胡祎明
- 作品数:17 被引量:63H指数:5
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- UPLC-MS/MS法检测人尿液中8种苯二氮?药物及其临床应用被引量:3
- 2020年
- 目的建立一种定量检测人尿液中8种常见苯二氮■类药物的方法,并将其应用于临床中毒检测。方法尿液样本经液液萃取后,用液相-串联质谱联用仪测定,色谱柱为BEH C18(2.1 mm×50.0 mm,1.7μm),以含0.01%甲酸乙腈溶液-含0.01%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^-1,电喷雾正离子模式,多反应监测。考察该方法的专属性、标准曲线与定量下限、精密度与提取回收率、基质效应和稳定性。结果硝西泮、地西泮、艾司唑仑、阿普唑仑、氯硝西泮、劳拉西泮、咪达唑仑和三唑仑浓度分别在0.5~1000.0(r=0.992 5)、0.5~1000.0(r=0.991 0)、0.5~1000.0(r=0.991 3)、0.5~1000.0(r=0.998 4)、1.0~1000.0(r=0.996 0)、1.0~1000.0(r=0.997 9)、0.5~1000.0(r=0.990 9)和1.0~1000.0(r=0.992 1)ng·mL^-1内线性关系良好;批内相对标准偏差(RSD)和相对误差(RE)分别为5.07%~19.66%和-9.75%~19.00%,批间RSD和RE分别为5.75%~17.86%和-13.83%~19.00%;提取回收率和基质效应均满足检测要求;在多种储存条件下,处理前后的尿液样本稳定性好。结论该方法简便,专属性高,准确度高,重复性好,可有效检测中毒浓度范围的8种BZDs。本方法成功用于68例临床中毒样本的检测。
- 毕重文杨丽谢栋胡祎明袁恒杰李正翔
- 关键词:尿液液质联用中毒检测
- 2006--2011年60株血感染金黄色葡萄球菌毒素及耐药基因分析被引量:5
- 2013年
- 目的了解2006—2011年临床分离的60株血感染金黄色葡萄球菌的耐药情况及毒素基因和耐药基因的流行情况。方法 VITEK2-compact全自动细菌鉴定仪及配套鉴定卡、药敏卡对细菌进行鉴定及药敏试验;头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA);应用聚合酶链反应(PCR)检测mecA、耐消毒剂基因(qacA)、杀白细胞素基因(pvl)、肠毒素基因(sea、seb、sec1、sed、see)及中毒休克综合征毒素-1基因(tst)。结果 60株金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率最高(91.7%),其次为红霉素(65.0%)、克林霉素(65.0%)、庆大霉素(40.0%)。未发现万古霉素、利奈唑胺、替加环素耐药菌株。其中携带耐药基因mecA13株(21.7%)、qacA3株(5.0%)、检出毒素基因pvl4株(6.7%)、肠毒素基因sea20株(33.3%)、seb3株(5.0%)、sec9株(15.0%)及sed7株(11.7%),未检出see及tst。结论血感染的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素、庆大霉素耐药率高,同时携带多种毒素及耐药基因,临床应加强毒素及耐药基因检测。
- 王立新胡祎明胡志东田彬李静王凤霞杨华
- 关键词:葡萄球菌感染葡萄球菌金黄色细菌毒素类细菌聚合酶链反应
- mCIM和eCIM联合检测产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的应用被引量:6
- 2021年
- 目的探讨改良碳青霉烯灭活试验(modified carbapenem inactivation method,mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(EDTA-modified carbapenem inactivation method,eCIM)检测感染患者分离的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)碳青霉烯酶的方法对诊控CRE感染的应用价值。方法回顾性分析2017年1至12月天津医科大学总医院临床感染患者分离的78株非重复对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科细菌的耐药情况,应用Vitek2 Compact全自动细菌鉴定仪鉴定至种并检测其对厄他培南和亚胺培南的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),用分子生物学PCR试验检测其碳青霉烯酶基因bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)和bla_(VIM),基因测序确定基因型作为金标准,同时采用mCIM联合eCIM试验对所收集的细菌进行碳青霉烯酶检测。以PCR结果为标准,计算mCIM和eCIM的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及Kappa值,进行mCIM和eCIM联合检测结果与PCR结果的一致性检验。结果78株碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌应用PCR法检测出碳青霉烯酶基因阳性74株,阴性4株,其中bla_(KPC-2)阳性60株,bla_(NDM-1)阳性2株,bla_(NDM-5)阳性7株,bla_(NDM-9)阳性3株,bla_(IMP-4)阳性1株,bla_(KPC-2)和bla_(NDM-1)同时阳性1株。mCIM检测碳青霉烯酶的敏感度为100%,特异度为100%,Kappa值为1.000;mCIM和eCIM联合检测丝氨酸碳青霉烯酶敏感度为100%,特异度为100%,Kappa值为1.000;联合检测金属碳青霉烯酶敏感度为92.9%,特异度为100%,Kappa值为0.955。结论采用mCIM、eCIM联合试验对CRE中的碳青霉烯酶进行检测,实用性强,结果易于判读,依据CRE细菌中基因型的不同,将为临床CRE诊断与抗菌药物精准治疗和感染控制提供重要诊断依据。
- 胡祎明李静
- 关键词:碳青霉烯酶Β-内酰胺酶
- UPLC-MS/MS法检测人血清中卡马西平浓度及其临床应用被引量:6
- 2020年
- 目的建立并验证一种定量检测人血清中卡马西平的方法,并将其应用于临床治疗药物监测。方法样本经蛋白沉淀后,采用液相-串联质谱联用仪测定,色谱柱为BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以含0.01%甲酸乙腈溶液-含0.01%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.5 mL·min-1,电喷雾正离子模式,多反应监测。结果本方法在100~2×104 ng·mL^-1(r=0.9988)内线性关系良好,定量下限为20 ng·mL^-1;批内相对标准偏差(RSD)和相对误差(RE)分别为7.45%~19.20%和-3.10%~9.96%,批间RSD和RE分别为8.46%~12.33%和4.55%~12.56%;卡马西平的提取回收率在92.37%~96.19%之间;在6种储存条件下,处理前后的血清样本稳定性好。结论该方法检测速度快、专属性强、重复性好。设计了可满足治疗药物监测需求的线性范围及质控样品,首次考察了生物样本中卡马西平的光照稳定性。本方法已成功用于110例临床样本的检测。
- 毕重文杨丽李丹青付广华胡祎明李正翔袁恒杰
- 关键词:卡马西平血清液质联用治疗药物监测
- 2008-2011年临床感染患者阴沟肠杆菌耐药基因检测及同源性分析
- 目的了解2008-2011年临床分离阴沟肠杆菌耐药基因分布及其流行情况。方法收集2008年1月至2011年6月自临床感染患者分离的114株阴沟肠杆菌。应用Vitek-2 Compact鉴定细菌,K-B法进行药敏实验,多重...
- 王凤霞胡志东田彬李静杨华周斌胡祎明
- 我院生殖助孕门诊患者叶酸代谢酶MTHFR 基因多态性的调查分析
- 2023年
- 目的:调查分析本院生殖助孕门诊患者MTHFR基因多态性分布及特征。方法:采用回顾性研究方法,调取2018年8月17日—2022年4月30日于本院生殖助孕妇科和生殖助孕男科门诊就医的6820例患者作为研究对象,使用PCR-芯片杂交法检测MTHFR C677T的基因型,统计基因型和等位基因频率。结果:女性患者MTHFR C677T野生型(CC)、杂合突变型(CT)和纯合突变型(TT)的频率分别为19.13%、48.77%和32.10%,C、T等位基因频率分别为43.51%和56.49%。男性患者MTHFR C677T基因CC、CT和TT的频率分别为18.89%、48.14%和32.97%,C、T等位基因频率分别为42.96%和57.04%。男性和女性患者MTHFR C677T基因型与等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。不同年龄段患者的上述位点基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本院生殖助科门诊患者MTHFR C677T基因多态性频率在不同年龄段及男性和女性患者中的分布无差异。
- 杨妙毕重文顾芃胡祎明
- 关键词:亚甲基四氢叶酸还原酶单核苷酸多态性
- 临床特殊治疗药物霉酚酸、他克莫司及万古霉素浓度监测的研究现状与进展被引量:5
- 2020年
- 治疗药物监测(TDM)是20世纪70年代在临床药物治疗学领域内崛起的一门边缘学科,旨在通过测量患者血中药物浓度,使临床医生确认患者是否接受了足够量的药物治疗,并依据患者个体的情况调节用药剂量,实现给药个体化,以达到预期的治疗效果;同时避免或减小因血液中药物浓度过大而导致的毒性作用。目前临床患者血液中药物浓度监测的方法主要包括色谱分析和免疫分析,其中色谱分析包括高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS),免疫分析包括酶增强免疫测定技术(EMIT),化学发光微粒子免疫分析(CMIA)等。HPLC及LC-MS/MS法检测药物种类广泛,但仪器成本较高,检测标本通量低,因此主要应用在科研或一些大型实验室中;EMIT、CMIA为医学检验常用的药物浓度的检测方法,有商品化试剂盒应用于临床检验,可在生物化学或免疫学平台上进行检测。可提供的检测试剂主要包括抗心律失常类药物(如地高辛、普鲁卡因),免疫抑制剂[如环孢霉素、他克莫司、霉酚酸(MPA)],抗肿瘤药物(如甲氨蝶呤),支气管扩张剂(如茶碱),抗癫痫类药物(如丙戊酸、卡马西平、苯妥英),抗细菌、抗真菌药物(如万古霉素、氯霉素、伏立康唑等),以及滥用药物(如可卡因、吗啡)等。
- 胡祎明袁恒杰
- 关键词:药物浓度监测霉酚酸他克莫司万古霉素
- 阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶基因及其流行病学研究被引量:7
- 2012年
- 目的分析医院2008-2010年临床分离阴沟肠杆菌产ESBLs和AmpC酶及其对抗菌药物的耐药性,并了解其耐药基因的传播机制。方法采用改良三维试验筛选AmpC酶,双纸片扩散法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测ESBLs和AmpC酶的基因,采用微量肉汤稀释法分析细菌耐药性,质粒接合试验分析耐药基因的传播特点。结果同时产ESBLs和AmpC酶菌株对三、四代头孢菌素及含酶抑制剂药物的耐药率均>50.0%;45株改良三维试验阳性,14株ESBLs确证试验阳性,ESBLs和AmpC酶的基因阳性者分别为25、38株,分别以TEM-1型、MIR-3型为主,其次为CTX-M-3、DHA-1型,SHV-11型广谱β-内酰胺酶2株,未检测到CIT、MOX、FOX、ACC型AmpC酶的基因,5株接合试验成功。结论阴沟肠杆菌主要携带TEM-1型广谱β-内酰胺酶、CTX-M-3型ESBLs和MIR-3型AmpC酶,耐药现状严重,应采取积极有效的措施预防多药耐药菌株的播散与暴发流行。
- 王凤霞胡祎明胡志东胡巧娟李静田彬
- 关键词:阴沟肠杆菌超广谱Β-内酰胺酶AMPC酶
- 均相酶免疫法与液质联用法测定人血清中卡马西平浓度的比较被引量:2
- 2021年
- 目的:比较均相酶免疫法(HEIA)与液质联用法(LC-MS)检测人血清中卡马西平浓度结果。方法:入组110份临床样本,分别用2种方法测定,检验2组检测数据的正态性和显著性差异,采用Spearman法进行相关性分析,绘制Bland-Altman偏差图考察检测方法的差异性,Passing-Bablok回归法考察2种方法等效性。结果:HEIA法和LC-MS法的测定平均值分别为(8.23±5.59)μg·mL^(-1)和(6.19±4.35)μg·mL^(-1)。2组数据不呈正态分布,差异有统计学意义(P<0.05),呈高度相关(r=0.982 0)。2种方法测定值的差值的平均值为(29.5±21.3)%,且不同浓度水平差异相当,一致性较好。Passing-Bablok回归方程为:Y_(HEIA)=0.012 9+1.318 7X_(LC-MS),2种方法不具有等效性。结论:HEIA法比LC-MS法的检测值高,采用2种方法开展卡马西平治疗药物监测工作时,应考虑不同方法的测定差异值,根据临床实际疗效和安全性调整参考范围。
- 毕重文付广华李丹青胡祎明顾芃杨妙李正翔袁恒杰
- 关键词:液质联用法卡马西平
- 基于超高效液相色谱-串联质谱法评价苯二氮■胶体金试剂盒的检测性能
- 2019年
- 目的:采用UPLC-MS/MS定性检测人尿液中常见苯二氮■类药物,用其评价苯二氮■胶体金试剂盒的检测性能。方法:尿液样品液液萃取后,采用液相-串联质谱联用仪测定,色谱柱为BEH C18,以含0.01%甲酸乙腈溶液-含0.01%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.4 mL·min-1,电喷雾正离子模式,多反应监测。以该UPLC-MS/MS法为对照,参考美国临床实验室标准化委员会发布的EP12-A2文件,分别对苯二氮■胶体金试剂盒的灵敏度、准确度、精密度及一致性进行评价。结果:UPLC-MS/MS法检测限在0.41~1.22 ng·mL-1之间,日内精密度RSD小于<10.81%,日间精密度RSD小于<19.22%,提取回收率均在53.90~69.32%之间。胶体金法阿普唑仑和地西泮阈值浓度为300 ng·mL-1,艾司唑仑、劳拉西泮、氯硝西泮、三唑仑、咪达唑仑阈值浓度大于360 ng·mL-1,硝西泮阈值浓度在240~300 ng·mL-1之间。68例临床样本,采用两种方法检测后,Kappa值为0.12。劳拉西泮、氯硝西泮、阿普唑仑、艾司唑仑、地西泮的阳性预测值在85.7%~100%之间,劳拉西泮、阿普唑仑、艾司唑仑的阴性预测值分别为28.5%、33.3%、25%。结论:两种检测方法的一致性强度较弱。UPLC-MS/MS法具有较高灵敏度和准确性,但样品前处理复杂。苯二氮■胶体金试剂盒对于不同的药物具有差异化的检测效能,阳性预测结果的准确率高,而阴性预测结果的准确率较低。
- 毕重文杨丽张佳成胡祎明李正翔袁恒杰
- 关键词:液-质联用中毒检测