胡晓清
- 作品数：30 被引量：58H指数：5
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学文化科学更多>>
- 抗菌蓝光对鲜牛奶杀菌后味觉和脂质组的影响
- 2024年
- 抗菌蓝光(400~480 nm)是近年来新型的非热杀菌新技术,具有杀菌谱广、安全性好等优势,在食品杀菌领域具有良好潜力。该文采用415 nm蓝光,对鲜牛奶中污染频率高的大肠杆菌进行杀菌研究。因此论文针对牛奶最易氧化的脂质成分,研究了蓝光杀菌后牛奶脂质组变化,同时分析了牛奶味觉特性和过氧化物丙二醛(malondialdehyde, MDA)。结果显示,蓝光对牛奶中大肠杆菌杀灭效果好,82.08 J/cm^(2)剂量时可完全杀灭。杀菌后鲜牛奶酸、甜、苦、涩等多个感官特性无统计学差异;MDA水平也无影响。牛奶的脂质组分析显示,蓝光杀菌前后鲜牛奶的脂质组成、相对含量、尤其是不饱和脂质均无统计学差异,结果表明,415 nm蓝光不会改变鲜牛奶中的脂质组分。因此415 nm蓝光照射可有效杀灭鲜牛奶中大肠杆菌,且不影响牛奶脂质和风味。
- 吴越纪剑孙秀兰王加生胡晓清叶永丽
- 关键词：大肠杆菌味觉
- 一种发酵生产S-腺苷甲硫氨酸的方法
- 本发明公开了一种生产S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的方法，所述方法在合成SAM的生物转化期中采用脉冲补料的方式添加碳源。更优选的，所述方法还包括向发酵液中流加适量的乙醇。本发明的方法可大大提高SAM的产量，且发酵时间短、操作...
- 储炬张卓张嗣良庄英萍王永红胡晓清袁中一
- 文献传递
- 中心组合优化重组毕赤酵母生产S-腺苷甲硫氨酸用发酵培养基被引量：7
- 2006年
- 利用统计学实验设计方法优化了重组毕赤酵母生产S-腺苷甲硫氨酸（sAM）的发酵培养基。采用中心组合设计和响应面分析对诱导相培养基中硫酸铵、甲醇和L-甲硫氨酸三个关键因素的浓度进行了优化，使SAM在全合成培养基上的摇瓶产量提高了60％，达到1．9g／L，并考察了胞内SAM合成酶活性的变化与SAM积累的相关性。
- 朱闪储炬胡晓清庄英萍张嗣良袁中一
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸培养基优化重组毕赤酵母SAM合成酶
- 重组毕赤酵母发酵生产S-腺苷甲硫氨酸培养条件优化被引量：9
- 2006年
- 甲醇营养型毕赤酵母生产S-腺苷甲硫氨酸(SAM)是通过其表达的SAM合成酶催化L-甲硫氨酸(L-Met)和ATP反应而合成的。本文采用全合成培养基,在摇瓶上进行了培养条件的优化,确定了接种量、pH、PTM1、PO43-等初步条件。并根据SAM生物合成的特征,重点对其碳、氮源的影响作了进一步的分析优化。结果表明:当CaSO40.465g/L,K2SO49.10g/L,MgSO4.7H2O 7.45g/L,PO43-0.5mol/L情况下,生长阶段,甘油4%、硫酸铵4.00g/L为最佳;诱导表达阶段,L-Met1.0g/L,甘油与甲醇比例为0.5、硫酸铵8.00g/L为最佳。优化后,SAM产量诱导4d后达1.48g/L,诱导5d后可达1.70g/L(131mg/g干细胞),L-Met的转化率可达40.65%,既利于工艺放大又便于产品的分离纯化。
- 朱志钢储炬胡晓清庄英萍王永红张嗣良袁中一
- 关键词：毕赤酵母高密度发酵甲硫氨酸S-腺苷甲硫氨酸
- 毕赤酵母PAS_chr4_0427基因敲除促进神经酰胺合成
- 2024年
- 神经酰胺是应用于化妆品和药品的一类脂质分子,利用微生物代谢工程合成神经酰胺具有重要前景。巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是优良的工业宿主,目前尚无利用P.pastoris强化神经酰胺的研究。首先构建P.pastoris GS115ΔPAS_chr3_0329(G-K)作为底盘,然后在G-K中敲除神经酰胺合成负反馈基因PAS_chr4_0427(G-KO),并利用脂质组学技术探究神经酰胺的组成及含量变化。结果表明,与G-K相比,G-KO中神经酰胺在总脂质中相对含量增加了628.13%,达到9.32%;并促进合成更多具有不饱和长链碱基的神经酰胺。与此同时,G-KO中鞘脂相对含量增加,而磷脂相对含量降低。对P.pastoris中神经酰胺丰度最高的Cer(d18∶0)神经酰胺进行HPLC分析,显示G-KO中Cer(d18∶0)神经酰胺合成量达90.22 mg/L,相比G-K提升了872.20%。该研究证实P.pastoris可用于神经酰胺合成,PAS_chr4_0427缺失株G-KO具有良好的神经酰胺合成能力,具有工业发酵制备神经酰胺的潜力。
- 黄铭吴佳欣张目王水平胡晓清
- 关键词：巴斯德毕赤酵母神经酰胺
- 利用CRISPR-Cas9和Cre/loxP系统删除34个非必需基因构建L-苏氨酸生产菌
- 2020年
- L-苏氨酸是一种被广泛应用于食品、饲料及医药等领域的必需氨基酸。大肠杆菌以葡萄糖为碳源合成L-苏氨酸的过程中,一些非必需基因的转录和翻译会消耗碳源。利用CRISPR-Cas9和位点特异性重组系统Cre/loxP,敲除了大肠杆菌MG1655基因组中puuE和ynaI区间的34个非必需基因(共30.372 kb),获得了突变菌MG003,然后通过高表达L-苏氨酸合成途径中关键基因thrA*、thrB和thrC以及L-苏氨酸转运酶编码基因rhtA和rhtC提高L-苏氨酸产量。与对照菌MG1655/pFW01-thrA*BC相比,MG003/pFW01-thrA*BC生长加快,L-苏氨酸产量提高25.5%;MG003/pFW01-thrA*BC-rhtA的L-苏氨酸产量提高了43.3%;MG003/pFW01-thrA*BC-rhtC的L-苏氨酸产量提高了74.5%。研究结果表明,大肠杆菌基因组中34个非必需基因的删除有利于其提高L-苏氨酸合成能力。
- 丁志祥胡晓清柳亚迪柳亚迪
- 关键词：大肠杆菌L-苏氨酸
- 一种发酵生产S－腺苷甲硫氨酸的方法
- 本发明公开了一种生产S－腺苷甲硫氨酸(SAM)的方法，所述方法在合成SAM的生物转化期中采用脉冲补料的方式添加碳源。更优选的，所述方法还包括向发酵液中流加适量的乙醇。本发明的方法可大大提高SAM的产量，且发酵时间短、操作...
- 储炬张卓张嗣良庄英萍王永红胡晓清袁中一
- 文献传递
- 大肠杆菌PTS^(Ntr)相关基因缺失对L-苏氨酸合成的影响
- 2023年
- 大肠杆菌的氮磷酸转移酶系统(nitrogen phosphotransferase system,PTSNtr)在其工作过程中会消耗L-苏氨酸合成的前体物质磷酸烯醇式丙酮酸,敲除相关基因或可影响苏氨酸合成。作者利用CRISPR-Cas9系统,分别敲除PTSNtr相关基因ptsP、ptsO和ptsN,构建得到突变株MZ001、MZ002和MZ003。通过对出发菌株和突变菌株测定生长曲线,发现ptsP、ptsO和ptsN的单缺失使菌株培养前期生长迟缓,迟滞期延长,后期快速生长,稳定期生物量积累大于出发菌株。之后在出发菌株和突变菌株中引入含有苏氨酸合成的3个关键酶编码基因thrA*、thrB和thrC以及苏氨酸转运蛋白编码基因rhtC的表达质粒。对比菌株MG1655/pFW01-thrA*BC-rhtC,菌株MZ001/pFW01-thrA*BC-rhtC、MZ002/pFW01-thrA*BC-rhtC和MZ003/pFW01-thrA*BC-rhtC苏氨酸的产量有明显提高,分别为3.805、1.722、3.091 g/L,表明大肠杆菌的PTSNtr相关基因的敲除对提高其L-苏氨酸的合成能力有促进作用。
- 张淑嫣胡晓清李莹王小元
- 关键词：大肠杆菌L-苏氨酸
- 基于尿苷二磷酸葡萄糖循环再生系统高效转化酪醇合成红景天苷
- 2024年
- 红景天苷是一种在食品、医药等领域应用广泛的功能性成分,其传统生产方法为植物提取,原料成本高昂且提取过程繁琐。本研究通过生物合成法,以酪醇为底物高效生产红景天苷。在利用糖基转移酶实现酪醇糖基化的同时,引入蔗糖合酶构建尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDPG)循环再生系统。通过比较,筛选出糖基转移酶UGT33以及蔗糖合酶AtSUS,构建重组大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pETDuet-AtSUS-UGT33,并针对基因的拷贝数进行了优化,确定糖基转移酶与蔗糖合酶的最优拷贝数比例为3:1。进一步对重组菌株的全细胞催化条件进行优化,在最适反应温度、pH、菌体量、底物浓度、适量金属离子的最优反应条件下,在5 L发酵罐转化24 h,红景天苷最高产量达到8.17 g/L。本研究为利用微生物高效生产红景天苷提供了一定的参考意义。
- 魏晨昱黄珠莹沈知行张显饶志明胡晓清徐美娟
- 关键词：红景天苷糖基转移酶蔗糖合酶全细胞催化
- 大肠杆菌细胞外膜渗透性与脂多糖结构的关系(英文)被引量：8
- 2011年
- 细胞外膜是大肠杆菌的半透膜屏障,其主要成分是脂多糖。选取并构造共9种具有不同脂多糖结构的大肠杆菌,用于考察脂多糖结构对细胞外膜渗透性的影响。从9种菌株中提取出脂多糖和类脂A,并且用薄层层析色谱和离子源质谱来鉴定其结构。用N-苯基-1-萘胺作为荧光探针来测定细胞外膜渗透性大小。野生型大肠杆菌表现出最小的渗透性,因敲除或表达某些基因而导致脂多糖结构改变的突变株均表现出较高的渗透性。脂多糖上的磷酸基团、脂肪酸链和多糖链的改变都影响了大肠杆菌的渗透性,其中多糖链长度的改变对渗透性影响最大,其次是脂肪酸链的数目变化。实验结果表明渗透性和脂多糖的结构具有较强的相关性。
- 马鹏胡晓清陈久洲王小元
- 关键词：脂多糖类脂A大肠杆菌
