臧磊
- 作品数:10 被引量:13H指数:2
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- 发文基金:国家自然科学基金江苏省教委自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 家蚕基因工程表达系统的病原体检测
- 1999年
- 家蚕基因工程表达系统(BmNPV)是在真核生物整体水平进行的外源基因表达系统,必须对其安全性进行研究,以确保该表达系统及其产品对人的安全。本室工作人员用PCR扩增技术及细菌培养方法对家蚕的多种成份进行了人类常见病原菌及病毒和支原体的检测,结果表明,家蚕的多种成分未分离到常见的病原菌、病毒等其它病原体。除EB、HPV病毒PCR检测样本有一区带出现外,其余都为阴性。
- 臧磊李卫党许化溪李良菊王胜军夏圣马斌刘恭植何家绿季平肖庆利
- 关键词:PCR家蚕基因工程病原体
- 家蚕核型多角体病毒蛋白组份检测方法建立
- 1999年
- 研制了兔抗家蚕核型多角体病毒蛋白组份的多克隆抗体,用间接法建立了家蚕核型多角体病毒蛋白的dot-ELISA检测方法。此法检测多角体病毒蛋白的灵敏度达10ng,与人血清和兔血清无交叉反应,可用于家蚕生物反应器生产的目的蛋白中多角体病毒蛋白组份的检测。
- 李卫党李良菊许化溪臧磊刘恭植季平何家禄
- 关键词:ELISA家蚕核型多角体病抗体
- Dot-ELISA法检测家蚕核型多角体病毒蛋白组份方法的建立及应用被引量:2
- 2000年
- 目的建立家蚕核型多角体病毒蛋白的 dot- EL ISA检测方法。方法免疫家兔制备抗蚕核型多角体病毒蛋白组份的多克隆抗体 ,并用 EL ISA间接法建立了检测方法。结果此法与人血清和兔血清无交叉反应 ,可检测微量多角体病毒蛋白 ,其灵敏度达 10 ng,且操作简便。
- 李卫党何家禄许化溪季平李良菊臧磊刘恭植
- 关键词:DOT-ELISA家蚕抗体
- 家蚕基因工程表达系统的安全性研究被引量:3
- 1999年
- 目的 对家蚕基因工程表达系统(Bm NPV)的安全性进行研究,以确保该表达系统及其产品对人的安全。方法 用细菌培养以及PCR扩增技术对家蚕的多种成份进行了人类常见病原体的检测;并将蚕的多种成份采用腹腔注射或经口灌胃给受试动物,进行毒理学的初步试验。结果 家蚕体内的多种成分未分离到常见的病原菌,病毒等其它病原体除EB、HPV 病毒PCR检测样本有一区带出现外,其余都为阴性;蚕的多种成份对所试动物为无毒级,小鼠微核试验阴性,多角体病毒DNA和蛋白生殖毒性试验未见畸形。结论 家蚕体内无人类常见病原体寄生,在EB、HPV 病毒PCR结果中出现的部分区带需进一步的证实;可初步认为家蚕基因工程表达系统本身无毒性。
- 李卫党何家禄许化溪陆荣柱臧磊李良菊段礼荣王胜军马斌刘恭植
- 关键词:基因工程BMNPV安全性家蚕
- 家蚕核型多角体病毒对小鼠的易感性及其蛋白组份的检测被引量:1
- 1999年
- 家蚕核型多角体病毒(Bm-NPV)是一类环状DNA病毒。该病毒作为载体,应用在杆状病毒-昆虫真核生物表达系统。为确定家蚕基因工程表达系统产品对人的安全性,观察了该病毒对哺乳动物细胞株及对小鼠的易感性,建立了检测Bm-NPV蛋白组份的dot-ELISA方法,可用于生物表达器生产的产品中残存多角体病毒组份的检测。结果表明,芽生型多角体病毒(BV)在杂交瘤细胞和HL60细胞中不增殖。不同剂量包埋型多角体病毒(OV)灌胃感染小鼠,小鼠肝、肾组织切片的电镜观察及免疫组化染色未见到病毒颗粒。
- 李良菊李卫党许化溪臧磊刘恭植何家禄季平
- 关键词:易感性DOT-ELISA基因工程
- 家蚕核型多角体病毒对小鼠的感染性研究被引量:2
- 2000年
- 家蚕核型多角体病毒是一类双链闭合环状DNA病毒 ,该病毒被作为载体应用在家蚕生物表达系统 ;为确定该病毒的安全性 ,观察了该病毒对小鼠瘤细胞以及小鼠的感染性 ,结果显示芽生型家蚕核型多角体病毒在人DC杂交瘤细胞株和HL60细胞中无增殖 ;不同剂量的包埋型家蚕核型多角体病毒经口灌胃给小鼠 ,在小鼠肾、肝病理切片及电镜观察中未见病毒颗粒 ,用免疫组化试验检测小鼠肾、肝组织中的多角体病毒也为阴性。
- 李卫党何家禄许化溪季平李良菊肖庆利臧磊马斌王胜军刘恭植
- 关键词:小鼠感染性安全性
- 人源性TPO单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立
- 1998年
- 用人源性TPO(huTPO)皮下免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0实体瘤细胞融合,建立了2株稳定分泌抗TPO单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为19D12和49A5,并对其进行了初步鉴定,采用简易正辛酸法从腹水中纯化单克隆抗体。结果:细胞融合率为82%,杂交瘤细胞染色体数目正常,分泌的抗体为IgG,腹水抗体效价为0.6~1.2×10-5,与EPO、GM-CSF无交叉反应,连续培养生物性状稳定。抗TPO单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立。
- 王胜军许化溪王卉放王卉放黄诒森张鹤云臧磊刘恭植
- 关键词:血小板生成素单克隆抗体杂交瘤
- 人外周血树突状细胞递呈可溶性肿瘤抗原触发抗瘤免疫的体外研究被引量:2
- 1999年
- 考察人外周血树突状细胞(DC)递呈可溶性肿瘤抗原激发抗瘤免疫作用。应用改良Steinm an 法分离纯化人外周血DC,同时将MDA、3AO及Wish 三种瘤细胞制成可溶性肿瘤抗原,将二者于体外共育,分析DC表面标记的改变及某些细胞因子产生的水平,并检测其对肿瘤细胞杀伤作用的影响。结果表明,经可溶性肿瘤抗原刺激的DC分泌IL-12及TNFα水平增加,同时高水平表达CD40 、CD80 等表面分子;与对照组相比,显示不同程度的促杀伤作用并有效地促进特异性淋巴细胞增殖。GM-CSF上调DC的上述作用。
- 许化溪王胜军李娜严俊臧磊马斌邵启祥刘恭植
- 关键词:树突状细胞抗原递呈肿瘤免疫
- 人树突状细胞单克隆抗体的制备及其生物学作用被引量:4
- 1999年
- 研究树突状细胞与免疫相关性疾病发生发展的关系,我们制备出4株人树突状细胞(huDC)单克隆抗体(单抗),并对其特异性及其他生物学特性进行了分析。一、材料与方法1.动物:纯系BALB/C小鼠,8周龄,雌性,由江苏省实验动物中心提供。2.培养基及主要试剂...
- 许化溪王胜军潘志超严俊臧磊马斌邵启祥李娜刘恭植
- 关键词:树突状细胞单克隆抗体生物学
- 家蚕核型多角体病毒蛋白组份检测方法建立
- 研制了兔抗家蚕核型多角体病毒蛋白组份的多克隆抗体,用间接法建立了家蚕核型多角体病毒蛋白的dot-ELISA检测方法。此法检测多角体病毒蛋白的灵敏度达10ng,与人血清和兔血清无交叉反应,可用于家蚕生物反应器生产的目的蛋白...
- 李卫党李良菊许化溪臧磊刘恭植
- 关键词:DOT-ELISA抗体
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