王凯
- 作品数:25 被引量:31H指数:3
- 供职机构:南京军区南京总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生哲学宗教农业科学水利工程更多>>
- 肽基精氨酸脱亚氨酶在类风湿关节炎中的研究进展被引量:2
- 2010年
- 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种抗原驱动、T细胞介导的自身免疫病,以多关节损伤和各种关节外炎症表现为主要特征,具有较高致残性,其确切病因和发病机制至今尚不完全清楚,可能与多种遗传囚素和环境因素共同作用有关,深入探讨RA发病机制将对提高RA治疗水平和改善患者预后至关重要。近年来的研究表明,抗原性蛋白或多肽的瓜氨酸化可能参与RA的发病过程。
- 王凯李晓军
- 关键词:类风湿关节炎精氨酸自身免疫病T细胞介导炎症表现关节损伤
- 人软骨糖蛋白-39对CIA大鼠淋巴细胞体外增殖作用的研究
- 背景类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜为主要靶器官的慢性系统性炎症性的自身免疫性疾病,而其发病机制尚不明确。。人软骨糖蛋白-39(human cartilageglycopro...
- 夏海萍白彩琴张晶虞伟李晓军王凯高德玉武建国
- 文献传递
- 抗瓜氨酸化蛋白抗体循环免疫复合物对滑膜细胞功能影响的研究
- 李晓军王凯赵建宁吴俊严孝岭白彩琴高德玉虞伟赵晓琴
- 抗人Id3蛋白多克隆抗体的制备及其在肿瘤细胞内的定位研究
- 2010年
- 目的:表达及纯化重组人分化抑制因子3(Id3)蛋白,制备兔抗人Id3多克隆抗体。方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化重组人Id3融合蛋白,以纯化Id3重组蛋白为免疫原,免疫新西兰家兔,制备兔抗人Id3多克隆抗体,通过亲合层析实验去除抗血清中非特异性成分,免疫双向扩散、间接ELISA及Western blot法检测抗体效价和特异性。用间接免疫荧光试验(IFA)对人乳腺上皮癌细胞(MCF7)、人前列腺癌细胞(PC-3M)、人肺腺癌细胞(A549)细胞内Id3表达进行定位研究。结果:SDS-PAGE电泳、Western blot分析证实,表达载体Id3/pET-32a在大肠杆菌BL21中经诱导可大量表达His-Tag Id3融合蛋白;表达产物通过镍离子亲和层析法纯化得到相对分子质量(Mr)为34 000的Id3融合蛋白;Id3重组蛋白免疫家兔获得的抗血清效价分别为1∶8(双向扩散)和1∶8 000(ELISA),Western blot分析表明抗体具有抗人Id3的良好特异性。IFA结果发现,A549细胞内Id3表达量很低;在MCF7和PC-3M细胞内,Id3呈高水平表达,且主要定位于核浆。结论:重组人Id3蛋白的表达纯化及抗人Id3多克隆抗体的研制为进一步研究该蛋白的功能及其临床应用研究提供了有利工具。
- 李晓军仲爱芳王凯贾丽陈芳芳虞伟
- 关键词:抗体A549细胞
- 抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物对类风湿关节滑膜细胞功能影响的研究被引量:11
- 2013年
- 目的:研究类风湿关节炎(RA)患者血清抗瓜氨酸化肽特异性免疫复合物(ACPA-IC)对RA患者关节成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖和分泌细胞因子功能的影响。方法:用PEG沉淀法提取RA患者血清免疫复合物(IC),ELISA法检测IC中ACPA-IC水平。用G蛋白免疫亲和层析法从6份ACPA-IC(+)RA血清、4份ACPA-IC(-)RA血清及10份正常人血清中提取IC。体外培养RA关节FLS;分别用RA ACPA-IC(+)提取物、ACPA-IC(-)提取物及健康人血清IC(C-IC)刺激FLS,用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂检测FLS增殖情况,液态芯片技术检测不同来源IC刺激对FLS分泌IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、GM-CSF、EGF、VEGF等11种细胞因子水平的影响。结果:RA患者ACPA-IC(+)提取物能够显著促进FLS增殖,与对照组IC比较,在培养24小时时间里,四种浓度(25、50、75和100μg/ml)的ACPA-IC都能显著促进FLS增殖。RA患者血清ACPA-IC(+)和ACPA-IC(-)提取物刺激FLS 24小时后,可诱导细胞分泌大量IL-6、IL-8和GM-CSF;其中ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌GM-CSF和IL-8量均显著高于ACPA-IC(-)组和C-IC组,ACPA-IC(+)组刺激FLS分泌IL-6水平显著高于C-IC组,但与ACPA-IC(-)组无显著性差异。三组间刺激分泌IL-1β、IL-2、IL-10、IL-15、IL-17、TNF-α、EGF、VEGF等其他8种细胞因子含量均无显著性差异。结论:RA患者血清ACPA-IC可促进FLS增殖,并诱导其分泌IL-6、IL-8和GM-CSF等炎性细胞因子,进而进一步诱发滑膜炎症反应及骨质破坏。
- 高德玉陈芳芳刘阳王凯虞伟严孝岭李晓军
- 基于CIA大鼠两种抗原短肽特异性自身免疫反应的实验研究
- 目的建立大鼠模型,观察环瓜氨酸肽(CCP)及II型胶原短肽(CⅡ260-272)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠淋巴细胞激活作用的影响,同时对CIA大鼠血清中相关自身抗体进行检测,探讨CIA大鼠在成模过程中特异性自身免疫...
- 虞伟白彩琴夏海萍张晶王凯李晓军武建国
- 小肠移植术后移植物慢性失功能(个案报道及文献复习)
- 本文报道了一例小肠移植术后移植物慢性失功能并对文献进行复习。研究指出小肠移植术后移植物慢性失功可根据病情的不同予以对症处理或手术治疗;对于不可逆的移植物慢性失功应及时切除移植物,并为再次移植做准备。
- 李幼生黎介寿李宁李元新王剑郑磊王凯
- 关键词:小肠移植术对症处理
- 文献传递
- Bioelectrical Impedance Analysis Guided-FluidManagement Decreases the Fluid Overload andPromotes Earlier Fascial Closure in Open Abdomen
- 丁威威王凯黎介寿
- 特异性ACPA免疫复合物ELISA检测法的建立及其应用
- 目的建立检测特异性ACPA免疫复合物(ACPA-IC)的ELISA法,观察ACPA-IC检测在类风湿关节炎(RA)诊断中的应用价值。方法将兔抗人抗瓜氨酸化蛋白抗体(ACPA)作为包被抗体,HRP-抗人IgG为酶标抗体,建...
- 王凯虞伟高德玉白彩琴严孝岭李晓军
- 文献传递
- ID3蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义
- 目的:研究ID3蛋白在前列腺癌中的表达及与临床病理学参数的意义。 方法:应用间接免疫荧光技术检测ID3在PC-3M细胞中的表达情况;应用酶免疫组织化学染色技术检测29例前列腺癌和15例前列腺增生标本中ID3的表达情况,...
- 王凯李晓军印洪林周航波陈芳芳王海马恒辉
- 关键词:前列腺癌细胞表达临床病理学
- 文献传递