李玉昌
- 作品数：20 被引量：84H指数：4
- 供职机构：河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省科技攻关计划河南省高校青年骨干教师资助项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大鼠热激因子结合蛋白1全长cDNA克隆与分析被引量：3
- 2004年
- 热激因子结合蛋白1(heatshockfactorbindingprotein1,HSBP1)是一种新发现的高保守、低分子质量、定位于核中的一种转录因子,它可抑制HSF1的转录域活性,并协同HSP70负调控热激反应。在哺乳动物中仅有人与小鼠的HSBP1cDNA序列被克隆,大鼠中的HSBP1尚未有人报道,我们根据人与小鼠的HSBP1氨基酸的N端和C端保守序列设计了简并引物,采用RT PCR方法从大鼠神经胶质瘤细胞株中克隆大鼠HSBP1的片段,然后采用Southern印迹方法从建立的神经胶质瘤细胞的cDNA文库中调取了它的cDNA全长序列,递交给GenBank,获登陆号为AF522937。并借助于大鼠基因组测序成果,将大鼠HSBP1基因定位于19q12,发现HSBP1基因有3个内含子和4个外显子,其中外显子1和外显子4之间距离5829bp。且对HSBP1的Unigene检索显示HSBP1广泛存在于大鼠各组织、器官中,揭示HSBP1在生理活动中起着非常重要的作用。根据已发表的其他物种的HSBP1的氨基酸序列用DNAman软件做了它的同源关系分析,结果显示进化关系较近的物种中,HSBP1氨基酸序列的相似性与其从形态解剖所得的系统进化关系是一致的。
- 张会勇李玉昌林俊堂徐存拴
- 关键词：RT-PCRCDNA文库
- 大鼠十七种组织器官的蛋白图谱和它们的蛋白水解酶活性分析被引量：1
- 2003年
- 用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶的原位复性电泳方法分析了大鼠脑、心脏、肺、舌、胃、小肠、大肠、肝脏、胰脏、肾脏、睾丸、附睾、输精管、阴茎、卵巢、子宫、肌肉等组织器官的蛋白质图谱和蛋白水解酶活性。
- 付远志王晓涛李玉昌林俊堂徐存拴
- 关键词：蛋白水解酶蛋白质图谱组织器官酶活性
- 大鼠短间隔连续部分肝切除中上调表达基因的克隆与功能分析
- 2002年
- 以短间隔连续部分肝切除模型（0-4-40-76-112h)中0h肝组织材料做为驱动方，112h肝组织材料做为试验方，利用抑制性消减杂交技术构建了高效率的正向消减文库，从文库中随机挑取80个克隆进行PCR分析，有75个克隆中含外源插入片段，经测序表明他们代表了53个表达序列标记。在这些表达序列标记中，有9个与GenBank完全同源，有44个与GenBank不完全同源，其中有1个与GenBank无任何同源性，它可能代表了一个新基因。消减文库的建立为批量克隆和分析肝再生中上调表达基因奠定了基础。
- 李玉昌林俊堂
- 关键词：抑制性消减杂交短间隔连续部分肝切除表达基因
- 常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及质量分析(英文)被引量：4
- 2004年
- 目的 利用 RNA转录 5′末端转换机制 (SMART)构建适合免疫筛选的经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞 c DNA文库。方法 通过反转录 PCR和长距离 PCR获得常氏肝癌细胞的全长 c DNA,然后利用 SMART c DNA文库构建试剂盒建立经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞c DNA文库。结果 通过测定 ,高质量的包含常氏肝癌细胞全长 c DNA的 c DNA文库得到建立 ,扩增 c DNA文库的滴度高达 4.5× 10 10 pfu· ml- 1,重组子内平均插入外源基因片段长度在 2 0 0 bp到 40 0 0 bp之间 ,约 150 0 bp左右 ,并且此文库适合免疫筛选。结论 结果显示所构建的经去分化培养基处理的常氏肝癌细胞 c DNA文库具有很高的质量 ,为进一步研究常氏肝癌细胞和筛选相关基因获得 c
- 林俊堂王聪睿张会勇李玉昌徐存拴
- 关键词：CDNA文库免疫筛选
- 大鼠短间隔连续部分肝切除上调表达基因的克隆与分析
- 2003年
- 以短间隔连续部分肝切除 1 1 2h为试验方 ,以 0h对照为驱动方 ,应用抑制性消减杂交技术构建了高效率的正向消减cDNA文库 ,从中随机挑取的 5 0个克隆中有 45个包含了 1 0 0～ 3 5 0bp插入片段 ,对这些片段进行测序后经GenBankblast同源性检索 ,表明 8个片段均为未知新序列。
- 李玉昌徐存拴林俊堂张会勇李文强魏明旭张云汉
- 关键词：短间隔连续部分肝切除抑制性消减杂交肝再生基因克隆
- ADAMs的结构和功能被引量：6
- 2001年
- ADAMs是近几年发现的一类锚定于细胞膜的跨膜糖蛋白,含多个结构域并具有多种功能,它们的结构域包括信号肽区、前调控区、金属蛋白水解酶区、解联蛋白区、富半胱氨酸区、上皮生长因子区、跨膜区和胞内区等;它们的功能包括蛋白水解、分子修饰、分子释放、细胞与细胞和细胞与基质相互作用、细胞识别、细胞内信号传导、细胞间通讯等,简要总结了ADAMs一级结构、高级结构、理化性质、结构区组成、各结构区功能以及ADAMs在肝再生过程中的变化等方面的研究进展。
- 徐存拴张为民林俊堂胡轶红梁卫红李玉昌
- 关键词：ADAMS信号肽整联蛋白跨膜糖蛋白结构域
- 大鼠短间隔连续部分肝切除后ADAMs mRNA表达分析被引量：3
- 2001年
- 目的 说明ADAMs(adisintegrinandmetalloproteinase)在肝再生的不同阶段表达不同。方法 用RT -PCR方法和ADAMs通用引物对本实验建立的大鼠短间隔连续部分肝切除 (shortintervalsuccessivepartialhepatectomy ,SISPH )模型 0、4、8、12hr ,0、36、72、10 8、14 4hr及 0、4、40、76、112hr肝再生过程中的mRNA进行分析。结果 正常大鼠和SISPH后大鼠肝脏均存在ADAMs的表达 ,但表达强度不同。
- 李玉昌马军林俊堂梁卫红徐存拴
- 关键词：ADAMS通用引物RT-PCR肝再生
- 中国淡水涡虫RAPD分析条件的优化(简报)被引量：6
- 2004年
- 涡虫是动物界最早出现两侧对称、三胚层、营自由生活的扁形动物,也是由水生向陆生过渡的重要类群,因而在动物系统演化中占有重要地位.由于涡虫再生能力极强,因此成为研究细胞分化与去分化分子机理的理想材料,近百年来一直是国际动物学界热衷探索的研究领域之一.然而遗憾的是,我国动物学界从事涡虫研究者甚少,属于基础十分薄弱的学科.中国涡虫资源丰富,分布广泛,近年来在淡水三肠目(Tricladida)研究领域有较大突破[1].
- 张合彩陈广文李玉昌徐存拴
- 关键词：涡虫DNA提取RAPD
- 常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及ADAMs相关基因的免疫筛选与序列分析被引量：4
- 2004年
- 抽提常氏肝癌细胞的总RNA ,以oligo(dT)为引物 ,通过两次转换模板 ,采用LD PCR合成全长cDNA ,在cDNA两端引入SfiⅠ的酶切位点。以λTriplEX2为载体经过包装后构建了常氏肝癌细胞cDNA表达文库。以ADAMs通用抗体 ,用免疫筛选技术从常氏肝癌cDNA文库中筛选出 2 2个阳性克隆 ,经测序分析和BLAST检索 ,证实其中一个为新基因 ,部分区域具有蛋白酶的功能 ,对该基因进行了GenBank登录 ,获注册号为AY0 780 70。
- 林俊堂李玉昌张会勇徐存拴
- 关键词：CDNA文库免疫筛选基因克隆
- 短间隔连续部分肝切除(SISPH)中ADAMs基因表达差异分析被引量：2
- 2001年
- 用ADAMs通用引物进行RT PCR ,以检测短间隔连续部分肝切除 ( 4 3 6 3 6 3 6SPH)中不同恢复时间ADAMs基因转录情况。结果表明 :( 1)ADAMs基因转录无个体和性别差异 ,也无肝再生恢复期依赖性 ;( 2 )PCR产物克隆、测序证实 ,肝脏中有MDC9同源序列存在 ;( 3 )用MDC9特异性引物PCR检测表明 ,MDC9在正常和不同恢复时期肝脏中均有一定水平转录 。
- 梁卫红林俊堂李玉昌徐存拴
- 关键词：肝再生RTPCRADAMS
