王桂芹
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 具有HI活性的H1亚型流感病毒特异性单克隆抗体的制备与应用
- 2010年
- 为了制备具有HI活性的HI亚型流感病毒特异性单克隆抗体(MAb),本研究以H1N1亚型猪流感病毒(SIV)株A/Swine/Guangdong/718/01(H1N1)为免疫原,免疫BALB/c小鼠,经常规细胞融合后,血凝抑制(HI)方法进行检测,融合细胞经稀释克隆纯化后,获得11株能稳定分泌抗血凝素特异性HI MAb的杂交瘤细胞株。鉴定表明,所获MAb与其他具有血凝活性的病毒以及其他14个HA亚型的流感病毒均不具有HI交叉反应,表明这11株MAb均具有良好的流感病毒亚型特异性。其中A6F、2BBF和2BB与其他H1亚型流感病毒分离株的HI试验证实我国不同地区分离株之间的抗原性存在一定差异。11株MAb对H1SIV抗原的HI试验结果显示其HI效价有明显差异。叠加实验表明这些MAb分别识别HA抗原的不同表位。间接免疫荧光试验表明,2BBF、8HB、1DH、7FC和2BB均可与2009年流行H1N1病毒A/California/04/2009HA抗原发生特异性反应。这些MAb特异性的研制为H1亚型流感病毒的疫情病原学快速诊断以及病毒抗原性变异的相关研究提供了物质基础。
- 李印邓国华王桂芹杨焕良乔传玲陈化兰
- 关键词：血凝抑制单克隆抗体间接免疫荧光
- H7亚型高致病性禽流感病毒抗原捕获ELISA诊断方法的建立
- 用纯化的H7亚型禽流感病毒灭活后多次免疫山羊采血分离血清制备包被抗体,以自制的H7亚型特异性单克隆抗体作为一抗,建立了检测H7亚型流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法。经实验证明ELISA最适工作条件的如下:羊血清1:...
- 王桂芹邓国华曲站红郝婧张立春李雁冰田国斌于康震陈化兰
- 关键词：H7亚型禽流感
- 文献传递
- H7亚型禽流感病毒HA基因在杆状病毒系统中的表达被引量：1
- 2007年
- 利用PCR反应,以特异性引物扩增禽流感病毒去除信号肽的H7亚型HA密码子优化基因,克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTB中,转座DH10感受态细胞,通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆,然后提取基因组Bacmid,转染Sf9昆虫细胞,得到含H7亚型流感病毒HA基因的重组杆状病毒opti-H7HA-Bac。重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,待绝大部分细胞产生细胞病变后收获细胞,细胞裂解产物经血凝试验、SDS-PAGE及Western blot分析证实。密码子优化的H7 HA基因在重组杆状病毒opti-H7HA-Bac感染Sf9细胞后获得高效表达,且具有良好的蛋白活性及特异免疫反应原性。
- 郝婧邓国华姜永萍曲站红王桂芹郝永清陈化兰
- 关键词：禽流感H7亚型HA基因重组杆状病毒
- H7亚型高致病性禽流感病毒抗原捕获ELISA诊断方法的建立
- 用纯化的H7亚型禽流感病毒灭活后多次免疫山羊采血分离血清制备包被抗体,以自制的H7亚型特异性单克隆抗体作为一抗,建立了检测H7亚型流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法.经实验证明ELISA最适工作条件的如下:羊血清1:...
- 王桂芹邓国华曲站红郝婧张立春李雁冰田国斌于康震陈化兰
- 关键词：H7亚型禽流感单克隆抗体酶标抗体
- 文献传递
- H5亚型高致病性禽流感病毒抗原捕捉ELISA诊断方法的建立被引量：10
- 2008年
- 本研究在已有H5亚型禽流感病毒特异性单抗基础上,建立了以多抗作为包被抗体、单抗作为检测抗体的抗原捕捉ELISA方法。通过对各个反应条件进行优化,获得的最佳工作条件为:羊血清1∶1600倍稀释;单抗1∶10000稀释;酶标抗体最适工作浓度为1∶5000倍稀释;单抗反应时间1.5h;酶标抗体作用时间1.5h。特异性试验和敏感性试验结果表明:该方法具有良好的特异性和敏感性,可用于H5亚型高致病性禽流感病毒的检测。
- 曲站红邓国华王桂芹张立春田国彬于康震陈化兰
- 关键词：禽流感病毒H5亚型ELISA
