李越
- 作品数：40 被引量：59H指数：5
- 供职机构：北京地坛医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁波市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 一种方便的药理实验动物固定盒
- 本实用新型公开了一种方便的药理实验动物固定盒，包括主盒体，所述主盒体的左侧铰接有第一固定片、第二固定片和第三固定片，所述第一固定片、第二固定片和第三固定片的右侧均设有螺栓，所述第一固定片与主盒体的右侧螺接、所述第二固定片...
- 李越王琦
- 文献传递
- 蜂产品中氯霉素残留检测方法的研究进展被引量：7
- 2013年
- 本文综述了近年来蜂产品中氯霉素残留的主要检测方法及其研究进展,包括微生物法、免疫分析法、色谱分析法和生物传感器法。其中,免疫分析法着重介绍了酶联免疫法,色谱分析法则主要介绍了高压液相色谱和色谱-质谱联用技术。最后,对现有检测方法进行了比较分析。
- 魏玲李越陈舜琮李宝明张小莉武会娟
- 关键词：蜂产品氯霉素残留
- 双环醇对组成型雄甾烷受体和孕烷X受体介导的CYP3A4和CYP286转录的调控被引量：1
- 2009年
- 目的：构建pGL4．17-CYP3A4启动子嵌合报告基因表达载体，研究双环醇是否通过活化组成型雄甾烷受体（Constitutive Androstane Receptor，CAR）和孕烷X受体（pregnane Xreceptor．PXR）影响CYP3A4及CYP286的转录。方法：以提取的人肝组织基因组DNA为模板，应用RT-PCR技术，扩增获得CYP3A4启动子的近端启动序列（-362／＋53）和远端调控序列（-7836／-7208），并连接到pGEM-T载体，测序正确后将目的基因片段先后插入至pGL4．17报告基因表达载体。将hPXR、hCAR表达载体分别与CYP3A4及CYP286报告载体共转染HepG2细胞，利用双荧光素酶报告基因系统检测CYP3A4及CYP286均具有启动活性后，双环醇分别与转染hPXR和CYP3A4、hCAR和CYP3A4、hCAR和CYP286的HepG2细胞温孵24h后，收获细胞并裂解，检测活性以分析双环醇对CYP3A4及CYP286的转录调节途径。结果：获得pGL4．17-CYP3A4启动子嵌合报告基因表达载体，经酶切鉴定及核酸序列测定证实该报告基因表达载体构建成功。双环醇主要通过活化CAR受体途径，调控CYP3A4和CYP286的转录，而PXR受体途径较少参与。
- 李越李燕
- 关键词：CYP3A4孕烷X受体受体介导转录调节双环醇甾烷
- ILF2低表达下调CENPE抑制乳腺癌细胞增殖的机制研究
- 背景:近年来，随着生活方式的改变，工作生活压力的逐渐加大，乳腺癌已成为女性恶性肿瘤死亡的主要原因。过去，临床医生根据恶性肿瘤的大小、侵袭程度、是否有淋巴结转移或有无发生远处转移等情况确立了肿瘤的TNM分期，以此帮助医生们...
- 李越
- 关键词：乳腺癌细胞增殖病理机制
- 肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HA8蛋白反式激活基因的筛选
- 2011年
- 目的应用抑制性消减杂交（SSH）技术及生物信息学技术筛选肝细胞内人类次要组织相容性抗原-HA8（HLA-HA8）的反式激活基因。方法以HLA-HA8基因表达质粒pcDNA3.1（-）-HLA-HA8和空载体pcDNA3.1（-）转染HepG2细胞,提取mRNA并反转录合成双链cDNA（dscDNA）,分别标记为Tester和Driver;经RsaI酶切后,将Tester cDNA分成两组,分别与两种不同的接头adapter 1和adapter 2衔接,再与Driver cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将产物与pGEM-T easy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠埃希菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建HLA-HA8反式激活基因差异表达cDNA消减文库。扩增后得到101个阳性克隆,菌落PCR分析均得到200~1000bp的插入片段。随机挑选其中28个阳性片段测序,同源分析结果显示,共获得16种编码基因,其中4个功能未知。结论 HLA-HA8基因反式调节基因与细胞结构和生长、物质及能量代谢、物质转运和信号转导密切相关,为HLA-HA8的功能以及HBV感染慢性化机制研究提供了新的思路。
- 王琦蓝贤勇李越武会娟张丽娟成军
- 关键词：次要组织相容性抗原反式激活
- 人源CYP450s高表达体系和核受体介导的人源CYP3A4及MDR1诱导作用研究体系的构建和应用
- 本论文应用分子生物学和细胞生物学技术，建立人源CYP450s同工酶高表达体系和核受体介导的CYP3A4和MDR1诱导作用研究体系。再利用同工酶高表达体系初步探讨黄芩素和黄芩苷对CYP2E1重组酶的抑制作用;通过核受体介导...
- 李越
- 关键词：CYP450孕烷X受体
- 文献传递
- 42例特发性非肝硬化性门脉高压的病理特点分析被引量：5
- 2020年
- 目的分析和观察特发性非肝硬化性门脉高压(idiopathic non-cirrhotic portal hypertension,INCPH)的临床和病理特征。方法回顾性总结了首都医科大学附属北京地坛医院在2008年1月至2019年10月收治的、经超声引导下肝脏穿刺活检病理学确诊的42例INCPH,依据日本卫生福利部INCPH研究委员会制定的诊断标准,对首发症状、体征、实验室检查、影像学、内镜和病理学等进行了分析和总结。结果患者性别男女比例相当,平均发病年龄(39.3±12.7)岁;首发症状以肝区不适、脾大或血液系统异常最为常见;近50%患者无明显阳性体征,阳性体征中以脾大较为常见;42.9%的患者肝功能检测正常,其余患者肝损伤程度以轻、中度为主;血常规检测以白细胞、血小板降低最为常见;病理学方面,所有患者均未见到假小叶和完整纤维间隔形成,但小叶间门静脉不规则扩张、门静脉末支异常、汇管区海绵状新生血管增生并向周围肝板内“疝入”和肝细胞结节性增生等可在较大比例患者中存在;影像学方面回报肝硬化较为常见,同时合并脾大;胃镜检查可以见到食管胃静脉曲张。结论对于首发症状为脾大伴脾功能亢进但肝功能损伤不重、且可以除外常见肝损伤因素的患者,可建议其接受肝穿活检寻找组织学证据,以诊断或除外诊断INCPH。
- 李越周新刚杨坤张亮马志园王琦王鹏
- 关键词：肝功能损伤
- 重组人丝氨酸蛋白酶抑制因子Hespintor Kazal结构域的原核表达、纯化及活性鉴定
- 2013年
- Hespintor是应用抑制消减杂交技术(SSH)从肝母细胞瘤细胞系HepG2中筛选得到的一未知功能蛋白,序列分析表明该蛋白属于Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制因子(Serine proteinase inhibitor,Serpin)家族中的一个分泌型新成员,具有与食管癌相关基因2(Esophageal cancer related gene 2,ECRG2)高度同源的Serpin基本结构。为了进一步阐明Hespintor的生物学功能,必须得到纯化的Hespintor蛋白。先将Hespintor Kazal结构域编码序列亚克隆至原核表达载体pET-40b(+),转化至Rosetta(DE3)表达宿主菌中。经0.25 mmol/L IPTG,30℃诱导5 h获得了分子量约为42 kDa的Hespintor-Kazal重组融合蛋白的优化表达,Western blotting证实了重组蛋白的特异性。Hespintor-Kazal重组融合蛋白以包涵体形式在宿主菌中表达,利用金属螯合亲和层析和阴离子交换层析柱对重组蛋白进行两步纯化。初步的活性鉴定表明,纯化的Hespintor-Kazal重组融合蛋白能特异性抑制胰蛋白酶的水解活性,提示Hespintor具有作为一种新型抗肿瘤药物的潜在开发价值。
- 冯洁伦永志李越武会娟李宝明魏玲张小莉王雪蕾迟庆
- 关键词：原核表达
- 橙皮苷对四环素所致小鼠脂肪肝的保护作用被引量：1
- 2015年
- 目的观察橙皮苷对四环素引起小鼠非酒精性脂肪肝的保护作用。方法将ICR小鼠分为A、B、C组,A组给予橙皮苷(300 mg/kg)连续灌胃10 d,B、C组给予同体积溶剂;在第10天给药后1 h时A、B组腹腔注射四环素200 mg/kg 20 m L,C组给予相同p H值等体积生理盐水。给毒后24 h眼球取血,并取肝脏,检测血清ALT、AST、TG、TC及肝组织TG、TC、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酯(SOD)、谷胱甘肽(GSH),HE染色观察肝脏组织病理学改变。结果与C组比较,B组血清ALT、AST升高而TG、TC降低,肝组织中TG、TC、MDA、GSH升高,P均<0.05;与B组比较,A组血清ALT、AST降低而TG、TC升高,肝组织中TG、TC降低而GSH升高,P均<0.05。C组小鼠肝脏未见明显病变,B组动物肝脏的中央静脉和小叶间静脉周围出现肝细胞肿胀、水样变性等病理改变。A组给药可减轻上述病理改变。结论橙皮苷对四环素所致小鼠脂肪肝具有明显的保护作用。
- 姚晓敏倪铭李越魏玲林爱斌李宏伟
- 关键词：非酒精性脂肪肝橙皮苷四环素甘油三酯胆固醇
- HCBP12融合蛋白的表达、纯化及多抗制备被引量：2
- 2008年
- 目的:构建丙型肝炎病毒核心抗原结合蛋白12(HCVCore binding protein,HCBP12)原核表达载体,在大肠埃希菌中进行表达、纯化HCBP12融合蛋白并制备兔抗HCBP12多克隆抗体。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以提取的HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得HCBP12基因片段,插入至原核表达载体pET-32a(+)中,构建原核表达载体pET-32a(+)-HCBP12,转化大肠埃希菌BL21,以异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,获得HCBP12融合蛋白的可诱导性表达,并通过SDS-PAGE电泳、Western Blot免疫印迹分析和证实融合蛋白表达的特异性。利用Ni+亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。纯化蛋白免疫新西兰兔,获得抗HCBP12多克隆抗体。以纯化HCBP12为抗原,利用Western blot和ELISA法对多克隆抗体进行特异性和效价检测。结果:HCBP12融合蛋白表达成功。SDS-PAGE分析表明其为包涵体表达。成功获得了融合蛋白纯品及兔抗HCBP12多克隆抗体。ELISA法表明多克隆抗体效价>1512000,Western blot检测证明多克隆抗体的特异性良好。结论:成功表达、纯化HCBP12融合蛋白,并获得高特异性、高效价兔抗HCBP12多克隆抗体,为研究HCBP12蛋白的生物学功能及丙肝的临床治疗提供了重要的实验工具。
- 李越王琦林原成军李康李华
- 关键词：融合蛋白蛋白纯化多克隆抗体
