支架上共同表达EGFR和p50的适配体,小分子Dth适当浓度作用下,实现了同时对p50和EGFR的降解.本研究基于核酸适配体的PROTAC降解工具提供了一个通用平台,可用于后续生化研究和潜在的疾病治疗.(图4表1参25)
- 许燕袁奕杜凤董娟崔欣王启卫唐卓
- 关键词:核酸适配体表皮生长因子受体
- 核黄素及其衍生物作为癌症治疗靶向药物及其应用
- 本发明涉及药物先导领域。首先公开了核黄素及其衍生物特异性引发DNA单链断裂的应用,核黄素及其衍生物能够特异性识别双链DNA中的G‑T错配并在光照条件下引发DNA单链的位点特异性断裂;再者公开了核黄素及其衍生物作为癌症治疗...
- 唐卓袁奕董娟
- 文献传递
- 一种PCR终点可视化检测核酸的方法
- 本发明涉及一种基于硫磺素T和G‑四链体的不开盖就能实现现场可视化快速检测的PCR终点核酸检测方法。该方法可以准确检测核酸,特异性和灵敏度高、适用性广、检出限低,且不易污染。PCR完成后用实时蓝光观测仪进行肉眼观察,就能直...
- 唐卓杜凤何密鼓董娟黄鑫丁盛
- 文献传递
- 基于重组酶的环介导扩增方法
- 本发明属于分子生物学技术领域,提供一种基于重组酶和单对引物的环介导扩增哑铃状结构形成方法及由此形成的新的核酸环介导扩增的方法(RALA)。本发明仅依赖重组酶和单对引物即可实现环介导扩增哑铃状结构的形成,具体为利用重组酶和...
- 唐卓陈刚毅董娟
- 文献传递
- 环状RNA快检方法的建立及在鼻咽癌检测中的应用
- 2023年
- 环状RNA(circRNA)作为一种潜在的肿瘤标志物,其检测对肿瘤的早期筛查和诊断具有重要意义.为了研究和开发circRNA快检方法,建立circRNA的逆转录实时荧光定量超快速聚合酶链式反应(RT-qVPCR)检测方法,并应用到鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的相关检测中.基于超快速聚合酶链式反应(VPCR)技术,设计针对hsa-circ-0000284(circHIPK3)的引物和探针,通过优化退火温度、引物和探针浓度等条件,建立一种circRNA的快检方法;以内参基因GAPDH为对照,建立hsa-circ-0000284的相对定量方法;进一步收集鼻咽癌患者和鼻咽部良性病变患者的组织样本,对鼻咽癌和良性增生组织中的hsa-circ-0000284进行相对定量检测.所建立的circRNA RT-qVPCR快检方法只需25 min就能完成检测,重复性好,结果稳定可靠;hsa-circ-0000284在鼻咽癌中的相对表达量为9.67,在良性组织中的表达量为3.75,差异有统计学意义(F=16.3805,P<0.001).本研究表明所建立的circRNA RT-qVPCR快检方法较传统PCR核酸扩增的时间明显缩短;hsa-circ-0000284在鼻咽癌组织中的表达水平明显上升,有望成为鼻咽癌肿瘤标志物.
- 何陈彧董娟丁盛杜凤徐开伦
- 关键词:鼻咽癌肿瘤标志物PCR
- 基于重组酶的环介导扩增方法
- 本发明属于分子生物学技术领域,提供一种基于重组酶和单对引物的环介导扩增哑铃状结构形成方法及由此形成的新的核酸环介导扩增的方法(RALA)。本发明仅依赖重组酶和单对引物即可实现环介导扩增哑铃状结构的形成,具体为利用重组酶和...
- 唐卓陈刚毅董娟
- 文献传递