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油桐丙二酰单酰CoA:ACP转酰基酶的克隆与序列分析被引量：8: 2014年; 为了深入了解油桐丙二酰单酰辅酶A酰基载体蛋白转酰基酶(Malonyl Co A:ACP transacylase,MCAT)在油脂合成代谢过程中的作用,利用RT-PCR技术克隆获得了油桐MCAT基因序列,且命名为Vf MCAT,并利用相关生物软件对该基因序列及其相应蛋白质进行了生物信息学分析。结果表明:Vf MCAT的CDS长为1 179 bp,编码392个氨基酸;该蛋白与蓖麻和亚麻的MCAT同源性均达85%,存在"GXSXG"和"GQGXQ"两个高度保守的motif,在系统进化关系上,其与蓖麻和亚麻的亲缘关系最为接近;分析其氨基酸序列后发现,Vf MCAT的分子量约为41.67 KDa,理论等电点p I为8.43,是一个含有一个跨膜结构域的可溶性稳定蛋白;对其二级和三级结构的预测结果表明,该蛋白主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,且最有可能在线粒体中发挥其主要作用,文中由此推测,Vf MCAT在叶绿体中参与了油桐脂肪酸合成代谢。; 刘美兰谭晓风龙洪旭王哲刘璐王僳僳; 关键词：油桐生物信息学分析

油桐delta 8脱饱和酶基因的全长cDNA克隆及序列分析被引量：5: 2015年; 桐油是制备生物柴油的优势原料。delta 8脱饱和酶基因与植物膜脂、鞘磷脂的生物合成及细胞信号传递途径有关。通过简并PCR扩增、3’RACE、5’RACE及编码区扩增获得了油桐delta 8脱饱和酶的全长c DNA序列。该基因全长1 787 bp,ORF的长度为1 344 bp,编码447个氨基酸。经过网上比对分析,发现油桐delta 8脱饱和酶与其它植物的此基因具有较高同源性,其中与蓖麻脂肪酸去饱和酶相似度达83%。研究结果为揭示油桐油脂合成途径及分子定向育种奠定基础。; 龙洪旭谭晓风张琳曾艳玲李泽王哲; 关键词：油桐 DELTA 简并PCR

油桐异质型乙酰辅酶A羧化酶accA亚基全长cDNA克隆及序列分析被引量：2: 2014年; 为了揭示油桐乙酰辅酶A羧化酶accA基因的序列特点和结构功能,从而为该基因的深入研究和开发利用奠定基础,以葡萄桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐乙酰辅酶A羧化酶α亚基全长cDNA序列。测序结果表明:该基因cDNA序列全长2 313 bp,编码770个氨基酸;以其推导出的α亚基氨基酸序列蛋白的等电点pI为8.48,相对分子量为85 902.7 Da,稳定系数为37.33。生物信息学分析结果表明:此蛋白含有4个比较明显的跨膜区,是一个不稳定的非分泌蛋白。模体搜索结果表明:在α亚基上有羧基转移酶域和ACCA功能域;其三级结构中有14个α螺旋,整体呈球型,并有一个向外延伸的结构。该基因已登录到GenBank,命名为VfCTα。; 王哲谭晓风龙洪旭陈昊; 关键词：油桐乙酰辅酶A羧化酶

油桐乙酰辅酶A羧化酶BC亚基全长cDNA克隆及序列分析被引量：8: 2015年; 以葡萄桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐乙酰辅酶A羧化酶BC亚基基因的全长c DN A序列。该基因c DNA序列全长1 605 bp,编码534个氨基酸。推导出的BC亚基氨基酸序列蛋白的等电点p I为7.98,相对分子量58 262.0 Da,稳定系数为38.13,生物信息学分析表明,此蛋白含有2个比较明显的跨膜区,是一个不稳定的非分泌蛋白。模体搜索结果表明在BC上具有ATP结合位点。三级结构中有16个α螺旋,3个部分形成一个内凹的结构。; 王哲谭晓风龙洪旭; 关键词：油桐乙酰辅酶A羧化酶

油桐LACS4和LACS8基因克隆及其表达分析被引量：7: 2015年; 以油桐的近成熟种子为材料,根据油桐转录组测序结果设计引物,采用RT-PCR技术克隆了油桐长链脂酰辅酶A合成酶基因家族的两个成员的全长cDNA序列,分别命名为VfLACS4(Gen Bank登录号:KP996689)和VfLACS8(Gen Bank登录号:KT362743),通过实时定量PCR的方法检测了不同组织部位和种子不同发育时期该基因的表达水平,并采用索式提取法测定了种子发育时期的油脂含量。结果表明:VfLACS4的CDS长度为1 989 bp,编码662个氨基酸,与其他物种的LACS4氨基酸序列具有较高的相似性,其中与蓖麻的LACS4相似性最高;VfLACS8的CDS长度为2 199 bp,编码732个氨基酸,与麻疯树和蓖麻的LACS8具有较高的相似性;实时定量RT-PCR结果表明VfLACS4基因在花、茎、叶和根中均有少量表达,并在种子发育的10月10日表达量达到最大;VfLACS8基因在种子、花、茎、叶和根中均有一定量的表达,在雌蕊中的表达量最高;油桐种子发育过程中的油脂积累呈现出"S"型,Vf LACS8基因的在发育种子中的表达模式与之相一致,推测VfLACS8基因与种子发育过程中的油脂积累相关。; 李捷宇龙洪旭张琳王哲李泽谭晓风; 关键词：油桐基因克隆基因表达

油桐异质型ACCase基因的克隆及功能表达研究: 油桐，作为中国的独有经济林木，与乌桕、核桃、油茶共称为我国的四大木本油料植物。桐油富含桐酸等不饱和脂肪酸，具有光泽度好、不导电性、不透水性、抗酸碱、耐锈蚀、耐腐蚀、耐热等特质，蕴含着非常高的经济价值，是重要的工业原料，被...; 王哲; 关键词：油桐基因克隆基因表达

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王哲