王小韵
- 作品数：14 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中山大学附属第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金澳门特别行政区科学技术发展基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
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- CHFR基因在肿瘤中的研究现状及意义
- 2012年
- 肿瘤的发生是一个复杂的生物学过程,主要是由于细胞内癌基因、抑癌基因及其他相关调节基因突变,从而使细胞基因组失去稳定性,最终导致肿瘤的发生。正常细胞的生长和分裂是一个高度复杂和精细的过程,为了确保细胞分裂的正常进行,每个细胞内均有一套严格的精确调控细胞增殖过程的监控系统——检查点,以维持基因组的稳定性。人类肿瘤的相关研究发现基因完整性的改变与有丝分裂检查点的功能缺失有关。
- 王小韵李小毛
- 关键词：CHFR基因人类肿瘤抑癌基因细胞分裂生物学过程细胞内
- 紫杉醇对PTEN不同状态的子宫内膜癌细胞株的作用及其机制探讨被引量：15
- 2011年
- 目的研究紫杉醇对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞株中的作用及其相关机制。方法利用慢病毒载体系统,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ish-ikawa细胞,建立PTEN基因敲除(HEC-1-RNAi)细胞及过表达(Ishikawa-PTEN)的细胞模型。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot观察磷酸化AKT蛋白和Caspase-3蛋白的表达。结果紫杉醇对不同PTEN状态的细胞株均有明显的生长抑制作用,抑制率与时间、剂量成正相关。紫杉醇处理不同PTEN状态的细胞24h后,PTEN阳性细胞的IC50和磷酸化AKT蛋白水平明显低于PTEN阴性细胞,PTEN阳性细胞的凋亡率、Caspase-3的蛋白水平明显高于PTEN阴性细胞。结论 PTEN基因能增加子宫内膜癌细胞株对紫杉醇的敏感性,其可能与抑制PI3K/AKT信号通路,增强Caspase-3蛋白表达有关。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：紫杉醇PTEN基因PI3KCASPASE-3慢病毒载体
- 洛伐他汀诱导人子宫内膜癌JEC细胞G_1期同步化的研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨洛伐他汀(Lov)诱导人子宫内膜癌JEC细胞G1期同步化的方法及JEC细胞解除G1期同步化后的细胞周期进程。方法:CCK-8法测定JEC细胞的倍增时间,采用10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L和40μmol/L的Lov,作用1×细胞倍增时间进行流式细胞术检测G1期细胞的比例,获得G1期同步化的最佳Lov浓度;采用最佳浓度作用JEC细胞,于作用后的0.5×倍增时间～2×倍增时间内,每隔4 h检测同步化程度,获得最佳浓度Lov作用下的最佳同步化时间;解除G1期同步化,每隔4 h检测一次,研究JEC细胞解除G1期同步化后的细胞周期进程。结果:CCK-8法检测显示JEC细胞的倍增时间约为24 h;JEC细胞的最佳G1期同步化条件为:20μmol/L Lov作用24 h,可获取G1期细胞(85.00±0.79)%;JEC细胞于解除G1期同步化后16 h,获得最大量的S期细胞,为(45.28±0.53)%;同时G1期细胞比例达到最低,为(35.93±0.44)%。结论:20μmol/L Lov作用24 h,可获得大量G1期细胞;解除G1期同步化后16 h,S期细胞比例最高,G1期细胞比例达到最低,达到满意的G1期同步化释放后效果。
- 沈慧敏李小毛杨越波王小韵
- 关键词：洛伐他汀细胞周期
- 雷帕霉素增强子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨mTOR抑制剂雷帕霉素联合阿霉素对子宫内膜癌细胞株的影响及其机制。方法:选用2株不同PTEN状态的子宫内膜癌细胞株:HEC-1A(PTEN野生型)和Ishikawa(PTEN突变型),分别给予低浓度雷帕霉素预处理24 h,再使用阿霉素,MTT法检测联合用药前后阿霉素24 h IC50及细胞生存率的变化,计算两药的联合指数;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting观察PI3K/Akt通路的蛋白磷酸化和凋亡蛋白caspase-3的变化。结果:(1)雷帕霉素或阿霉素单药使用时均明显抑制2株子宫内膜癌细胞的生长。抑制率与时间、剂量呈正相关。使用10 nmol/L雷帕霉素预处理24 h后,阿霉素作用Ishikawa细胞的IC50由(21.3±3.8)μmol/L降到(11.9±1.2)μmol/L(P<0.05);而HEC-1A细胞的IC50由(14.3±2.8)μmol/L降到(8.2±0.9)μmol/L(P<0.05);2株细胞中阿霉素与雷帕霉素的联合指数均大于1.15,提示在2种细胞株中两药均有协同作用;(2)联合用药后,凋亡率较单药使用组明显升高(P<0.05);同时,p-Akt蛋白表达下降,而活化的caspase-3表达上调。结论:雷帕霉素能增加子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性,从而降低肿瘤细胞对药物的耐药性,具有良好的抗肿瘤前景。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：子宫内膜肿瘤阿霉素雷帕霉素PI3K/AKT通路
- 重组人苗勒抑制物对2株卵巢癌细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨重组人苗勒抑制物(rhMIS)对人卵巢癌细胞株OVCAR8及SKOV3细胞生长的影响。方法:Western blotting检测细胞中MISII型受体(MISIIR)蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察MISIIR蛋白在细胞中定位。rhMIS分别干预2株卵巢癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化;软琼脂克隆实验检测细胞体外成瘤性;流式细胞术分析rhMIS对细胞凋亡和细胞周期影响。结果:OVCAR8细胞表达MISIIR蛋白,其定位于细胞表面及细胞质中,SKOV3细胞中MISIIR蛋白表达缺损。经rhMIS作用48h后,OVCAR8细胞的生长速率显著减慢、细胞体外成瘤性明显降低、细胞发生凋亡和G1期细胞增加,rhMIS(10mg/L)干预后细胞凋亡率和G1期细胞比率分别可高达(31.3±2.1)%和(70.4±3.0)%,与SKOV3细胞比较差异显著(P<0.01)。结论:重组人苗勒抑制物可以抑制MISIIR蛋白表达的卵巢癌细胞增殖、诱导其凋亡、阻滞细胞周期,这有望成为治疗卵巢癌的一个新靶点。
- 肖兰杨越波李田王小韵李小毛
- 关键词：卵巢肿瘤受体
- CHFR在子宫内膜癌细胞中的表达和甲基化调控被引量：1
- 2011年
- 目的:研究CHFR在人子宫内膜癌细胞株中的表达和甲基化状态,以及去甲基化处理后对子宫内膜癌细胞克隆形成能力的影响。方法:半定量RT-PCR和Western blotting检测CHFR在子宫内膜癌细胞株的表达情况,甲基化特异性PCR检测CHFR的甲基化情况,用5-氨杂胞苷(5-aza)去甲基化处理RL-952细胞后再检测CHFR的表达和及其基因甲基化状态,平板克隆形成实验检测去甲基化对RL-952细胞的克隆形成能力的影响。结果:CHFR在子宫内膜癌细胞株中的表达均比正常成纤维细胞(NF)低,特别在RL-952细胞中表达显著降低。CHFR弱表达的RL-952细胞中CHFR异常高甲基化,而CHFR高表达的NF和ISH细胞均未见甲基化。用5-aza去甲基化处理RL-952细胞后,CHFR甲基化条带消失,其mRNA和蛋白表达明显增加,克隆形成率显著降低。结论:CHFR启动子甲基化是导致子宫内膜癌细胞中CHFR表达降低的主要原因,5-aza能恢复CHFR在子宫内膜癌细胞中的表达,并抑制癌细胞的克隆形成能力。
- 王小韵杨越波李小毛许成芳方莉张旭
- 关键词：甲基化
- 子宫内膜癌的基因热点研究被引量：4
- 2008年
- 子宫内膜癌（endometrial carcinoma）为女性生殖道常见的三大恶性肿瘤之一，发病率逐年上升，全球每年约有142000位妇女患子宫内膜癌。在美国，子宫内膜癌与子宫颈癌的发病比率从20世纪60年代的1：10上升到现今的1：1。
- 李小毛王小韵
- 关键词：子宫内膜癌基因女性生殖道恶性肿瘤子宫颈癌发病率
- PTEN基因对子宫内膜癌细胞PI3K/AKT通路的影响被引量：5
- 2011年
- 【目的】探讨PTEN基因在子宫内膜癌PI3K/AKT通路中的作用,评估PTEN基因在抗肿瘤治疗中的意义。【方法】利用慢病毒载体系统,构建人PTEN基因RNA干扰慢病毒载体和PTEN基因过表达慢病毒载体,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ishikawa细胞,建立PTEN基因敲减及过表达的细胞模型,Western blot方法检测PTEN基因敲减或过表达前后PTEN蛋白的表达和AKT通路的活化情况,MTT法检测慢病毒转染前后细胞增殖的变化,流式细胞术检测慢病毒转染前后细胞周期及细胞凋亡率的变化。【结果】①HEC-1A细胞转染PTEN基因干扰慢病毒载体后,细胞的增殖曲线和细胞凋亡率与对照组比较无明显变化。但Ishikawa细胞转染PTEN基因过表达慢病毒载体后,增殖曲线和细胞凋亡率显示其生长呈明显抑制状态。②当HEC-1A细胞转染了RNA干扰病毒后(HEC-1A-RNAi),Western blot结果显示PTEN蛋白表达下调,其EGFR,p-EGFR,mTOR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达增强,当Ishikawa细胞转染了过表达载体病毒后(Ishikawa-PTEN),Western blot结果显示其PTEN蛋白表达上调,p-EGFR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达减弱。③HEC-1A-RNAi细胞周期中G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,Ishikawa-PTEN细胞周期中G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。【结论】PTEN基因可以抑制细胞增殖过程,有可能成为子宫内膜癌患者基因治疗的选择之一。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：慢病毒载体PTEN基因AKTPI3K
- Survivin、ER、PR在子宫内膜癌组织中的表达及相关性分析被引量：6
- 2011年
- 目的:研究子宫内膜癌中Survivin蛋白、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况及Survivin蛋白的表达与ER、PR表达的相关性,并探讨其临床病理意义。方法:应用免疫组化SP法检测26例子宫内膜癌组织、11例癌旁组织、30例正常组织中Survivin蛋白的表达情况及26例子宫内膜癌组织中ER、PR蛋白的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果:(1)Survivin在子宫内膜癌中的阳性表达率为92.31%(24/26),显著高于正常子宫内膜(26.67%)(P<0.001),但与癌旁组织中的Survivin表达量(81.82%)无统计学差异(P>0.05)。(2)ER在子宫内膜癌中的阳性表达率为73.08%(19/26),PR的阳性表达率为80.77%(21/26),二者的表达存在正相关(r=0.6194,P<0.001)。(3)Survivin与ER在子宫内膜癌中的表达呈正相关(r=0.4229,P=0.0153<0.05),与PR的表达呈正相关(r=0.5021,P=0.0026<0.05)。结论:Survivin蛋白在子宫内膜癌中的过表达是肿瘤发生、发展中的早期事件,Survivin、PR、ER水平的联合检测在子宫内膜癌的早期诊断方面有一定的指导意义。
- 张旭杨越波李小毛王小韵
- 关键词：子宫内膜肿瘤SURVIVIN蛋白
- 食补“雌激素”,安度更年期
- 2010年
- 围绝经期（旧称更年期）是女性一生中的重要时期，绝经前后由于雌激素水平波动或下降所致的植物神经系统功能紊乱，不少女性会出现情绪不稳定、激动易怒、血压波动、骨质疏松等诸多症状。对于围绝经期带来的身体不适，多数人把眼光都集中在补充维生素和微量元素上。
- 王小韵
- 关键词：更年期植物神经系统功能紊乱食补血压波动情绪不稳定补充维生素
