梁利国
- 作品数:52 被引量:354H指数:11
- 供职机构:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心更多>>
- 发文基金:国家现代农业产业技术体系建设项目江苏省自然科学基金江苏省水产三项工程项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学天文地球化学工程更多>>
- 基于toxR基因的SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测病原副溶血弧菌方法的建立被引量:8
- 2012年
- 基于副溶血弧菌toxR基因保守序列设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测副溶血弧菌的方法。常规PCR检测,副溶血弧菌扩增出大小为368bp的目的片段,其他4种病原细菌均为阴性;SYBRGreenⅠ实时定量PCR扩增曲线反映了PCR的指数增长阶段和平台阶段;在Tm为85℃,扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体;所制作的标准曲线在2.7×108~2.7×102拷贝数之间有较好的线性关系,相关系数为0.998,能对副溶血弧菌进行准确的定量分析;该方法检测时间从核酸抽提到结果分析仅需4~5h,较传统方法敏感、操作简单,耗时短,是副溶血弧菌引起的水产动物疾病的快速诊断及食品中针对副溶血弧菌安全检测的有效手段。
- 张晓君梁利国阎斌伦毕可然秦国民
- 关键词:副溶血弧菌SYBRREAL-TIME
- 一种洪湖碘泡虫特异性PCR检测引物及其检测方法
- 本发明涉及一种用于洪湖碘泡虫的PCR检测引物,属于生物检测技术领域。该洪湖碘泡虫PCR检测引物包括正向和反向引物:正向引物F:5’–TCGCTCAGGGTGTAATG–3’和反向引物R:5’–ATGAGGCAGCGTAA...
- 习丙文谢骏梁利国
- 文献传递
- 哈氏弧菌特异性检测方法的建立和应用被引量:6
- 2010年
- 针对哈氏弧菌外膜蛋白OmpK的基因序列设计了一对引物,从分离自患病长鳍真鲨体内的哈氏弧菌基因组中扩增获得一段约800bp大小的基因片段。进行了PCR方法的特异性和敏感性以及海产品检测试验,建立了一种检测致病性弧菌的PCR检测方法。结果表明,该法只检测出致病性哈氏弧菌。同时对不同浓度的细菌悬液扩增,结果显示,此方法对哈氏弧菌菌体DNA的最低检测量为0.139ng/μL,可以为哈氏弧菌的检测提供参考依据。
- 梁利国秦国民杨家新张晓君阎斌伦
- 关键词:哈氏弧菌PCR
- 嗜水气单胞菌耐药性研究进展被引量:5
- 2012年
- 嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)具有广泛的致病性,是水生动物尤其是鱼类最常见的致病菌。对嗜水气单胞菌耐药性的产生及机制包括固有耐药性、获得性耐药性以及耐药性基因的种类等进行了论述,并对发展前景进行了展望。
- 夏飞梁利国谢骏
- 关键词:嗜水气单胞菌耐药性耐药基因
- 18种中草药煎液对温和气单胞菌的抑、杀菌效果被引量:25
- 2010年
- 采用琼脂扩散法(打孔法)测定了五倍子等18种中草药对2株病原温和气单胞菌(Aerom onas sobria)的抑制作用,并采用试管2倍稀释法测定抑菌效果较强的中草药对这2株温和气单胞菌的抑菌和杀菌浓度。结果显示:五倍子、苏木、地锦草、石榴皮、黄芩、虎杖和山楂对病原温和气单胞菌的抑菌效果较强;苏木、五倍子、地锦草和石榴皮4种中药对2株温和气单胞菌的最小抑菌浓度(M IC)为1.56~6.25 mg/mL之间,最小杀菌浓度(MBC)为3.12~12.5 mg/mL之间,其中五倍子的抑菌和杀菌浓度最低,分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL;而金银花等11种中草药抑菌作用较小。结果表明,所选取的18种中草药中五倍子对防治由温和气单胞菌感染引起的水产动物疾病最为有效。
- 梁利国邴旭文张晓君阎斌伦杨家新
- 关键词:中草药最小抑菌浓度最小杀菌浓度
- 一种杀鲑气单胞菌杀鲑亚种快速检测引物及其应用
- 本发明涉及一种杀鲑气单胞菌杀鲑亚种快速检测引物及其应用,属于生物检测技术领域。其以fstC基因为目标基因,通过设计3对DNA引物,与待检测的DNA模板放入扩增缓冲液中,在63℃恒温环境中扩增,再以80℃恒温环境终止反应,...
- 梁利国谢骏习丙文周群兰潘良坤
- 文献传递
- 1株嗜水气单胞菌的拮抗菌鉴定及其特性研究被引量:9
- 2014年
- 从池塘养殖的团头鲂(Megalobrama amblycephala)肠道中分离筛选出15株嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)拮抗菌,其中菌株S24在平板贴片试验中对供试的嗜水气单胞菌菌株具有稳定和较高的拮抗作用。综合形态学观察、生理生化指标检测及分子序列(16S rDNA,gyrB)分析,将菌株S24确定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。拮抗菌S24和嗜水气单胞菌(菌株43)的共凝集率为(36.0%±4.3%)。共培养试验可见拮抗菌S24能明显抑制嗜水气单胞菌43的增殖;共培养18 h时,嗜水气单胞菌43的细胞数量达到最低。试验结果表明,拮抗菌株S24适宜作为潜在防治嗜水气单胞菌病的益生菌。
- 刘亚楠习丙文梁利国谢骏朱健
- 关键词:嗜水气单胞菌芽孢杆菌拮抗
- 三疣梭子蟹主要病害研究进展被引量:16
- 2010年
- 我国对三疣梭子蟹病害及其防治方面的研究仍处于初始阶段。文章根据已有文献,归纳了养殖生产中暴发流行的三疣梭子蟹病毒病、细菌病、寄生虫病和由环境因子所引起的病害及其防治方法,以供科学研究参考。
- 阎斌伦梁利国张晓君
- 关键词:三疣梭子蟹病害水产养殖业
- 团头鲂黏蛋白基因Muc5b克隆及表达分析被引量:6
- 2014年
- 黏液(mucus)在鱼体防御外界病原侵袭、信息传递、调节渗透压等方面具有重要作用。黏蛋白(mucin)作为黏液的基础骨架组分,与其相关的研究正受到广泛的关注。在本研究中,作者克隆获得团头鲂(Megalobrama amblycephala)Muc5b mRNA的部分序列3 895 bp,并通过qRT-PCR分析了Muc5b在团头鲂不同组织的表达分布及其在捕捞应激后在鳃和表皮中的表达变化。序列分析结果显示,团头鲂Muc5b与鲤(Cyprinus carpio)等脊椎动物的Muc5b有较高的同源性,其N端含有黏蛋白特异性结构域:3个VWD区域,3个C8区域,2个TIL区。组织表达分析结果表明,Muc5b在鳃和表皮表达量相对较高,在脑、脾、肾中表达水平较低,在肝、肠道几乎不表达。捕捞应激后1 h时鳃中Muc5b显著降低(P<0.05),24 h时恢复初始水平;表皮中Muc5b在4 h时显著上升(P<0.05),24 h时恢复到初始水平。
- 薛春雨董晶晶习丙文任鸣春梁利国谢骏
- 关键词:团头鲂黏液应激
- 异育银鲫致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定与药敏特性研究被引量:18
- 2012年
- 对江苏盐城某养殖场患出血病的异育银鲫(Carassius auratus gibelio)进行细菌分离鉴定和药敏试验,为该病的防控提供科学依据。从病死及濒死异育银鲫的肝脏、脾、肾中分离病原菌,经过形态观察、生理生化试验、16S rRNA序列分析,最终进行细菌鉴定,采用纸片扩散法进行药敏实验,通过人工回归感染试验确定分离菌株的致病性。分离的2株细菌(编号为WJ11-3和WJ11-4)均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),均能导致异育银鲫死亡,并出现与自然条件下基本一致的症状。药物敏感性试验结果显示,嗜水气单胞菌分离株WJ11-3对苯唑西林、林克霉素、万古霉素显示耐药性,对恩诺沙星等28种药物高度敏感;WJ11-4对苯唑西林、林克霉素、新生霉素显示耐药性,对氟苯尼考等28种药物高度敏感。本次异育银鲫的出血病由嗜水气单胞菌感染引起,可选用恩诺沙星、阿洛西林、氧氟沙星、苯唑西林、林克霉素、新生霉素等多种药物进行防治。
- 刘亚楠梁利国顾伟谢骏
- 关键词:异育银鲫嗜水气单胞菌药敏特性