范丹丹
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
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- 两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒全基因组序列分析被引量：5
- 2015年
- 为了找到H9N2亚型禽流感病毒毒株致病力增强的分子线索,对致病力存在明显差异的2株H9N2亚型禽流感病毒进行了全基因组序列测定和分析。遗传进化分析表明,2株H9N2亚型禽流感病毒发生了基因重配,内部基因来源具有多样性。氨基酸序列分析表明,强致病力毒株A/chicken/Shandong/818/2010和A/chicken/Shandong/196/2011在HA受体结合位点、NA唾液酸结合位点和潜在糖基化位点处存在显著差异,SD/818在PA蛋白55位氨基酸和336位氨基酸等重要功能位点处出现了与致病力增强有关的突变,这种致病力增强的分子机制需要进一步探究。
- 刘琳琳张毅郭学金范丹丹朱梅胜王守春徐守振王建琳毕玉海尹燕博
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒致病力全基因遗传进化
- 比格犬α7干扰素成熟肽基因的克隆、原核表达及活性分析
- 本实验通过RT-PCR 的方法从比格犬的脾脏中提取基因组DNA 扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因.将纯化的PCR 产物克隆至PMD19-T 载体,转化入感受态细胞DH5α 中,经PCR 检测及测序鉴定表明,所克隆的目的...
- 潘福星朱梅胜冯培祥王东东范丹丹齐娟王祖荣尹燕博
- 关键词：基因克隆原核表达活性分析
- 2010—2014年山东H9N2亚型禽流感病毒分离鉴定及HA和NA基因序列分析被引量：3
- 2016年
- 旨在了解山东地区H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的流行和遗传变异情况,为该地区H9N2亚型禽流感的防制提供依据。通过鸡胚接种的方法从山东省分离到1 296株H9N2AIV,并选取40株对其进行HA和NA基因的扩增、测序及遗传进化分析。结果显示,2013年H9N2AIV的分离率最高,达42.30%;40株病毒的HA和NA的核苷酸序列同源性及推导的氨基酸相似性均在90%以上;HA裂解位点序列为PSRSSR↓GLF,NA颈部缺失3个氨基酸;HA和NA均存在糖基化位点的缺失和新的糖基化位点出现;大部分毒株发生了易于感染人型受体的突变;演化分析表明40株病毒的HA和NA基因均属于Y280-like亚分支。结果提示,H9N2AIV在山东省各地区普遍流行且在2013年达到高峰,所有毒株均符合低致病性禽流感病毒的分子特征,并且具有结合哺乳动物唾液腺受体的能力,因此应密切关注H9N2病原出现的新变化,制定相应的防控措施。
- 王冬冬张毅侯广宇刘永举刘朔蒋文明李金平于建敏范丹丹陈文雅王守春尹燕博陈继明
- 关键词：H9N2禽流感病毒HANA
- 两株不同致病力的H9N2亚型禽流感病毒的反向遗传拯救
- 近些年来，根据本实验室对临床分离的H9N2毒株研究发现，部分分离株对鸡和鸡胚的致病性显著增强，本试验选取了两株致病力不同但遗传背景较相似的H9N2亚型流感病毒为研究对象，利用反向遗传技术及定点突变技术，旨在发现导致H9N...
- 范丹丹
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型突变位点
- 比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析被引量：1
- 2014年
- 从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干扰素序列(NM001006654)的同源性达到100%。在此基础上构建重组原核表达质粒pET-32a-CaIFN-α7,并转化至表达宿主BL21(DE3)中。该工程菌在37℃经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果在分子质量约38.4ku处出现了目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在。经Bandscan软件分析,表达产物约占菌体总蛋白的48.5%。用Protein Refolding Kit对包涵体进行纯化复性,重组CaIFN-α7在犬肾细胞(MDCK)上具有较高的抗病毒活性。
- 潘福星朱梅胜冯培祥王冬冬范丹丹齐娟王祖荣尹燕博
- 关键词：比格犬克隆原核表达抗病毒活性
- 引起幼貂大量死亡的肺炎克雷伯菌的分离和鉴定被引量：5
- 2015年
- 采用西蒙式枸橼酸盐琼脂培养基从山东威海地区肺出血死亡幼貂的肺脏和肝脏中分离到1株细菌,对所分离的细菌进行形态特征、理化性质、16S rRNA测序鉴定,并对该分离菌进行了药敏试验和人工感染试验。结果显示,该菌16S rRNA序列与GeneBank登录号为CP006648的肺炎克雷伯菌16S rRNA序列同源性为95%,分离菌具有高度的耐药性,对小鼠具有较强致病作用,并可复制出与水貂类似的病理变化,由此推断肺炎克雷伯菌是导致幼貂大量死亡的主要致病菌。
- 李超王玉英王冬冬范丹丹王平纪鸿翔尹燕博
- 关键词：水貂肺炎克雷伯菌
- 两株不同致病力H9N2亚型禽流感病毒反向遗传操作系统的构建被引量：1
- 2016年
- 为研究H9N2亚型禽流感病毒毒株对禽类致病性的分子致病机制,选用A/chicken/Shandong/818/2010和A/chicken/Shandong/196/2011两株致病力存在明显差异的野生型H9N2亚型禽流感病毒,用RT-PCR扩增其全基因组序列,并将其全部克隆于PHW2000双向转录/表达载体。经测序验证后,将其转入293T细胞,并拯救出2株具有血凝活性的毒株。对拯救毒株进行全基因组测序验证后,结果表明拯救出的毒株与2株野生型病毒的核苷酸序列完全一致;体外试验证明,拯救毒株与野生毒株在鸡胚和细胞中的复制能力一致;动物试验证明,拯救毒株保持了野生型毒株对鸡和鸡胚的致病力。这两套反向遗传操作系统的构建,研究了病毒变异规律,发现了可能导致H9N2亚型禽流感病毒增强的关键氨基酸位点,为流感的监测及预防提供依据。
- 范丹丹张毅刘琳琳王冬冬王建琳徐守振毕玉海尹燕博
- 关键词：H9N2亚型禽流感病毒感染性克隆
