梁晓
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 供职机构：汕头大学医学院中心实验室更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠急性脊髓损伤后血小板衍化生长因子-B的表达被引量：10
- 2007年
- 目的:探讨血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)在脊髓损伤(SCI)后对脊髓功能恢复的作用。方法:健康雌性SD大鼠48只随机分为免疫组化组(30只)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)组(18只)。麻醉后,用改制的Ⅱ型纽约大学装置建立大鼠脊髓急性损伤模型。用免疫组化检测急性SCI后不同时段PDGF-B在脊髓中的表达,用RT-PCR检测PDGF-B的mRNA在急性SCI后不同时段表达的变化。结果:①PDGF-B蛋白表达:急性SCI后24 h,PDGF-B在损伤区周围神经元的表达开始增加(5.92±3.23),并于7 d后维持在一定水平,14 d后PDGF-B阳性细胞数增多,28 d达高峰(85.00±13.49),主要表达于坏死区增生的神经胶质细胞。②PDGF-B mRNA表达:SCI后1 d,PDGF-B mRNA表达降低,3 d接近正常,随后略有下降,14 d后mRNA表达升高,28 d基本回到正常。结论:急性SCI后,PDGF-B对损伤脊髓的功能恢复有重要作用。
- 梁晓徐锡金张宝刘晓瑜
- 关键词：血小板衍化生长因子脊髓损伤神经营养因子
- 大鼠急性脊髓损伤后内源性垂体腺苷酸环化酶激活肽表达的变化
- 2007年
- 目的:观察大鼠脊髓损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽表达的变化,分析其在脊髓损伤中的意义,为进一步探索脊髓损伤后的再生修复机制和神经营养因子治疗脊髓损伤提供实验依据。方法:实验于2005-10/2006-09在汕头大学医学院生殖医学研究中心完成。①实验分组:选择清洁级健康成年雌性SD大鼠66只,随机抽签法分为损伤后1,3,7,14,28d组以及正常对照组,每组11只。②实验方法:改良的NYU装置制备脊髓损伤模型,对照组不做手术。损伤后1,3,7,14,28d麻醉取材。逆转录-聚合酶链反应扩增垂体腺苷酸环化酶激活肽。③实验评估:采用苏木精-伊红染色观察脊髓损伤后的病理变化,免疫组织化学检测阳性细胞计数,逆转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹方法检测脊髓组织中垂体腺苷酸环化酶激活肽蛋白及mRNA的表达情况。结果:纳入66只大鼠,均进入结果分析。①在蛋白和mRNA水平垂体腺苷酸环化酶激活肽表达呈时间相关性,正常对照组可见垂体腺苷酸环化酶激活肽mRNA和蛋白的少量表达,脊髓损伤后1d表达开始增加,7d时表达明显增加,与3d时比较差异有显著性意义(P<0.05)。②苏木精-伊红染色结果可见脊髓灰质出血水肿坏死,神经细胞变性死亡,免疫组织化学显示正常对照组神经元中有垂体腺苷酸环化酶激活肽阳性表达,损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽的表达逐渐增高,损伤7d时垂体腺苷酸环化酶激活肽表达明显增加(P<0.05),至28d时表达仍较高。结论:损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽表达增加,内源性垂体腺苷酸环化酶激活肽的增加可能有利于受损脊髓神经元的存活与再生。
- 徐锡金刘晓瑜梁晓霍霞
- 关键词：脊髓损伤垂体腺苷酸环化酶激活肽
- 大鼠脊髓损伤后垂体腺苷酸环化酶激活肽的超微结构观察
- 2007年
- 目的:观察大鼠脊髓损伤(SCI)后的超微病理变化及垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)的分布。方法:建立NYU大鼠SCI模型,于术后1 d取损伤节段及其上、下节段脊髓组织,包埋后作超薄切片,胶体金标记及常规铅铀染色后透射电镜观察。结果:电镜下见神经元胞浆及部分神经纤维中有胶体金颗粒,线粒体、内质网等细胞器水肿变性,神经细胞细胞膜、核膜不整齐,髓鞘扭曲变形,板层松解。结论:SCI后PACAP的表达可能与机体自身修复有关。
- 刘晓瑜徐锡金霍霞梁晓
- 关键词：脊髓损伤垂体腺苷酸环化酶激活肽胶体金电镜
- 大鼠急性脊髓损伤后血小板衍化生长因子-B的表达
- 研究背景:脊髓损伤后神经元的再生修复一直是神经科学领域的前沿课题。在脊髓损伤的病理过程中,多种神经营养因子参与其中。血小板衍化生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)是由多种细...
- 梁晓
- 关键词：血小板衍化生长因子脊髓损伤动物实验神经保护
- 文献传递
- 真核表达载体pIRES-EGFP-PDGF-B的构建及在293T细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人基因血小板衍化生长因子B(PDGF-B)真核表达载体pIRES-EGFP-PDGF-B,并在293T细胞中进行瞬间表达。方法:采用PCR方法从购自美国典型培养物保藏中心含有PDGF-B基因全长cDAN序列的质粒中扩增出PDGF-B的cDAN片段,并与真核表达载体pIRES-EGFP连接双酶切鉴定,最后采用Lipofectamine 2000将重组质粒转入293T细胞中,利用荧光显微镜和Westernblot进行表达鉴定。结果:真核表达载体pIRES-EGFP-PDGF-B被成功构建,双酶切鉴定正确,载体能在293T细胞内正确地表达成熟的PDGF-B蛋白,并可分泌到细胞外。结论:成功构建了PDGF-B真核表达载体,为进一步利用PDGF-B对脊髓损伤进行基因治疗奠定基础。
- 陈松建徐锡金霍霞张宝梁晓陈刚建
- 关键词：脊髓损伤真核表达
