梁旭东
- 作品数：13 被引量：41H指数：4
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重大科学仪器设备开发专项国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学轻工技术与工程更多>>
- 中国蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳标准化技术的建立与应用被引量：8
- 2015年
- 目的本研究旨在选择不同的内切酶和电泳条件对蜡样芽胞杆菌(蜡样杆菌)脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行评价,建立中国蜡样杆菌标准PFGE方法。方法蜡样ATCC国际标准菌株及分离自我国不同地区和来源的蜡样杆菌,制备胶块用溶菌酶和蛋白酶K分别裂解后,选用不同的内切酶对胶块内DNA进行酶切,比较PFGE电泳结果的分离度,评价获得最佳操作方案,选取51株蜡样杆菌菌株进行PFGE实验,对此实验方法进行评价分析。结果确立的蜡样杆菌PFGE分型方法的标准操作程序,可以较好地对蜡样杆菌进行分子分型研究,初步描述了51株蜡样杆菌菌株PFGE型别特征。结论实验确定的蜡样杆菌PFGE方法,可以为蜡样杆菌引起的食源性疾病及医院感染的溯源控制提供技术手段。
- 张慧娟潘琢魏建春张恩民梁旭东杜小莉崔志刚李伟
- 关键词：蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳食物中毒
- 一种无毒炭疽活疫苗及无毒炭疽菌株
- 本发明提供了一种无毒炭疽活疫苗，其活性成分包括表达炭疽保护性抗原突变体蛋白(rPA)的无毒炭疽菌株。所述无毒炭疽菌株是通过在原始Sterne疫苗株pXO1质粒上进行位点突变获得的，所述点突变为保护性抗原的R178A和K1...
- 梁旭东朱进卢金星
- 文献传递
- 蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳影响因素的研究被引量：3
- 2016年
- 目的通过比较蜡样芽胞杆菌(以下简称蜡样杆菌)脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术方法的影响因素,优化蜡样杆菌PFGE分型方法。方法在细菌收集、细胞裂解、胶块制备和电泳参数等环节设立对照,选取3株蜡样杆菌比较不同实验方案的电泳图谱结果。细菌收集设立LB固体培养基和液体培养基集菌法;细胞裂解设立灌制胶块前溶菌酶孵育组与未孵育组,设立单独溶菌酶裂解组和溶菌酶与溶葡萄球菌酶联合裂解组;细菌的胶块内裂解设立溶菌酶不同浓度和不同作用时间(2、4和16h)实验组;选取22株蜡样杆菌对3组电泳参数进行分析评价。结果 LB固体培养基集菌法与液体集菌法相比,获得了同样清晰或更清晰的条带。灌制胶块前溶菌酶与菌悬液进行一定时间的孵育可明显改善条带的清晰度。溶菌酶对胶块内细菌的裂解,4h为最佳裂解时间。溶葡萄球菌酶与溶菌酶联合使用未见对细菌裂解有改善作用。3组电泳参数(EP)的图谱差异有统计学意义(P<0.05),EP-a的相似性系数最小,为最佳电泳参数。结论试验确定了最佳蜡样杆菌PFGE实验方案,简化和优化了目前已有的蜡样杆菌PFGE实验方法,可应用于蜡样杆菌引起的暴发疫情分析及食源性病原菌的实验室分子分型研究。
- 张慧娟潘琢张恩民梁旭东李伟魏建春
- 关键词：蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳影响因素
- 一种二价炭疽疫苗
- 本发明提供一种基因工程二价(rPA+rLF)炭疽疫苗。其活性成分包括炭疽保护性抗原的R178A/K197A突变体蛋白rPA和致死因子的R491A/L514A突变体蛋白rLF。本发明所提供的疫苗选用保护性抗原PA和致死因子...
- 梁旭东朱进卢金星
- 一种二价炭疽疫苗
- 本发明提供一种基因工程二价(rPA+rLF)炭疽疫苗。其活性成分包括炭疽保护性抗原的R178A/K197A突变体蛋白rPA和致死因子的R491A/L514A突变体蛋白rLF。本发明所提供的疫苗选用保护性抗原PA和致死因子...
- 梁旭东朱进卢金星
- 文献传递
- 我国炭疽高发省(区)监测与控制及分子流行病学研究
- 梁旭东李爱芳马凤琴肖东楼俞东征林涛刘秉阳南俊华祁国明苏崇鳌
- 该成果对炭疽的流行病学、病原学、免疫学、生态学及分子流行病学进行了系统研究。摸清了我国炭疽的流行现状、流行规律及发病原因，制定了系统的防治措施，并用于现场，取得了良好的防治效果。应用质粒图谱、蛋白图谱、PCR、IS213...
- 关键词：
- 关键词：炭疽炭疽杆菌
- 一起炭疽疫情中炭疽病原检测方法的应用与评价被引量：3
- 2012年
- 目的分析总结一起炭疽疫情中应急检测的经验与问题,为炭疽疾病预防控制提供参考依据。方法采集报告的疑似皮肤炭疽患者皮损渗出液和静脉血标本,与病例相关的病死动物和土壤标本,渗出液采集采用载玻片直接蘸取和无菌棉签擦取2种方法,用涂片镜检、直接分离培养和肉汤增菌后分离培养细菌以及炭疽芽胞杆菌毒力基因PCR扩增方法检测病原,分析检测结果。结果共采集标本57份,病例标本占91.23%,病死牛肉及剖牛处土壤标本占8.77%。病例标本采集时间距发病时间最短1d,最长23d,平均6.62d。29例疑似皮肤炭疽患者在采样时其中16例(占55.17%)已使用抗生素类药物治疗,4例(占13.79%)未曾使用抗生素。从2例未使用抗生素的患者皮损渗出液和1份病死牛肉中分离到炭疽芽胞杆菌,分离阳性率为5.26%;其中1例患者皮损渗出液涂片镜检阳性;全部标本PCR扩增结果均为阴性。结论标本炭疽芽胞杆菌阳性检出率较低,与采样方法和采样时机关系较大,应加强部门间的沟通协作和人群的健康教育,做到疫情早报告、早确诊、早控制。
- 张慧娟梁旭东海岩李忠延袁海涛郭长山东晓晖魏建春
- 关键词：炭疽疫情
- 一种无毒炭疽活疫苗及无毒炭疽菌株
- 本发明提供了一种无毒炭疽活疫苗，其活性成分包括表达炭疽保护性抗原突变体蛋白(rPA)的无毒炭疽菌株。所述无毒炭疽菌株是通过在原始Sterne疫苗株pXO1质粒上进行位点突变获得的，所述点突变为保护性抗原的R178A和K1...
- 梁旭东朱进卢金星
- AP631炭疽噬菌体裂解蜡样芽胞杆菌的发现和鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的 AP631炭疽噬菌体裂解蜡样芽胞杆菌的发现和鉴定。方法通过革兰氏染色、菌落形态特征、噬菌体裂解试验、青霉素敏感试验、溶血试验、生化试验和蛋白质毒素结晶试验对炭疽疫点现场分离的5株菌进行蜡样芽胞杆菌的鉴定,通过PCR扩增、小白鼠毒力测定试验和MLST基因检测等方法对该5株菌和本实验室保存的3株被AP631炭疽噬菌体裂解的蜡样芽胞杆菌进行毒力和基因测定。结果确定了8株可被AP631炭疽噬菌体不完全裂解的蜡样芽胞杆菌。从疫点采集分离的5株菌青霉素敏感试验阴性,炭疽毒力基因PCR扩增阴性,排除了炭疽芽胞杆菌;蛋白质毒素结晶试验染色试验为阴性,排除了苏云金芽胞杆菌;根据溶血试验和生化反应等一系列鉴别实验鉴定为蜡样芽胞杆菌。8株菌的MLST基因检测发现5株菌有新的等位基因位点或ST型。结论本研究首次证明我国使用的炭疽芽胞杆菌诊断AP631噬菌体可以不完全裂解部分蜡样芽胞杆菌,存在非特异性裂解现象,提示在今后使用噬菌体鉴定炭疽杆菌时,对于外环境分离到的可疑芽胞杆菌,特别要注意关于噬菌体不完全裂解的问题,这将为炭疽诊断标准的正确制订提供新的认识并具有重要的指导意义。
- 张慧娟刘东立贺莉李伟张恩民魏建春纪建军徐苏丽刘玮张发信马国柱石一马琳梁旭东
- 关键词：蜡样芽胞杆菌
- 炭疽防控存在的问题及对策建议被引量：12
- 2017年
- 针对当前我国炭疽防控中存在的问题,为进一步做好我国炭疽防制提供启示和对策建议。选择2015年全国炭疽报告病例数最高的甘肃省甘南藏族自治州玛曲县炭疽监测点为调查对象,对该地区炭疽的疫情报告和工作情况进行调查分析。调查结果表明,尽管目前我国炭疽的防控工作取得了一定成效,但仍然存在不足。特别是在疫情报告上,现行炭疽监测指导性文件中的部分要求与基层实际情况存在偏差,炭疽诊断标准规定的指标是要求确诊病例分离到病原菌,但实际上基层采集样本的病原阳性检出率极低,致使炭疽疫情报告存在错报和漏报现象;在疫情监测上,基层防疫单位工作条件艰苦和技术力量薄弱,导致工作松懈和效率不高;在疫情处置上,缺乏人与动物疫控系统的联动机制,致使发生的多数疫点未得到彻底处理,造成了新老疫点交替发病的恶性循环。综上所述,特别提出建议,首先继续加强炭疽知识的宣传教育,提高群众的防病意识;其次从修订炭疽监测方案入手,使其更加科学化,根据炭疽临床表现的典型特征和有明确接触史的流行病学调查基本可以确诊为临床诊断病例,建议将疑似病例报告归入临床诊断病例报告,可能更符合基层工作实际现状和疫情报告管理;最后充分落实畜间预防接种等保护措施,建立健全人与动物疫控系统的信息互通渠道,并切实加强基层实验室技术能力的建设和提高基层防疫人员的待遇。
- 梁旭东于德山吕卫民王占忠
- 关键词：炭疽
