杨一飞
- 作品数：13 被引量：34H指数：4
- 供职机构：河北工程大学附属医院更多>>
- 发文基金：邯郸市科学技术研究与发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 抗恶性黑素瘤单链抗体-鱼精蛋白融合蛋白表达载体的构建及评评价被引量：2
- 2017年
- 目的构建抗MM单链抗体-鱼精蛋白融合蛋白表达载体,并验证其表达效率及功能。方法通过PCR方法将鱼精蛋白截短片段序列与抗黑色素瘤细胞表面抗原单链抗体基因相连接;采用TaKaRap MD19-T载体试剂盒将PCR后获得的融合蛋白扩增产物进行T载体构建;构建GST融合蛋白表达载体以实现在大肠杆菌中该融合蛋白的可溶性表达,经两步亲和纯化后获得scFv-tP蛋白;采用凝胶阻滞电泳迁移率变动分析EMSA技术检测Anti-MM scFv-tP与siRNA的结合活性;荧光分子标记scFv-tP蛋白后分别采用流式细胞术检测和共聚焦显微镜观察其与Li Br细胞株进行细胞表面抗原结合活性验证;采用不同浓度FITC标记的siRNA与scFv-tP进行混合,分别与LiBr细胞(A)及DU145细胞(B)进行混合孵育,观察肿瘤细胞对携载siRNA的单链抗体的内化活性。结果成功构建抗恶性黑素瘤单链抗体-鱼精蛋白片段融合蛋白(Anti-MM scFv-tP)表达载体;实现在大肠杆菌中该融合蛋白的可溶性表达,可获得较纯的scFv-tP蛋白;Anti-MM scFv-tP蛋白与siRNA有明显的结合与携载能力,可以有效与LiBr细胞表面特异性抗原进行结合,且有较强的内化活性。结论本研究构建的抗MM单链抗体-鱼精蛋白融合蛋白表达载体可稳定表达,Anti-MM scFv-tP蛋白具有siRNA结合携载能力,可靶向识别结合进入LiBr细胞,为后续进一步研究该单链抗体融合蛋白靶向载体携载siRNA在体内外抑制恶性黑色素瘤恶性进展奠定坚实的基础。
- 王昊杨一飞王炜管冰寻萌张海王字玲赵勇
- 关键词：恶性黑色素瘤单链抗体
- 沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤疗效及Th17细胞和相关细胞因子表达的影响被引量：7
- 2018年
- 目的探讨沙利度胺对弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者外周血中Th17细胞、白细胞介素17（IL-17）、巨噬细胞炎性蛋白3α（MIP3α）表达及3年生存率的影响。方法选择2009年1月至2013年1月河北工程大学附属医院60例DLBCL患者，采用信封法随机分为联合组（30例，采用沙利度胺联合CHOP方案）和化疗组（30例，单用CHOP方案），比较两组临床疗效、不良反应、治疗前后外周血中Th17细胞、IL-17、MIP3α表达量以及3年生存率。
结果联合组和化疗组总有效率分别为73.3%（22/30）、46.7%（14/30），3年生存率分别为87.4%、40.7%，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。治疗前后联合组外周血Th17细胞百分率及IL-17表达水平分别为（0.52±0.14）%和（1.61±0.53）%、（5.61±0.75）pg/ml和（8.87±1.84）pg/ml，差异均有统计学意义（均P〈0.05），而化疗组治疗前后Th17细胞及IL-17表达水平分别为（0.75±0.05）%和（0.74±0.07）%、（5.69±0.29）pg/ml和（5.26±0.24）pg/ml，差异均无统计学意义（均P〉0.05）。治疗前后联合组患者外周血清中IL-17、MIP3αmRNA表达水平分别为8.51±0.23和13.96±0.89、27.4±1.5和83.0±8.5，差异均有统计学意义（均P〈0.05），而化疗组治疗前后分别为8.85±0.32和9.45±0.55、23.7±1.8和38.7±5.5，差异均无统计学意义（均P〉0.05）。联合组与化疗组患者不良反应差异无统计学意义（P〉0.05）。
结论沙利度胺可能通过干预Th17细胞及相关细胞因子治疗DLBCL，延长DLBCL患者生存期。
- 李丽杨一飞杨俊超周丽云
- 关键词：沙利度胺TH17细胞生存期
- miR-155在MALT淋巴瘤组织中的表达及其与预后的关系被引量：1
- 2020年
- 目的:探讨miR-155在MALT淋巴瘤组织中的表达及其与预后的关系。方法:收集2007年3月至2014年3月首次就诊于河北工程大学附属医院的36例均经病理证实为MALT淋巴瘤患者的带瘤组织和瘤旁组织(距瘤>2 cm),qPCR法检测MALT淋巴瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-155表达水平,入选患者均给予标准CHOP方案化疗治疗8个周期,根据实体瘤疗效评价标准,将患者分为有效组和无效组,对比观察两组患者血清中miR-155表达水平;通过门诊或打电话方式对患者进行随访,以miR-155表达水平的平均值为阈值将治疗后患者分为miR-155高表达组(23例)和miR-155低表达组(13例),对比观察两组患者3年生存率。结果:36例MALT淋巴瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-155表达水平分别为6.63±0.70、1.29±0.05,两者差异具有统计学意义(P<0.05);CHOP方案治疗8个周期后,有效组和无效组患者血清中miR-155表达水平分别为2.21±0.14、7.01±0.54;随访发现,治疗后miR-155高表达组和miR-155低表达组患者3年生存率分别为56.5%和76.9%,以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-155表达水平可能与MALT淋巴瘤发生发展及预后有关。
- 李丽杨一飞杨俊超李卫敏毛丹史晓雪
- 关键词：MIR-155MALT淋巴瘤预后
- RUNX1调控喉鳞状细胞癌细胞迁移侵袭的作用机制研究被引量：1
- 2022年
- 目的:探究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)对喉鳞状细胞癌(Laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞HEp2增殖、细胞周期、凋亡及迁移侵袭的调控机制。方法:运用脂质体法将si-con组(转染si-con)、si-RUNX1组(转染si-RUNX1)转染至HEp2细胞;实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(Real time fluorescence quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting,WB)实验、细胞计数试剂盒(Cell counting Kit 8,CCK8)法、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)法、流式细胞术、划痕实验、迁移侵袭(Transwel)l实验检测细胞中RUNX1的mRNA和蛋白表达,细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡及细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期依赖性蛋白激酶(Cyclin D-cyclin-dependent kinase,CDK4)、裂解的半胱氨酸蛋白酶(Cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)和磷酸化(Phosphorylation,p)-AKT的蛋白表达。结果:与si-con组相比,si-RUNX1组细胞RUNX1的mRNA和蛋白表达均显著降低,细胞增殖情况显著降低,细胞周期S期阻滞,细胞凋亡率显著升高,划痕愈合率和迁移侵袭细胞量均显著降低(P<0.05)。重要的是,干预RUNX1还抑制PI3K/AKT信号通路关键因子PI3K、p-AKT和p-AKT/AKT的蛋白表达。结论:干预RUNX1不利于HEp2细胞的存活及迁移侵袭,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路的活性有关。
- 丁雯钰常晓杨一飞
- 关键词：喉鳞状细胞癌PI3K/AKT信号通路
- 首发浅表淋巴结肿大患者病因诊断及临床分析被引量：4
- 2014年
- 目的分析以首发浅表淋巴结肿大为主要表现并最终明确病因诊断的疾病，寻找疾病诊断的线索，为病因诊断提供帮助。方法以浅表淋巴结肿大为首发表现的住院患者为初步入选者，并经组织病理检查或组织病理检查＋免疫组化检查明确诊断者，部分患者最终经分子生物学、基因检测、遗传学等检查方明确诊断并资料完整的病例为最终入选病例。结果符合要求者150例，自发病起至明确诊断的时间数日至10余年，1个月（含1个月，以下同）内明确诊断者89例，6个月内明确诊断者32例，6个月～1a内明确诊断者14例，1～3a内明确诊断者8例，3a以上方明确诊断者7例；病因较为复杂，良性肿大51例占34％，恶性肿大83例占55％，介于良恶性之间者16例占11％。结论淋巴结肿大病因复杂，明确诊断至关重要。临床表现、一般实验室检查及影像学（B超、CT、MRI等）检查可提供诊断线索并具有一定特征性；组织病理检查十免疫组化联合分子生物学检查、基因检测、遗传学检查等可明确诊断，并对预后判断、制定治疗措施、疗效观察具有较大帮助。
- 杨俊超杨一飞李丽张瑞英于艳芳申娜周晨光
- 关键词：淋巴结肿大淋巴瘤血液肿瘤
- 腺苷受体激动剂对心肌缺血再灌注损伤大鼠内质网应激的影响及其作用机制研究被引量：3
- 2018年
- 目的:探讨腺苷受体激动剂对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠内质网应激(ERS)的影响及其作用机制。方法:选取雄性成年Wistar大鼠56只,利用Langendorff装置制成大鼠离体心脏MIRI模型。随机分为四组(n=14):假手术组(Sham组)、心肌缺血再灌注组(MIRI组)、腺苷受体激动剂组(NECA组)和内质网应激抑制剂组(TUDCA组)。利用透射电镜观察四组心肌超微结构的变化;免疫组化观察心肌肌醇依赖酶1α(IRE1α)的表达情况;Western blot方法检测心肌ERS中IRE1-XBP1信号通路标志蛋白IRE1α、X盒结合蛋白1s(XBP1s)的表达水平;TUNEL检测心肌细胞凋亡情况。结果:透射电镜结果显示,Sham组肌丝排列规则致密,嵴排列整齐,外膜和肌节形态完整;MIRI组大部分肌丝断裂,肌节挛缩变形,嵴排列稀疏结构破坏,间隙增宽,可见线粒体空泡变性;NECA组及TUDCA组较MIRI组损伤减轻,内质网轻度扩张或者正常,肌丝排列较整齐。免疫组化结果发现,Sham组心肌纤维呈细长圆柱形,形态正常,少量结缔组织存在,基本无IRE1α阳性染色;MIRI组细胞排列紊乱,有许多断裂的细胞出现,IRE1α阳性染色区域显著增加,而NECA和TUDCA组细胞病理的变化较轻,相对于MIRI组,IRE1α阳性染色部位明显减少。Western blot结果显示,与Sham组相比,MIRI组的IRE1α和XBP1s蛋白的表达水平明显上升(P<0.05);而与MIRI组相比,TUDCA组及NECA组IRE1α和XBP1s的蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。TUNEL结果显示,MIRI组细胞凋亡明显,Sham组基本没有发生心肌细胞凋亡,MIRI组较NECA组及TUDCA组的凋亡细胞数更多。结论:NECA可通过抑制IRE1-XBP1信号通路来减轻ERS反应,达到保护心肌组织细胞的目的。
- 王雅男李红杰杨一飞马艳霞朱艳梅焦凤辉张仁杰杨华李宁李琴
- 关键词：腺苷受体激动剂心肌缺血再灌注损伤内质网应激
- 50例过敏性紫癜患者心肌酶谱及CRP的变化及临床意义分析被引量：2
- 2013年
- 目的分析过敏性紫癜患者心肌酶谱及CRP变化对临床的意义。方法比较分析50例HSP患者与对照组健康人心肌酶谱及CRP变化。结果过敏性紫癜患者心肌酶谱、CRP均较对照组明显升高;其中以CK-MB升高人数最多。结论①心肌酶谱异常者是心肌损害的重要指标,出现异常应及早给予保护心肌措施;②CRP变化对判断病变类型及病程长短有一定意义,是判断预后、观察疗效的较好客观指标之一,明显异常应注意合并感染的可能性;③CRP与心肌酶谱之间无明显相关性,其原因尚不清楚。
- 杨俊超杨一飞申娜李丽张瑞英于艳芳周晨光
- 关键词：紫癜过敏CRP心肌酶谱
- miR-126-3p.1通过SLC7A5调控间变性甲状腺癌细胞糖酵解的作用机制
- 2024年
- 目的 探讨miR-126-3p.1对间变性甲状腺癌(ATC)细胞糖酵解的作用,并分析其潜在的机制。方法 通过TCGA数据库检索miR-126-3p.1在甲状腺癌中的表达及与甲状腺癌诊断、预后的关系。运用荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)实验检测人正常甲状腺细胞Htori-3、人间变性甲状腺癌细胞SW1736、人乳头瘤状甲状腺癌细胞TPC-1中miR-126-3p.1、溶质运载家族7成员5(SLC7A5)的表达;将TPC-1细胞分为agomiRNA(转染agomiRNA)组、agomiR-126-3p.1(转染agomiR-126-3p.1)组、si-NC(转染si-NC)组、si-SLC7A5(转染si-SLC7A5)组、agomiR-126-3p.1+pcDNA(共转染agomiR-126-3p.1和pcDNA)组、agomiR-126-3p.1+pcDNA-SLC7A5(共转染agomiR-126-3p.1和pcDNA-SLC7A5)组,各组细胞用脂质体法转染至SW1736细胞。细胞计数试剂(CCK8)、5-溴-2-脱氧尿嘧啶(EdU)法检测细胞增殖能力;ELISA法检测细胞葡萄糖摄取、乳酸生成能力;蛋白免疫印迹(WB)实验检测细胞SLC7A5蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果 TCGA显示miR-126-3p.1在甲状腺癌中低表达。与Htori-3相比,SW1736、TPC-1细胞miR-126-3p.1低表达,SLC7A5表达显著升高(均P<0.05)。与agomiRNA组相比,agomiR-126-3p.1组细胞miR-126-3p.1表达显著升高,TPC-1细胞增殖率、EdU阳性率、相对葡萄糖消耗率、相对乳酸生成率、TPC-1细胞SLC7A5蛋白表达量均降低(P<0.05)。与antagomiRNA组相比,antagomiR126-3p.1组TPC-1细胞SLC7A5蛋白表达量显著升高(P<0.05)。敲减SLC7A5对TPC-1细胞具有相似作用。miR-126-3p.1靶向负调控SLC7A5,并且二者在甲状腺癌中呈负相关(R=-0.266,P<0.05)。过表达SLC7A5降低miR-126-3p.1表达,减弱miR-126-3p.1对SW1736细胞增殖、糖酵解的抑制作用(均P<0.05)。结论 miR-126-3p.1可能通过调控SLC7A5参与癌细胞的增殖、糖酵解,具有潜在的治疗价值。
- 丁雯钰高杨丽杨一飞
- 关键词：糖酵解
- 以全血细胞减少为首发表现的布-加综合征2例及文献复习
- 2017年
- 病例1,患者,女性,59岁,主因发现全血细胞减少3月余,腹胀伴食欲不振10余d入院。患者缘于3个月余前体检时血常规示血细胞三系水平低下,具体为：白细胞2.42×109/L,血红蛋白102 g/L,血小板82×109/L,伴脾脏增大,化验肝炎病毒指标均为阴性,骨穿、自身抗体结果均未见异常,未予特殊治疗。10余d前患者无明显诱因出现腹胀伴食欲不振,伴乏力,无头晕、咳嗽、咳痰,无呕血、黑便。遂就诊于当地医院.
- 李丽杨俊超杨一飞毛丹史晓雪周丽云
- 关键词：全血细胞减少布-加综合征文献复习首发表现食欲不振脾脏增大
- “三基”训练在皮肤性病学教学中的探索与体会被引量：4
- 2017年
- 皮肤性病学是一门以形态学教学为主的临床学科,有其自身的规律和特点。以皮肤性病学"三基"内容为基础,建立"皮损"为中心的扩展教学法及"病例"为中心的延伸教学法的理论教学模式,建立以学生为主体的临床见习及实习模式,完成理论、实践、再理论、再实践的学习历程,激励学生进行积极自主的学习,使学生具备提出、分析和解决问题的能力,提高教学质量。"三基"训练有助于培养专业知识水平全面、临床实践能力强的皮肤科专业人才。
- 王昊冉立伟杨一飞
- 关键词：皮肤性病学教学
