肖飞
- 作品数：14 被引量：13H指数：2
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金国家自然科学基金广西中医学院课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- p70S6K与eIF4E在肝癌中的表达及相关性被引量：2
- 2012年
- 目的探讨肝癌组织中p70S6K和eIF4E的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测55例肝细胞肝癌及癌旁硬化肝组织中p70S6K和eIF4E蛋白的表达情况,并分析两者的相关性及与临床病理特征的关系。结果 p70S6K和eIF4E在肝癌中的阳性表达率分别为85.5%和90.9%,高于癌旁硬化肝组织(P<0.05),其表达与肝癌的分化程度、临床分期以及有无门静脉癌栓有关,与患者的年龄、性别、肿瘤大小以及有无包膜无关,并且在肝癌组织中p70S6K和eIF4E蛋白表达呈正相关(rs=0.375,P=0.005)。结论 p70S6K和eIF4E蛋白的异常表达与肝癌的发生发展及浸润转移有关,并且两者之间可能存在某种协同关系。
- 周晓艳曾庆堂晁耐霞肖飞庞玉艳
- 关键词：P70S6KEIF4E肝癌免疫组织化学
- 肝癌相关抗原kinectin蛋白致敏的树突状细胞对T细胞增殖能力的检测
- 赵飞兰晁耐霞李日伦肖飞蒋日婷谢小薰罗国容
- 肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体制备、鉴定及初步应用被引量：5
- 2011年
- 目的制备本课题组报告的肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性。方法以本课题组前期构建的人MBP-Kinectin融合片段重组质粒为基础,原核表达和亲和层析大量纯化MBP-Kinectin融合蛋白,并免疫新西兰兔制备多克隆抗体;用间接ELISA法测定抗体效价,用Western blot鉴定抗体的特异性。同时用Kinectin多克隆抗体检测Kinectin在正常成人肝细胞HL-7702和人肝癌细胞株SMMC-7721内的表达。结果通过免疫新西兰兔获得抗Kinectin抗体,ELISA测定纯化的Kinectin抗体效价最高为1∶12 800,Western blot结果显示Kinectin抗体具有较好的特异性。免疫细胞化学和western blot检测发现Kinectin蛋白在肝癌细胞株内的表达显著高于正常成人肝细胞株。结论制备的抗Kinectin抗体具有较高的效价和特异性,能满足Western blot和免疫细胞化学检测Kinectin蛋白的要求,为进一步深入研究Kinectin在肝癌发生发展中的作用奠定基础。
- 晁耐霞肖飞蒋日婷黄天明赵飞兰曾庆堂李日伦谢小薰罗国容
- 关键词：多克隆抗体肝细胞癌肿瘤相关抗原KINECTIN
- 肿瘤相关抗原Kinectin蛋白在肝癌组织的表达及其在肝癌发生中的作用研究
- Kinectin蛋白位于内质网膜上,在细胞内主要作为Kinesin受体参与细胞内的囊泡转运及内质网形态的维持。本实验采用实时荧光定量RT-PCR和免疫组织化学技术检测了Kinectin在肝癌和相应的癌旁组织内mRNA和蛋...
- 晁耐霞罗国容吴春林赵飞兰肖飞蒋日婷黄天明曾庆堂李日伦谢小薰
- Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏树突状细胞对T细胞分化格局的改变
- 2011年
- 背景:Kinectin作为树突状细胞瘤苗可运用于肝癌临床免疫治疗。目的:检测kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞刺激T细胞亚群的分化情况。方法:运用免疫组化法检测kinectin-麦芽糖结合蛋白孵育的树突状细胞刺激增殖的T细胞中CD4+、CD8+T细胞亚群活化情况,同时设立麦芽糖结合蛋白组、非致敏树突状细胞组及普通培养T细胞组作为比较。结果与结论:Kinectin-麦芽糖结合蛋白致敏树突状细胞刺激的T细胞组CD8+T细胞明显高于麦芽糖结合蛋白孵育树突状细胞刺激的T细胞组、非致敏树突状细胞刺激组及普通培养T细胞组(P<0.05);各组CD4值之间、CD4/CD8值之间比较,差异无显著性意义(P>0.05)。经Kinectin-麦芽糖结合蛋白融合蛋白致敏的树突状细胞能有效刺激自体CD8+T淋巴细胞的增殖,Kinectin-麦芽糖结合蛋白作为肝癌相关抗原可通过致敏树突状细胞发挥较明显的抗肿瘤功能。
- 赵飞兰晁耐霞李日伦曾庆堂黄天明莫发荣肖飞罗国容
- 关键词：树突状细胞T细胞亚群CD8
- 线粒体呼吸链抑制在异丙酚诱导发育期神经毒性中的作用
- 第一部分异丙酚对原代海马神经元线粒体功能的影响目的:观察不同浓度和不同孵育时间的异丙酚对原代海马神经元线粒体功能的影响。方法:原代海马神经元体外培养至第7天:(1)浓度依赖性分组:随机分为对照组(C组),脂肪乳剂组(I组...
- 肖飞
- 关键词：异丙酚线粒体神经毒性线粒体呼吸链
- GCF2基因片段原核表达载体的构建及其表达
- 目的 构建肝癌相关抗原GCF2基因片断(323～1234 bp)原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中表达。方法 提取人肝癌组织总RNA,通过逆转录酶合成cDNA；根据GenBank公布的GCF2基因cDNA序列设计引物,利用...
- 肖飞晁耐霞曾庆堂李日伦蒋日婷罗国容
- 关键词：原核表达
- 肝癌相关抗原Kinectin蛋白致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株杀伤作用的检测被引量：2
- 2011年
- 目的探讨肝癌相关抗原Kinectin基因重组蛋白Kinectin-MBP(MBP,麦芽糖结合蛋白)致敏树突状细胞(DCs)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株的杀伤作用。方法体外基因工程的方法表达、纯化Kinectin-MBP。从正常人外周血中分离单个核细胞(PBMC),重组人粒细胞-巨噬细胞集落因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhIL-4)联合培养,诱导扩增DCs,并通过形态学、流式细胞术鉴定DCs。DCs经Kinectin-MBP致敏后,ELISA检测细胞上清液中IL-12和IFN-γ的含量;将致敏DCs与自体T淋巴细胞混合培养后,MTT法检测T细胞增殖的能力;同时诱导T细胞增殖转化为CTL,以此CTL为效应细胞,Kinectin表达阳性的肝癌细胞株bel-7404为靶细胞,LDH 4 h释放法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用。结果体外重组蛋白技术成功表达、纯化出Kinectin-MBP。PBMC经rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导,可成功培养出DCs。DCs经Kinectin-MBP致敏后上清液中IL-12和IFN-γ的分泌量明显增高,且刺激自体T细胞增殖的能力也显著增强;同时Kinectin-MBP致敏的DCs能明显诱导CTL的增殖,此CTL对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株有较明显的杀伤作用,其杀伤率在效靶比为25∶1时达最高峰[为(65.00±1.47)%],显著高于其他对照组(均P<0.001)。结论体外诱导扩增的DCs经肝癌相关抗原Kinectin-MBP致敏后具有较强的刺激自体T细胞增殖的能力,且在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对Kinectin阳性的7404肝癌细胞株具有较强的杀伤效应。该实验为将Kinectin蛋白运用于以DCs为基础的肝癌临床免疫治疗奠定了基础。
- 赵飞兰晁耐霞李日伦莫发荣黄天明肖飞谢小薰罗国容
- 关键词：CTL
- 肝癌相关抗原Kinectin的多克隆抗体制备、鉴定及初步应用
- 晁耐霞肖飞蒋日婷赵飞兰曾庆堂谢小薰罗国容
- 实时荧光定量双标准曲线法检测人肝癌、癌旁和正常肝组织Kinectin mRNA表达
- 目的 建立并优化Kinectin实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)体系,检测人肝癌、癌旁和正常肝组织Kinectin mRNA表达,探讨Kinectin与肝癌相关性.方法 通过正常肝组织cDNA分别进行Kinect...
- 吴春林黄健晁耐霞薛慧琴曾庆堂赵飞兰肖飞罗国容
- 关键词：KINECTIN肝癌
