从奥利亚罗非鱼精巢提取总RNA,采用RT和3’RACE(rapid amplification of cDNA ends)法分离和测定了奥利亚罗非鱼DMRT1(DM-related transcription factor1)cDNA的3’序列,扩增得到1086bp的片段,阅读框共编码254个氨基酸,序列分析结果表明,奥利亚罗非鱼DMRT1基因的氨基酸序列与尼罗罗非鱼DMRT1基因的同源性为99%,与黑鲷、黄鳝、新月鱼、虹鳟、青鳉鱼等动物的DMRT1cDNA和尼罗罗非鱼、奥利亚罗非鱼等动物的DMO(DM-domain gene in Ovary)cDNA的同源性分别为:80%、78%、73%、62%、41%、26%、26%。说明DM-RT1基因具有高度的保守性,在不同物种中差别较小,但是与DMO的同源性很低。
利用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆奥利亚罗非鱼(Oreochromis aurea)睾丸DMT(DM-do-main gene in testis)基因,并进行序列测定与分析。结果表明,该基因cDNA序列全长1 260 bp,包括74 bp 5’非翻译区,879 bp阅读框以及含poly(A)信号AATAAA的307 bp 3’非翻译区,阅读框共编码292个氨基酸。序列同源性分析表明,不同进化地位动物的DMRT1基因DM域编码序列存在高度同源性,显示DMRT1基因在系统进化上高度保守。生物信息学分析表明:DMT基因编码蛋白无信号肽,无跨膜区域,有多个蛋白激酶C、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号传导中发挥作用,且其生物活性可能接受信号途中多种信号的调控。该基因的成功克隆及生物信息学分析不仅为DMRT1基因的分子进化和相似性比较研究提供了新的材料,而且对进一步研究其编码蛋白的结构与功能以及其在鱼类性别调控中的作用具有重要意义。[中国水产科学,2007,14(1):23-31]
