杨素
- 作品数：32 被引量：186H指数：8
- 供职机构：珠海出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目珠海市软科学研究计划项目广东省农业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学理学更多>>
- 赤羽病毒单克隆抗体的研制及鉴定被引量：2
- 2008年
- 用纯化的赤羽病毒(akabane virus,AKAV)免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到2株能稳定分泌抗赤羽病毒单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为AKAV McAb 3A株和2C株。ELISA试验和中和试验结果表明,本研究制备的2株McAb均具有良好的特异性,为AKAV阳性,杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价分别为1∶640和1∶320,腹水的效价分别为1∶256000和1∶128000,亲和常数(Ka)分别为1.16×10-9和6.31×10-8mol/L,3A株的相对亲和力大于2 C株,具有病毒中和活性,中和效价分别为1∶64和1∶32,其IgG亚类为IgG1,轻链的亚型均为kappa型,2株细胞冻存3次复苏后仍能稳定分泌抗体,表明AKAV McAb制备成功,为赤羽病快速诊断方法的研究奠定了基础。
- 杨素陈博文沙才华廖秀云秦爱建
- 关键词：赤羽病单克隆抗体
- Taqman荧光PCR法检测肉制品中牛源性成分及定量研究被引量：8
- 2016年
- 本研究通过以牛线粒体保守基因序列设计的特异性引物和探针,建立了肉制品中牛源性成分Taqman荧光PCR检测方法,并对方法的特异性、灵敏度和稳定性进行了评价;通过模拟浓度标准曲线,完成了对牛源性成分的相对定量检测。结果显示,本方法具有特异性强、灵敏度高(检出限为0.001%)的特点,适用于肉制品中牛源性成分及含量的快速检测。
- 沙才华汪文辉黄海超廖秀云杨素
- 关键词：线粒体
- 禽流感群特异性间接原位RT-PCR检测方法
- 2009年
- 从GenBank下载禽流感病毒(Auian in fluenza virus,AIV)NP基因序列,通过比对选取NP基因中较为保守的片段,设计1对引物,通过RT-PCR方法扩增270 bp的目的片段,经测序确认目的片段序列正确后,用地高辛标记扩增产物制备探针。在BSL-3实验室,用AIV人工感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡后,制作细胞涂片和组织石蜡切片,然后在经前处理后的细胞涂片和石蜡切片上进行原位RT-PCR,再与地高辛标记的探针进行原位杂交,对细胞和组织中的AIV进行检测和定位。研究结果表明,本方法能检测出约1μg/L质粒的DNA,并能特异性地在细胞涂片和石蜡组织切片中检测和定位AIV,且成纤维细胞感染病毒8 h后即可检测到阳性信号,具有良好的特异性和较高的敏感性,为动物组织中AIV的检测定位和致病机理研究提供了敏感、特异和更为直观的方法。
- 杨素陈博文秦爱建廖明薄清如廖秀云沙才华王娟任涛曹伟胜
- 关键词：禽流感细胞涂片石蜡切片
- 动物蛋白饲料中动物源性成分的鉴别 1.同一PCR鉴别动物蛋白饲料中牛羊成分被引量：21
- 2003年
- 为了防止牛海绵状脑病 (俗称疯牛病 )和羊痒病传入我国 ,对来自疫区国家的动物源性饲料进行动物种类鉴别非常必要。本研究根据牛羊特异性卫星 DNA建立了同一 PCR体系同时检测羊、牛源性物质的方法。应用 DNA提取液制备模板 ,不但有效地缩短了试验时间 ,还大大降低了成本 。
- 朱绍智黄新民薄清如周志江杨素高彦生赵君徐海聂潘文波陈德镁兰乃洪冯家望陈静静
- 关键词：动物蛋白饲料动物源性成分PCR
- 食品中牛源性成分荧光PCR检测方法的建立被引量：4
- 2016年
- 目的:建立荧光PCR方法检测食品中牛源性成分。方法:本研究以牛线粒体保守基因序列设计特异性引物和探针,建立牛源性成分荧光PCR检测方法;并对方法特异性、灵敏度和稳定性进行评估。结果:该方法能够有效对牛源性成分进行快速检测,具有较的特异性强,灵敏度较高(检出限为0.0001%)。结论:该方法特异性强,灵敏度高,可以快速、准确检测畜肉食品中含有的牛源性成分。
- 沙才华黄海超谢筱筱廖秀云杨素
- 关键词：线粒体荧光PCR
- H_9型禽流感毒株免疫对H_5型禽流感抗体检测的干扰试验被引量：4
- 2001年
- 利用禽流感病毒 (AIV)美国H9型毒株、江门H9型毒株和广东某厂家生产的含AIV毒株的几种禽用商品疫苗分别免疫 40日龄的肉用鸡。通过首免和超免疫后采集首免血和超免疫血分离血清 ,分别用自制H5型抗原 (美国毒株 )、广州H5型抗原 (香港毒株 )和中国农业科学院哈尔滨兽医研究所H5型抗原对上述免疫鸡血清进行血凝抑制试验 (HI) ,测定这些H9型毒株免疫的抗血清对H5型抗体检测的影响。试验结果表明 ,单纯的H9型毒株免疫的抗血清不构成对H5型抗体检测的影响。而含AIV抗原的商品疫苗免疫的鸡血清部分显示H5型抗体阳性 ,说明某些商品疫苗中含H5型抗原。用美国H5型毒株免疫的鸡血清进行反向验证试验 ,也未发现对H9型抗体检测的影响 ,表明H5和H9型AIV不存在同源抗原 。
- 薛景山徐海聂潘文波廖秀云杨素薄清如冯家望
- 关键词：禽流感血凝抑制试验抗体检测
- A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2010年
- 根据A型H1N1亚型流感病毒2009年北美变异株和H3N2亚型流行株的基因序列,设计了3套特异性引物、TaqMan探针,分别用不同的荧光基团标记,以构建的A型流感病毒及H1N1和H3N2亚型流感病毒基因重组质粒作为阳性对照,经反应条件优化,特异性、敏感性和重复性试验,筛选出3套不同的反应体系及同一个反应参数,建立了可同时检测A型流感病毒、H1N1和H3N2亚型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法。结果表明,该方法可特异地检测H1N1(人源、猪源)、H3N2(猪源),禽流感病毒H5、H9等A型流感病毒,且与新城疫病毒、减蛋综合征病毒等其他病毒不发生交叉反应,具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,试验耗时仅3h。表明,建立的方法,一次试验即可完成A型流感病毒的初筛和H1N1、H3N2亚型流感病毒的初步确认定型。
- 杨素陈博文沙才华廖明秦爱建徐海聂廖秀云罗宝正薄清如陈伟生
- 关键词：A型流感病毒H1N1亚型H3N2亚型实时荧光RT-PCR
- 禽流感病毒通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR检测方法研究被引量：4
- 2012年
- 将套式PCR与荧光RT-PCR技术相结合,叠加这两种技术在敏感性和特异性方面的优势,建立敏感性高于常规荧光RT-PCR的套式荧光RT-PCR检测方法。从GenBank下载禽流感病毒NP基因和HA基因序列,通过比对选取较为保守的片段,设计AIV通用型及H5亚型套式荧光RT-PCR引物和TaqMan探针;利用体外转录技术制备阳性对照,构建目的片段重组质粒;经反应体系和反应条件的优化,建立套式荧光RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法可特异性地检测禽流感病毒及H5亚型AIV,在30份鱼类养殖水样中检测到19份阳性样品,具有较高的敏感性和良好的特异性;具有高通量、快速的特点,可对大批量样品同时进行检测,试验耗时仅需5h,是自然环境样品中极微量禽流感病毒检测的好方法。
- 杨素廖秀云廖明沙才华徐海聂曹伟胜陈伟生
- 关键词：禽流感病毒通用型H5亚型
- 口蹄疫等5种动物病毒基因芯片检测技术的研究被引量：34
- 2004年
- 用分子克隆方法获得口蹄疫病毒、水泡性口炎病毒、蓝舌病病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段 ,用芯片点样仪点样到包被过的玻璃片上 ,制备成检测芯片。提取样品中的RNA ,进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交 ,对杂交结果进行扫描检测 ,可同时诊断上述 5种动物传染病 ,此方法不但快速、准确、敏感 ,而且可同时进行多种病毒的检测 。
- 杨素花群义徐自忠杨晶焰谭德勇董俊杨云庆赖建华
- 关键词：口蹄疫动物病毒分子克隆水泡性口炎病毒蓝舌病病毒
- 赤羽病胶体金免疫层析试纸条的研制被引量：12
- 2009年
- 采用双抗体夹心免疫层析技术,研制了适合田间快速试验的赤羽病胶体金免疫层析试纸条。纯化赤羽病毒单克隆抗体3A和2C,用柠檬酸钠还原法制备胶体金标记纯化后的单抗作为标记抗体。分别将羊抗鼠IgG和纯化后的单抗包被于NC膜上作为质控带和检测带,以检测被检样品中的赤羽病毒(akabane virus,AKAV)。试验结果表明,所研制的试纸条敏感性较高(为10TCID50),特异性较强,还具有快速、稳定、简便等特点,适合基层动物防疫检疫部门尤其是进出境动物检疫机构进行赤羽病大批量、田间快速初筛,对赤羽病快速诊断具有重要的意义。
- 杨素陈博文沙才华廖秀云秦爱建王继华彭运平刘晓云
- 关键词：赤羽病胶体金免疫层析法
