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王凌华: 作品数：23 被引量：171H指数：7; 供职机构：上海交通大学生命科学技术学院微生物代谢国家重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划上海市科技兴农重点攻关项目更多>>; 相关领域：环境科学与工程医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>

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喹啉废水反硝化反应器中优势菌的代谢功能分析被引量：6: 2010年; 采用纯培养技术对一个降解喹啉的反硝化反应器筛选到的26株优势菌株进行反硝化能力以及好氧降解喹啉能力研究,其中的反硝化菌还测定了反硝化条件下的喹啉降解能力。结果发现Bacillus、Staphylococcus、Pseudomonas、Brucella、Delftia等5个属的10株菌具有反硝化能力,Rhodococcus属的9株细菌能够好氧降解喹啉,揭示了反硝化喹啉降解反应器中主要细菌类型的代谢特性,发现在缺氧反硝化反应器中存在多样的代谢类型的细菌。; 仲汇慧张晓君岳思青袁飞王凌华赵立平; 关键词：喹啉反硝化降解率群落

定量PCR比较两种苦瓜制品对人肠道菌群结构的体外调节作用被引量：1: 2014年; 目的通过体外厌氧培养联合定量PCR的方法比较两种不同的苦瓜制品,苦瓜全粉(Bitter melon power,BMP)和苦瓜乙醇提取物(Bitter melon ethanol extract,BME),对健康人和2型糖尿患者肠道菌群结构的调节作用。方法采集一名健康个体和一名2型糖尿病个体的新鲜粪便样品,在体外厌氧的条件下与不同浓度的BMP或BME共培养,收集0、12、24、48 h的菌体沉淀。采用定量PCR的方法,检测乳杆菌属细菌、双歧杆菌属细菌、丁酸盐产生菌、硫酸盐还原菌和肠杆菌科细菌这5类细菌在总菌中相对含量的变化。结果培养过程中,双歧杆菌属细菌、硫酸盐还原菌和肠杆菌科细菌在两名个体培养样本中表现出类似的生长趋势,而乳杆菌属细菌和丁酸盐产生菌则有差异。相同培养时间下,与对照组相比,BMP和BME在两名个体的培养样本中均能富集乳杆菌属细菌、双歧杆菌属细菌和丁酸盐产生菌,并抑制肠杆菌科细菌,但是只有BMP 15 mg/mL能持续抑制硫酸盐还原菌。相同浓度之下,BMP对菌群结构的调节效果比BME显著。结论来自不同个体的相同肠道细菌类群可能呈现不同的体外生长趋势,但BMP和BME均能对同一细菌类群起到类似的调节作用;且相较于BME,BMP通过富集一些有益细菌并抑制机会致病细菌从而改善肠道菌群结构的效果更显著。; 何欣欣徐佳宋岷埈张旭龙文敏王凌华; 关键词：肠道菌群定量PCR

PCR指纹图谱技术在酸奶质量监测中的应用被引量：7: 2006年; 用PCR指纹图谱技术对市售某品牌酸奶进行了短期动态监测,对于收集的3个生产批次的9个酸奶样品,用ERIC(EnterobacterialRepetitiveIntergenicConsensus,肠杆菌基因间保守重复序列)-PCR和PCR-DGGE(DenaturingGradientGelElectrophoresis,变性梯度凝胶电泳)指纹图谱技术对其菌种组成及其稳定性进行评价。ER-IC-PCR指纹图谱聚类分析结果显示,同一生产批次内3个不同包装的样品ERIC-PCR指纹图谱相似性为90%左右,而不同生产批次样品之间ERIC-PCR指纹图谱相似性有所下降,为82%。该结果进一步用DGGE指纹图谱进行证实。DGGE分析结果表明,G2样品明显缺少一条主带,经割胶回收测序发现,这条主带代表的微生物是Lacto-bacillusdelbrueckiisubsp.Bulgaricus,说明该产品不同生产批次间的稳定性不是很好。DGGE图谱和测序结果还显示,除G2样品外,该酸奶样品的菌种组成与产品标签说明是一致的。; 李武赵勇王凌华张晓君赵立平; 关键词：酸奶 REPETITIVE INTERGENIC

人母乳中分离的链球菌菌悬液的制备及其对新生小鼠成活率的影响: 2021年; 为研究出生至4周龄每天口服107CFU母乳链球菌对新生小鼠的影响,需要制备在-80℃冻存4周、解冻后仍有至少1×109CFU/mL活菌的菌悬液。前期分离到人母乳链球菌Streptococus salivarius F286和S.parasanguinis F278。S. salivarius F286和S. parasanguinis F278在M17液体培养基厌氧生长至平台期时,活菌浓度高于1×10^(9)CFU/mL,分别用M17、M17+10%脱脂牛乳、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、PBS+10%脱脂牛乳将平台期的S. salivarius F286和S. parasanguinis F278制成不浓缩或5倍浓缩的菌悬液,-80℃冻存4周后,只有PBS+10%脱脂牛乳制备的5倍浓缩的S. salivarius F286菌悬液和M17制备的S. parasanguinis F278菌悬液解冻后活菌数量始终高于1×10^(9)CFU/mL。因为化学成分复杂的M17培养基可能影响动物的代谢和免疫,因此用含有PBS、10%脱脂牛乳和链球菌的菌悬液口饲动物。仔鼠出生后1~14 d,每天口饲解冻的、含有10^(7)CFU S. salivarius F286的PBS+10%脱脂牛乳菌悬液,或者新鲜制备的、含有10^(7)CFU S. parasanguinis F278的PBS菌悬液以及等体积20%脱脂牛乳,仔鼠成活率约为83%(其余仔鼠死于母鼠拒绝喂养),说明107CFU的S. salivarius F286或S. parasanguinis F278不会引起仔鼠感染死亡。本研究中,我们比较不同方法制备的菌悬液在-80℃冻存后细菌的存活量,确定最优的菌悬液制备方法,并评估细菌对仔鼠成活率的影响,确定了两株母乳链球菌的生物安全性,本实验流程对制备和保存用于灌胃/口饲动物的其他种类细菌的菌悬液具有借鉴意义。; 李硕王晨伟王凌华申剑; 关键词：母乳链球菌

益生菌质量评价的分子生态学方法的研究: 王凌华; 关键词：益生菌变性梯度凝胶电泳偏最小二乘法

熟化马铃薯粉调节肥胖小鼠肠道菌群组成并恢复糖脂代谢稳态被引量：2: 2021年; 本研究通过饲喂小鼠(Mus musculus)高脂饮食10周以构建饮食诱导的肥胖小鼠模型,随后向正常饮食中加入热加工熟化的马铃薯(Solanum tuberosum L.)对其进行为期7周的干预,测定小鼠糖代谢和脂代谢相关指标,基于16S rRNA基因高通量测序技术,分析小鼠肠道菌群的变化,并采用Spearman相关性分析解析该变化与肥胖表型的关系。7周的干预使小鼠体重下降了16.1%,小鼠肝脏、胰脏和脂肪组织的重量显著降低。小鼠空腹胰岛素水平、胰岛素抵抗稳态模型(HOMA-IR)指数、血清中总胆固醇(TC)浓度和低密度脂蛋白胆固醇比例(LDL-C/TC),以及肝脏中甘油三酯(TG)的浓度均显著下降,同时血清中高密度脂蛋白胆固醇比例(HDL-C/TC)升高。测序结果表明,马铃薯显著降低了肠道菌群的α多样性,并改变了肠道菌群结构。通过随机森林模型鉴定出了23个响应马铃薯干预的关键扩增子序列变异体(amplicon sequence variants,ASVs),其中6个在马铃薯组中富集,9个关键ASV与体重、脂肪重量、胰岛素等表型的变化具有显著的相关性。因此,马铃薯干预对肥胖表型的改善与肠道菌群的变化有关,表现为与表型的改善呈正相关的ASV被显著富集,同时与表型改善呈负相关的ASV的相对丰度被降低。综上所述,马铃薯可以通过调节肠道菌群改善肥胖宿主的糖脂代谢,是替代传统主食的更佳选择,有望成为针对肥胖等代谢疾病的功能性食品原材料。; 张静刘双刘航吴当金王正武吴金鸿王凌华; 关键词：糖代谢脂代谢

TGGE分析焦化废水处理系统活性污泥细菌种群动态变化及多样性被引量：34: 2003年; 应用 TGGE指纹图谱技术对两个曝气池细菌种群的动态变化及多样性进行了研究。每 3d进行 1次 ,共 8个监测时期中同一曝气池活性污泥的 1 6Sr DNA V3- PCR TGGE指纹图谱基本一致 ,图谱间的相似性系数 (Cs)为 1 0 0 %。同一曝气池不同位点活性污泥的 TGGE指纹图谱也完全一致。功能不同曝气池活性污泥 TGGE指纹图谱存在差异 ,Cs为 83.3%。对 TJ1活性污泥 TGGE图谱中 9条主要条带回收、扩增、克隆建库 ,每个条带选 4个转化子进行序列分析 ,结果显示 TGGE条带是由序列不同的片段组成。 32个序列在97%的相似性下分成 1 6个分类操作单元 (OTU) ,1 4个 OTU与 Gen Bank中已登录的细菌种群的同源性≥ 9 7% ,2个 OTU的同源性为 95%和 94%。与 1 0个 OTU同源性较高的细菌类群是在活性污泥或污染环境分离或发现的 ,与 8个 OTU相似的细菌类群目前尚无法分离培养。; 高平平晁群芳张学礼王凌华赵立平; 关键词：微生物种群结构 TGGE

分子生态学方法在微生物肥料质量监测中的应用被引量：4: 2006年; 应用PCR—DGGE技术对某微生物肥料的质量进行了跟踪监测，并结合分离培养和克隆文库分析对其菌种组成进行了检测。结果表明，同一生产批次3个不同包装样品的细菌和真菌DGGE（denaturing gradient gel eleetrophoresis）图谱相似性为80％-100％，3个不同生产批次之间DGGE图谱相似性为80％-88％，表明该微生物肥料的菌种组成的稳定性较好。但分离培养和克隆文库分析结果显示样品的菌种组成与产品标签说明之间存在较大差异。对于产品标注的6种微生物组成，只有Lactobacillus属的微生物可与之对应，其他检测到的Bacillus、Monascus、Brevibacillus、Psudomonas和Penicillium属的微生物并未包括在产品说明中。研究表明用分子生态学方法可以比较客观准确的对微生物肥料质量进行评估和峪测。; 李武王凌华赵勇张晓君潘迎捷赵立平; 关键词：微生物肥料

DNA指纹图技术分析微生物肥料菌种组成稳定性: 2005年; 目的分析2种市售微生物肥料在不同生产批次中微生物菌种组成的稳定性.方法利用ERIC-PCR基因组DNA指纹图技术和16S rDNA V3扩增一温度梯度凝胶电泳(PCR-TGGE)指纹图技术.结果这2种微生物肥料在同一个生产批次不同包装之间的2种DNA指纹图谱相似性较高,分别在78%～95%和96%～100%,表明同一个批次内的菌种组成比较一致.但其在不同的生产批次之间菌种组成差异存在显著性,反映在2种DNA指纹图谱上,不同生产批次样品间ERIC-PCR指纹图相似性最低只有10%,PCR-TGGE指纹图相似性最低为46%.结论通过ERIC-PCR和PCR-TGGE DNA指纹图技术可以对微生物肥料中菌种组成的稳定性进行快速、准确的分析,如何保持菌种组成在批次之间的稳定一致,是复合菌种微生物肥料质量控制中面临的难题.; 王凌华赵勇李武赵立平; 关键词：微生物肥料 ERIC-PCR DNA指纹图

灵芝发酵液浓缩固形物生物活性研究被引量：3: 2000年; 研究灵芝GL -2菌株发酵液浓缩固形物(胶囊剂)对巨噬细胞的影响 ,无论它在试管内或整体小鼠中都具有促进巨噬细胞的吞噬功能。此外 ,在护肝作用研究中 ,明显降低肝脏中毒小鼠的GPT活力 ,GOT亦有降低趋势。对小鼠的耐力研究中 ,游泳时间明显延长以及提高了耐缺氧的能力 ,对小鼠脂质过氧化的研究中 ,灵芝发酵液浓缩固形物(胶囊剂)能显著抑制50 %酒精所致的心、肝匀浆、肝线粒体的MDA(丙二醛); 唐涌濂黄瑞珊王凌华; 关键词：胶囊剂肝损伤免疫调节作用

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