王峰
- 作品数：57 被引量：210H指数：9
- 供职机构：暨南大学药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学经济管理更多>>
- 深圳市可持续发展研究
- 深圳市持续高速的社会经济发展,直接造成目前区域生态资源的严重破坏,地区自然生态系统的稳定性和完整性大大降低,退行性演替加剧,区域人类生态系统的可持续性呈现不稳定变化状态.但随着地区社会经济的不断发展,信息流、物质流的不断...
- 王峰
- 关键词：可持续发展人类生态系统
- 病毒趋化因子vMIP封闭人趋化因子受体作用及其应用研究
- 孙晗笑陆大祥严群超李秀英莫雪梅王峰江振友董军
- 1999年1月～2005年12月，由国家863计划、国家自然科学基金、国家自然科学基金国际合作项目、广东省自然科学基金、广东省重点科技攻关、广州市重大科技计划资助，进行了研究。 来源于人疱疹病毒8的巨噬细胞炎性蛋白(vM...
- 关键词：
- 重组人过氧化氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化和活性检测
- 2014年
- 为了了解人过氧化氢酶在各种常见肿瘤细胞中的表达情况,构建人过氧化氢酶的原核表达载体,在大肠杆菌中表达、纯化人过氧化氢酶,并进行活性检测.我们通过常规分子克隆手段构建原核表达载体pET-15bhCAT,将其转化大肠杆菌Rosetta-gami,经过IPTG诱导,表达产物经超声破碎后用Ni-NTA柱进行亲和层析纯化,用试剂盒检测重组hCAT酶活性,然后检测其对DNA氧化损伤的保护作用.通过荧光定量PCR(qPCR)测定hCAT基因在HLF-1正常细胞与几种常见肿瘤细胞中的表达情况.本研究成功构建了pET-15b-hCAT的原核表达载体,SDSPAGE检测结果表明,IPTG诱导表达出一条分子质量约为59.7 ku的目的蛋白,该蛋白主要以可溶的形式存在,活性检测表明经纯化得到的rhCAT比活力为62.9 U/mg,pUC19质粒氧化损伤保护实验显示rhCAT对DNA有一定的损伤保护作用.qPCR检测显示hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.成功构建了人过氧化氢酶的原核表达载体,利用大肠杆菌Rosetta-gami获得了hCAT的可溶性表达,纯化的rhCAT具有活性,hCAT基因在U937、K562、PC3、HeLa、HT-1080、HepG-2等肿瘤细胞中的表达量明显低于HLF-1正常细胞.这为后续功能研究及性质实验奠定了基础.
- 孙华张自德江仁望王峰
- 关键词：过氧化氢酶表达纯化过氧化氢酶活性荧光定量PCR
- 小鼠锰超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：2
- 2010年
- 为构建小鼠锰超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体,在大肠杆菌中进行蛋白表达、纯化和功能检测,以小鼠肝脏cDNA为模板,利用PCR方法克隆小鼠锰SOD基因,PCR扩增了1个长600bp左右的基因片段,该片段编码由198个氨基酸组成的成熟的小鼠锰SOD蛋白.将其插入pET15b载体中,经测序鉴定正确后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami.含有pET15b-mMn-SOD质粒的工程菌经过IPTG诱导能表达出相对分子质量约25000的目的蛋白,超声破碎菌体,经Ni-NTA纯化后得到纯度约为95%的重组mMn-SOD蛋白.SOD活性检测表明经过诱导表达的mMn-SOD比活力为531.7U/mg.
- 王峰黄璐圆
- 关键词：锰超氧化物歧化酶纯化SOD活性
- 阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶的基因克隆与表达谱分析被引量：9
- 2015年
- 目的：为了了解阳春砂磷酸甲羟戊酸激酶（PMK）的功能与表达特性，根据阳春砂的转录组注释设计引物，PCR 克隆阳春砂甲羟戊酸途径中的关键酶磷酸甲羟戊酸激酶基因的编码区 cDNA，使用生物信息学方法对其编码的蛋白进行相似性检索及同源序列比对，构建进化树，预测二级及三级结构并分析其功能，探索其各器官中的表达差异．结果：获得了全长1539 bp 的编码阳春砂 PMK 的 cDNA 序列，命名为 AvPMK （GenBank 登录号：KF569902），编码由512个氨基酸组成的磷酸甲羟戊酸激酶，该蛋白含有 GHMP 激酶超家族特异的 N －保守区域、C －保守区域和 ATP 结合位点 Gly-X-Gly-XX-Ala．AvPMK 与其他植物的 PMK 氨基酸相似性达61％～69％，进化树结果显示其与二穗短柄草（Brachypodium distachyon）等单子叶植物具有较近的亲缘关系．AvPMK 蛋白包含14个α-螺旋（Alpha helix），占37.1％；16个β链（Beta strand），占15.6％；32个无规则卷曲结构，占47.3％，无跨膜结构域，其3级结构含有一个催化反应的口袋状结构域．实时荧光定量 PCR 结果显示 AvPMK 基因在叶中表达量较高，茎、根中表达量相对较低．结论：首次从阳春砂仁中扩增磷酸甲羟戊酸激酶的基因片段，为分析其基因表达特性及其在砂仁萜类生物合成中的功能奠定基础．
- 杨恩泽陆颖锶吴秋红王峰
- 关键词：阳春砂萜类化合物基因克隆表达谱分析
- 右半和左半结直肠癌对西妥昔单抗的反应不同
- 目的:右半结肠癌和左半结直肠癌在生物学、病理学特征和基因谱方面都存在巨大差异。本研究旨在探索转移性结直肠癌患者中原发肿瘤的位置是否影响西妥昔单抗的有效性。方法:我们回顾性研究了从2005年到2013年在中山大学肿瘤医院和...
- 王峰白龙刘天舒余一祎骆卉妍张东生王风华王志强金颖李宇红徐瑞华
- 文献传递
- 权钱交易——受贿罪的本质特征
- 受贿罪是最常见的一种国家工作人员职务犯罪。近年来，各种新形式受贿现象不断涌现，司法认定时出现了很多似是而非、模糊不清的问题，给司法实务界带来了很大困惑。笔者作为一名公诉人，根据平时的办案体会，认真研读最新的司法解释和刑法...
- 王峰
- 文献传递
- 人锰超氧化物歧化酶的氧化损伤保护活性鉴定
- 目的：对人锰超氧化物歧化酶(hMn-SOD)的氧化损伤保护活性进行初步研究。方法：培养大肠杆菌gami(pET15b-MnSOD)和gami(pET15b)，添加不同浓度的paraquat进行氧化胁迫，同时添加IPTG诱...
- 王峰杨文杰
- 关键词：锰超氧化物歧化酶PARAQUAT
- 文献传递
- 红壤丘陵区坡地降雨产流规律试验研究
- 本文在中国科学院桃源农业生态试验站就红壤丘陵区坡地油茶林和恢复区(投影面积均为5m×20m、各两次重复)降雨产流进行了研究。降雨采用雨量计实时观测，地表径流采用薄壁三角堰加水位计自动记录流量，壤中流采用翻斗流量计加HOB...
- 王峰
- 关键词：红壤丘陵地区地表径流
- 文献传递
- 阳春砂HMGR基因cDNA克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2016年
- 目的:克隆阳春砂3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)基因的编码区c DNA.方法:根据阳春砂叶片转录组得到的HMGR基因序列自主设计引物.用改良的CTAB法提取阳春砂叶片总RNA,反转录得到c DNA,以c DNA为模板通过PCR反应扩增阳春砂HMGR基因并克隆到p MD-18T载体,将获得的阳性克隆进行测序分析.运用生物信息学方法分析得到的c DNA序列.结果:成功扩增出全长1 716 bp的c DNA片段,将其成功克隆进入p MD-18T载体,测序后将序列提交至Gen Bank得到其编号KU572444.生物信息分析结果显示,该基因片段编码1个由571个氨基酸残基组成HMGR蛋白.HMGR二级结构主要由43.95%的α-螺旋和47.29%的β-转角组成,同时还含有8.76%的β-折叠.与其他植物该蛋白质序列同源性及进化树分析结果表明,阳春砂HMGR与小米(Setaria italic)的同源性最高,且阳春砂与单子叶植物聚为一类.结论:从阳春砂叶片中成功克隆HMGR基因并进行了生物信息学分析.
- 陈小保李帅广易善泽牛得伟周仁超王峰
- 关键词：阳春砂HMGR基因克隆生物信息学分析
