王震
- 作品数：18 被引量：32H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市重大科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学一般工业技术更多>>
- 心肌特异性新蛋白激酶p93和peroxiredoxin3的相互作用被引量：7
- 2004年
- 为了明确p93在心血管系统中的生物学功能及在信号传导通路中的作用 ,采用酵母双杂交技术 ,选择 p93N端第 10 1～ 372位氨基酸构建诱饵质粒 ,筛选成人心脏cDNA文库 ,寻找与之相互作用的蛋白质 ,结果得到蛋白peroxiredoxin 3(PRX 3) .采用体外结合实验和免疫共沉淀等方法 ,证实了原核和真核表达的 p93确实可与PRX3相互作用 ,通过双重荧光共定位 ,为二者的相互作用提供了定位依据 .研究提示p93可能参与心肌细胞中与PRX3有关的各种生理病理过程 ,如生长、分化、发育、凋亡。
- 冯艳刘冬青王震曹慧青时娜邓仲端丁金凤孟宪敏
- 关键词：酵母双杂交心肌细胞生物学功能信号传导通路
- Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选被引量：5
- 2004年
- 为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质,对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验,并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验.结果发现,在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力.进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和胰蛋白酶抑制物重链前体(ITIH).通过免疫共沉淀实验,验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用.通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白,并且能够同Filamin相结合.由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,起到了参与细胞黏着斑形成的过程.
- 王震孟宪敏曹慧青刘冬青冯艳尤昕王茵郭莲军屈伸
- 关键词：肌动蛋白结合蛋白相互作用蛋白白质新基因阳性克隆
- 肿瘤相关巨噬细胞分泌转化生长因子-β诱导蛋白影响胶质瘤干细胞特性的体外研究被引量：2
- 2019年
- 目的探讨转化生长因子⁃β诱导蛋白(TGFBI)在胶质母细胞瘤中的异质性表达及其促进胶质瘤干细胞恶性行为的作用机制。方法检索肿瘤基因组学图谱计划(TCGA)、中国脑胶质瘤基因组图谱计划(CGGA)、脑肿瘤分子数据库(REMBRANDT)、Oncomine数据库中TGFBI在不同级别胶质瘤、不同亚型胶质母细胞瘤中的表达水平,以及TGFBI表达变化与患者生存期、胶质瘤相关巨噬细胞(TAMs)标志物CD11b和CD163的相关性。体外诱导人外周血单核细胞系U937分化为Primed⁃U937细胞和M2型巨噬细胞样细胞,实时定量聚合酶链反应检测诱导过程中TGFBI,M1型TAMs标志物CD80、白细胞介素⁃6(IL⁃6),以及M2型TAMs标志物CC趋化因子配体18(CCL18)、血管内皮生长因子A(VEGFA)的表达变化。免疫荧光染色和免疫组织化学染色观察胶质母细胞瘤细胞TGFBI与TAMs标志物CD163和胶质瘤干细胞标志物SOX2的分布情况。体外培养人原代胶质瘤干细胞系NCH⁃421K,测定重组人TGFBI(rhTGFBI)对细胞成球能力和侵袭能力的影响。结果(1)来自TCGA、CCGA、REMBRANDT、Oncomine数据库的数据分析显示,TGFBI表达变化与胶质瘤分级和恶性程度呈正相关,与患者生存期呈负相关,与TAMs标志物CD11b和CD163表达水平呈正相关。(2)在U937细胞诱导分化为M2型TAMs过程中,M1型TAMs标志物CD80(P=0.000)和IL⁃6(P=0.001)表达水平降低,M2型TAMs标志物CCL18(P=0.000)和VEGFA(P=0.002)表达水平升高,TGFBI表达水平亦升高(P=0.001)。(3)免疫荧光染色和免疫组织化学染色显示,胶质母细胞瘤细胞中TGFBI与TAMs标志物CD163和胶质瘤干细胞标志物SOX2均存在共定位。(4)体外成球实验和侵袭实验显示,经rhTGFBI处理后,NCH⁃421K细胞成球数目多于(P=0.000)、细胞球侵袭能力强于(P=0.001)对照组。结论胶质母细胞瘤TGFBI可由M2型TAMs分泌并促进胶质瘤干细胞成球、侵袭等恶性行为。
- 朱洪涛刘丹陈籽荣厉亚坤王震程芳玲刘佳敏张所军张斌万锋
- 关键词：胶质母细胞瘤巨噬细胞
- 一种可注射性负载黑磷纳米片复合水凝胶及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种可注射性负载黑磷纳米片复合水凝胶及其制备方法和应用。所述复合水凝胶是由聚多巴胺官能化的黑磷纳米片、浓度2‑2.5％wt/vol的海藻酸钠悬浮液、1.5‑2％wt/vol的海藻酸钙悬浮液、透明质酸混合配制而...
- 郭义山张甲辉郭小朋王志文魏宇淼黄楚鹰杨宁王震高燃潘成梁刘文虎曹炳鑫曾状林周文萍李松海王赫姜文雪
- TACE及其类肽抑制剂相互作用的分子模拟及实验研究
- 目的通过分析和研究肿瘤坏死因子α前体转换酶(TACE)的及其抑制剂相互作用特异性的分子基础及抑制效率的关系,为寻找新的TACE抑制剂提供理依据。方法本文利用生物信息学分析Insight Ⅱ分子模拟软件,对PDB数据库中有...
- 赵云斌王震杨渝珍
- 关键词：金属蛋白酶
- 文献传递
- 人细胞骨架调节蛋白基因Nelin N端片段的原核表达被引量：2
- 2003年
- [目的 ]构建Nelin基因N端片段的原核表达载体并表达此蛋白 .[方法 ]设计带有BamHI/EcoRI酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒pGEX 5X Nelin为模板 ,用PCR扩增Nelin基因N端片段 ,并用BamHI/EcoRI酶切PCR产物和原核表达载体 pGEX 5X 1,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒 pGEX 5X Nelin 1,经双酶切鉴定和测序验证 .重组表达质粒转化大肠杆菌BL 2 1,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,以SDS PAGE进行分析 .[结果 ]成功构建并表达了分子量约为 43KD的NelinN端片段的融合蛋白 .[结论 ]所表达的蛋白为蛋白纯化。
- 尤昕曹慧青时娜王震赵秀文丁金凤孟宪敏
- 关键词：基因表达原核表达抗体
- 三类TACE抑制剂的作用机理探讨
- 目的:以大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)刺激的HL-60细胞系为天然模型,筛选肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)的抑制剂,为人工干预炎症过程提供依据和手段。方法:分时相刺激HL-60细胞后,应用分子生物学和细胞学技术在蛋白...
- 朱孔黎韩玲王震丁廷波杨渝珍
- 文献传递
- 三类TACE抑制剂作用的分子机理探讨
- 目的:以脂多糖(LPS)刺激的HL-60细胞系为炎症细胞模型,筛选肿瘤坏死因子-α转换酶(TACE)的抑制剂,为在基因水平人工干预炎症过程提供科学依据和手段,旨在开发和筛选以TACE为靶标的抗炎、抗肿瘤治疗新途径。方法:...
- 王震王茵朱孔黎韩玲丁廷波杨渝珍
- 文献传递
- 人类新基因Nelin及其生物学特性的研究
- 为了寻找和研究心血管系统有关的重要功能基因及其表达模式,通过构建正常成人心脏和主动脉cDNA文库,并在大规模ESTs测定的基础上,筛选出一个新基因Nelin。该基因表达的mRNA(GenBank登记号AF114264)全...
- 王震孟宪敏郭莲军
- 关键词：细胞骨架蛋白酵母双杂交肌动蛋白蛋白-蛋白相互作用免疫共沉淀
- 文献传递
- Nelin与F-actin及Filamin相互作用的鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的在用酵母双杂交方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选,得到3个阳性克隆的基础上,进一步探讨新基因Nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的功能,并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质。方法采用基因转染和表达技术,在真核细胞内外分别进行了Nelin蛋白与肌动蛋白(F-actin)结合的共沉降及免疫荧光共定位实验。并通过免疫共沉淀实验进一步验证所得的实验结果。结果证实了在细胞内外Nelin蛋白均能同F-actin相结合;还能与Filamin的C-末端免疫球蛋白样结构发生相互作用。结论Nelin为一个新的兼有actin及Filamin结合能力的蛋白。在心肌细胞内,Nelin很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白,参与了细胞黏着斑形成的过程。
- 王震刘冬青王茵屈伸孟宪敏
- 关键词：肌动蛋白细丝蛋白免疫共沉淀
