王大鹏
- 作品数:9 被引量:43H指数:4
- 供职机构:华中农业大学更多>>
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- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪萎缩性鼻炎诊断方法研究进展被引量:10
- 2006年
- 猪萎缩性鼻炎是世界上公认的危害集约化养猪生产的重要疾病之一,并且已成为难于培育无特定病原猪群的四大疾病之一。在国内,随着集约化养殖程度的不断提高,猪萎缩性鼻炎曾一度暴发流行,造成很大的经济损失。因此,猪萎缩性鼻炎的诊断方法对于该病的监测和控制具有重要的意义。文章对该病的细菌学、免疫学和分子生物学诊断方法进行了概述。
- 裴洁吴斌王大鹏
- 关键词:萎缩性鼻炎
- 一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及应用
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域,具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis,PAR)中的应用。该...
- 吴斌汤细彪王大鹏罗勇卢顺陈焕春
- 文献传递
- 应用双重PCR检测产毒素多杀性巴氏杆菌被引量:9
- 2005年
- 参照有关文献设计了2对引物,分别扩增多杀性巴氏杆菌的Kmt及toxA基因,以使同时检测并区分产毒素与非产毒素多杀性巴氏杆菌。该PCR能检出103cfu菌量的模板。特异性试验表明,这2对引物都不能从猪的其他6种常见病原菌扩出特异性的带。对扩增的2个PCR产物测序结果表明,2序列都有很高的保守性,从而进一步证明了该PCR方法的特异性及灵敏性。临床应用,从386份病料分离出66株多杀性巴氏杆菌,其中有8株均能同时扩出457bp和864bp的片段,而其他54株只能扩出457bp的片段。
- 唐先春吴斌刘国平刘建杰王大鹏陈焕春
- 关键词:产毒多杀性巴氏杆菌PCR
- 猪源D型产毒素多杀性巴氏杆菌toxA基因的克隆与表达被引量:8
- 2006年
- 皮肤坏死毒素(Dermonecrotictoxin,DNT)是产毒素多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteurellamultocida,T+Pm)的主要毒力因子和保护性抗原。以猪源D型T+Pm的基因组DNA为模板,用PCR方法扩增得到了编码DNT的toxA全基因编码序列,共4019bp。将其克隆到pMD18-T载体并测序,结果表明,toxA基因序列与GenBank已报道的5个toxA基因序列的同源性达99.8%以上。将该基因亚克隆到原核表达载体pGEX-KG的GST基因下游,转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导表达,获得大小约173000的融合蛋白。Westernblot结果表明,该融合蛋白具有良好的反应原性。动物试验表明,该重组蛋白可以诱导小鼠产生高水平的抗体,并可抵抗致死剂量的天然DNT毒素攻击。
- 王大鹏吴斌周锐唐先春陈焕春
- 关键词:克隆
- 日本花柏木材管胞解剖特征与基本密度的变异
- 本文主要研究了日本花柏人工林木材晚材率、解剖特征(管胞形态、微纤丝角)和基本密度的径向与轴向变异规律及各指标之间的相互关系,并对日本花柏木材幼龄期做了深入的研究。研究结果表明:
年轮宽度在径向上从髓心向外基本呈...
- 王大鹏
- 关键词:日本花柏晚材率管胞形态微纤丝角基本密度
- 文献传递
- 猪源多杀性巴氏杆菌ompH基因的克隆、表达被引量:15
- 2005年
- 利用已分离的菌株030224HB,根据NCBI上的序列(U52208)设计了一对引物,用PCR方法扩增了猪源多杀性巴氏杆菌的外膜蛋白基因(ompH),扩增的片段大小为1114bp(ORF为960bp),并克隆到载体pMD18T(TVector),测序表明该基因相当保守。用pET28b构建了原核表达载体pET28bompH,转化BL21并诱导表达,SDSPAGE结果显示表达蛋白约为35ku,与报道大小相近。Westernblot结果表明表达的蛋白质具有生物学活性,然后用所表达的蛋白做了ELISA检测方法的初步探讨。
- 吴斌唐先春陈焕春王大鹏
- 关键词:多杀性巴氏杆菌克隆原核表达ELISA
- 产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因克隆、表达及表达蛋白生物学特性研究
- 产毒多杀性巴氏杆菌(toxigenicPasteurellamultocida,T+Pm)是猪进行性萎缩性鼻炎(Swineprogressiveatrophicrhinitis,PAR)的主要病原菌。该菌分泌产生的多杀性...
- 王大鹏
- 关键词:巴氏杆菌基因克隆
- 文献传递
- 产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因克隆、表达及表达蛋白生物学特性研究
- 产毒多杀性巴氏杆菌(toxigenic Pasteurella multocida,TPm)是猪进行性萎缩性鼻炎(Swine progressive atrophic rhinitis,PAR)的主要病原菌。该菌分泌产生...
- 王大鹏
- 关键词:产毒多杀性巴氏杆菌
- 文献传递
- 一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及应用
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域,具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis,PAR)中的应用。该...
- 吴斌汤细彪王大鹏罗勇卢顺陈焕春
- 文献传递